Биологические свойства и дифференциальная диагностика буркхольдерий, имеющих значение в медицинской практике

• Автор: Сенина, Татьяна Васильевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Волгоград
• Количество страниц: 124 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Инфекции, вызываемые буркхольдериями.

1.2. Принципы идентификации буркхольдерий.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Штаммы микроорганизмов, используемые в работе

2.2. Питательные среды и условия культивирования

2.3. Постановка биохимических реакций.

2.4. Постановка серологических реакций

2.5. Определение чувствительности штаммов к антибактериальным препаратам, детергентам и красителям
2.6. Определение вирулентности и иммуногенности буркхольдерий
для лабораторных животных.
2.7. Идентификация штаммов буркхольдерий по системе
ПеГепгиеэ .
2.8. Генетическоя трансформация у буркхольдрий
2.9. Постановка ПЦР.
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Сравнительное изучение роста буркхольдерий на питательных и селективных средах
3.2. Биохимические тесты
3.3 .Серологические исследования
3.4. Резистентность буркхольдерий к антибактериальным
препаратам и разного рода ингибиторам.
3.5. Вирулентность и иммуногенность буркхольдерий для лабораторных животных.
3.6. Идентификация штаммов буркхольдерий по системе
ЫеГегпИеь .
3.7. Трансформация хромосомной ДНК у различных видов буркхольдерий.
3.8. ПЦР в идентификации буркхольдерий
3.9. Принципы и схема идентификации буркхольдерий, наиболее значимых в медицинской практике.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Диагностические препараты как иммунологические, так и генетические имеются на разных фазах разработок только в специализированных научноисследовательских учреждениях и фактически не доступны для практических медицинских и ветеринарных лабораторий, в которых автоматические системы идентификации изза своей дороговизны также отсутствуют. Учитывая высокую патогенность данных микроорганизмов для человека и многих видов животных, многообразие клинических форм заболеваний, отсутствие средств специфической профилактики и недостаточную эффективность химиотерапии, очевидна актуальность разработки и совершенствования схем идентификации и внутривидового типирования возбудителей мелиоидоза и сапа i i и В. Представленные в диссертации материалы получены в ходе выполнения в ВолгНИПЧИ плановой государственной тематики по лабораторной диагностике и идентификации возбудителей сапа и мелиоидоза, в частности тем 27 и4 3 , . Цель работы изучение культуральных, биохимических и патогенных свойств культур В. В.i, В. .ii для выявления набора тестов, имеющих значение в разработке дифференциальных схем идентификации. Оценить значимость различных идентификационных тестов, применяемых при дифференциальной диагностике буркхольдерий. Изучить вирулентность штаммов буркхольдерий, филогенетически расположенных в системе сапрофит . .ii, незавершенный паразит В. В.i. Сопоставить резистентность буркхольдерий к антибактериальным препаратам, красителям и детергентам. Изучить различия по отдельным углеводородам, используемым различными видами буркхольдерий в качестве источника углерода и энергии. Разработать схемы идентификации буркхольдерий, имеющих медицинское значение на различных таксономических уровнях род, вид, биовар. Охарактеризованы гено и фенотипические свойства буркхольдерий, необходимые для разработки диагностических и профилактических средств, а также для расшифровки механизмов реализации патогенности возбудителей сапа и мелиоидоза. Впервые в основу разработки схемы идентификации патогенных буркхольдерий заложены принципы полифазной таксономии, предусматривающие сочетанное применение генетических, биохимических, иммунологических методик при окончательном определении таксономической позиции изучаемого штамма. Выявлены наборы основных дифференциальных тестов фенотипических свойств буркхольдерий, позволившие составить диагностические ключи для определения рода, вида и биоваров идентифицируемых культур возбудителей сапа, мелиоидоза и близкородственных им буркхольдерий. Впервые в качестве имитатора возбудителя мелиоидоза для учебных целей курсы бактериологов, учения по индикации возбудителей ООИ вместо убитых клеток В. .ii, имеющего высокую степень идентичности биохимических, культуральных и антигенных свойств с возбудителем мелиоидоза. Определены наборы идентификационных признаков различных видов буркхольдерий, позволяющие создать практические схемы их дифференциальной диагностики, пригодные для микробиологических лабораторий. Написаны Методические рекомендации по постановке диагностических тестов, необходимых для внутривидовой дифференциации штаммов возбудителей сапа и мелиоидоза индивидуальная карта штамма, утвержденные директором института д. Алексеевым В. В. , протокол 6. Материалы настоящего исследования использованы при написании глав Практического пособия для подготовки врачейбактериологов и эпидемиологов по вопросам противодействия биотерроризму, утвержденного Руководителем Департамента госсанэпиднадзора РФ С. И.Ивановым . Штамм i ii В9 депонирован в Саратовском научноисследовательском противочумном институте Микроб в Государственной коллекции патогенных бактерий Микроб, как В. КМ 1 с формулировкой перспективный в качестве учебного штаммаимитатора возбудителя мелиоидоза. Документация на оформление патента на этот штамм отправлена в Российское агентство по патентам и товарным знакам. Заявка от . Предложенная схема идентификации буркхольдерий, имеющих значение в медицинской практике, позволяет на основе известных лабораторных тестов определить принадлежность культур к видам, входящим в группы i и i. Степень идентичности В. .i и В .