Выявление, изучение структуры и иммунобиологических свойств S-слоя чумного микроба

• Автор: Антонова, Оксана Александровна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 161 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ СТРУКТУРЕ ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОК ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ
1 Л.Структура и функции поверхностных белковых и глнкопротеидных Бслоев бактериальных клеток
1.2.Разнообразие, биохимическая структура и иммуногенные свойства антигенов чумного микроба

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА И ОПТИМИЗАЦИЯ МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ И ДЕТЕКЦИИ МОЛЕКУЛ, ОТНОСЯЩИХСЯ К БСЛОЮ ЧУМНОГО МИКРОБА ЗЛ. Создание оптимальной схемы выделения и очистки белков Бслоя возбудителя чумы
3.2. Разработка методов качественного и количественного определения компонентов Бслоя чумного микроба

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ПОВЕРХНОСТНЫХ СТРУКТУР КЛЕТОК ЧУМНОГО МИКРОБА, ОТНОСЯЩИХСЯ К БСЛОЮ

4.1. Структура, иммунохимические и биокииетические особенности молекул Бслоя чу.много микроба

4.2. Опенка некоторых иммунобиологических свойств белков Бслоя чумного микроба

4.3. Влияние белкоп Бслоя на функциональную структуру поверхности клеток возбудителя чумы
ГЛАВА 5. ПОЛИСАХАРИДНЫЙ АНТИГЕН Р3 И ЕГО ВЗАИМООТНОШЕНИЕ С СЛОЕМ ЧУМНОГО МИКРОБА
5.1. Оптимизация способов получения и очистки антигена Р3
5.2. Биохимический анализ структуры Р3 антигена и его основные свойства
5.3. Иммунохимические и иммунобиологические свойства Р3 антигена
5.4. Связь антигена Р3 и слоя чумного микроба
5.5. Прикладные аспекты изучения слоя чумного микроба и его составляющих
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Чериоголовка, Второй Всероссийской конференции Гомеостаз и инфекционный процесс, Саратов, Международной научнопрактической конференции Проблемы санитарноэпидемиологической охраны территории стран СНГ, Саратов, Ти Международном конгрессе по исрсиниозам, Нидерланды, Нижмеген i, Международной конференции Оптическая микроскопия I, Швеция, Стокгольм, научной конференции, посвященной летию НИИ МО РФ, Киров, Международной научной конференции посвященной летию НПО Питательные среды, Махачкала, . Публикации. Основное содержание диссертации отражено в опубликованных работах. Результаты обнаружения у чумного микроба поверхностных структур, относящихся к слоям прокариот и их элскгронномикроскопнческая характеристика. Разработанные оптимальные методы выделения, концентрирования и финальной очистки молекул 8слоя чумного микроба. Результаты изучения химического состава, антигенных свойств, биохимических, биофизических и физиологических функций гликопротеида 8слоя чумного микроба. Предложенный комплекс методов выявления и количественного определения молекул 8слоя чумного микроба с помощью иммуноферментных и иммуносуспензионных реакций. Новые данные о структуре полисахаридного антигена чумного микроба РЗ и его взаимоотношениях с Яслоем чумного микроба. Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, четырех глав собственных исследований, заключения, выводов и списка использованных источников. Объем диссертации 0 страниц машинописного текста. Список литературы содержит 5 отечественных и 1 иностранных источников. Работа иллюстрирована рисунками, 2 схемами и 8 таблицами. ГЛАВА 1. В последнее время сформировались четкие представления о так называемых слоях от поверхность, представляющих собой регулярную паракристалличсскую структуру клетки , i . Впервые существование макромолекулярного монослоя на поверхности бактерий было показано в г. Хоувинком Северина Л. О., . С тех пор эти структуры были обнаружены у различных видов микроорганизмов, относящихся ко всем основным филогенетическим группам бактерий и являющихся универсальным признаком архебактерий vi , . I, . Часто к белкам слоя относят разнообразные порины и так называемые бслки i, большинство из которых являются, повидимому, естественными димерными кристаллическими формами порина, а также некоторые другие белки и гликопротеиды с неясной специализацией М. Синтез слоев, как правило, детерминирован хромосомными генами по данным ряда авторов, гены многокопийны, расположены единым кластером и обладают эффективным промотором i . М. , , . Хотя эти структуры интенсивно изучаются, только около генов, кодирующих слои, были клонированы и секвенированы . М . В частности, был клонирован ген , кодирующий субъединицу белка высоковирулентного штамма рыбопатогенных бактерий i , , I5,, охарактеризован ген , ответственный за синтез поверхностною белка i i М. Причем электронномикроскопическим анализом установлено, что слой не наблюдался на клетках В. I. . Исследования, проведенные на клетках , покачали, что изменение в экспрессии белка слоя этих бактерий может включать перестановку полных копий генов из одиночного большого локуса, содержащего многочисленные гомологи, а потеря экспрессии белков может быть результатом потери систем, контролирующих ген i М. М.М. Известно, что штаммы С. А и В, что связано со структурой лнпополисахарида ЛИС . Было установлено, что ген , кодирующий белок слоя С. В типа, подобен по структуре А гену. В то же время молекулы белка слоя типа А и типа В различаются по концевым последовательностям и изоэлсктрическон точке, а вторичное прикрепление белков слоя является серогипспецифичным феноменом, коррелирующим с типом ЛПС i . Секреция белков слоя С. Белок слоя i экскрет и руется посредством собственной секреционной системы i . Для показано, что белок слоя i кодируется геном из нуклеотидов и состоит из аминокислотных остатков. С. , а Сконцсвая последовательности X токсинам грамотрицательных бактерий. Считают, что коиец действует как якорь для компонентов клеточной поверхности, а Сконец участвует в сборке и транспорте белка В. М. .