Ассоциация Yersinia pseudotuberculosis с цианобактериями : Популяционный и ультраструктурный анализ

• Автор: Солохина, Людмила Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 118 с.

Оглавление.
Введение.

Обзор литературы.

Глава 1. Взаимодействия в альгобактериальмых ассоциациях

1.1. Общие закономерности взаимоотношений водорослей и бактерий.

1.2. Воздействие метаболитов водорослей на бактерий

1.3. Взаимодействие патогенных бактерий с микроводорослями.

Глава 2. Нвкультивируемые покоящиеся формы патогенных бактерий

2.1. Общие сведения о некультивируемых формах бактерий.

2.2. Ультраструктура некультивируемых форм.

2.3. Индукторы реверсии и свойства ревертантов.

Глава 3. Материалы и методы исследований
3.1. Культивирование и идентификация ii i
3 2. Культивирование и заражение цианобактерий
синезеленых водорослей viii.
3 3 Подготовка проб и постановка полимеразной цепной реакции ПЦР
для индикации иерсиний в ассоциации с водорослями.
3 4. Оценка гетерогенности популяции ii i
по признаку цитопатогенности и постановка протистоцидного теста.
3 5 Оценка биохимической и агглютинабельмой изменчивости i
3.6. Рекультивация покоящихся форм иерсиний.
3.7. Восстановление у ревертантов свойств исходной культуры.
3 8. Выявление слизистых чехликов в культуре цианобактерий синезеленых
водорослей для световой и электронной микроскопии
3 9 Электронномикроскопический анализ i
в ассоциации с синезелеными
водорослями.
3.8. Статистическая обработка результатов.
Объем экспериментальных исследований
Результаты исследований.
Глава 4. Вегетативные и покоящиеся формы в популяции ii i в процессе взаимодействия с цианобактериями
4 1 Моделирование альгобактериальной ассоциации
4 2 Влияние оптимальных и низких температур на альгобактериальную ассоциацию и переход иерсиний в покоящееся
состояние
4 3 Воздействие экзометаболитов синезеленых водорослей в разных стадиях роста
на популяционную динамику ii i и образование покоящихся
Глава 5. Фенотипическая изменчивость вегетативных форм иерсиний при
взаимодействии с цианобактериями синезелеными водорослями
5 1 Изменение культуральноморфологических свойств
5 2 Изменение биохимических признаков
5 3 Изменение агглюгинабельных свойств
5 4 Клональная структура изолятов иерсиний по признаку цитопатогенности из ассоциации с водорослями и почвенной
вытяжки
Глава 6. Реверсия покоящихся форм ii i из ассоциации с цианобактериями сииеэелеиыми водорослями
6 1 Получение и характеристика ревертантов иерсиний
6 2 Восстановление у ревертантов свойств исходной культуры
Г лава 7. Изучение ii i в ассоциации с цианобактериями на клеточном и ультраструктурном уровнях.
Изучение ассоциации иерсинии цианобактерии с помощью световой
микроскопии
7 2 Ультраструктурная организация вегетативных и покоящихся форм иерсиний при взаимодействии с водорослями
7 3 Ультраструктурная характеристика ревертантов иерсиний
Глава 8. Основные закономерности взаимодействия ii i с
цианобактериями обсуждение результатов
ВыводыЮЗ
Литература


Гетерогенность популяций патогенных бактерий обеспечивает необходимый потенциал изменчивости за счет клональноселекционных процессов, обусловливающих преобладание тех или иных клонов, наиболее адекватных конкретным условиям среды. Это отражено в концепции саморегуляции паразитарных систем Беляков В. Д. и др. Беляков В Д. Яфаев РХ, которая, с учетом специфики механизма регуляции, вполне правомерна и для природноочаговых инфекций Литвин В. Ю. и др. Литвин В. Ю., Коренберг Э. И., Литвин В. Ю., . Циркуляция возбудителей сапронозов связана с различными сочленами почвенных и водных биот простейшими, низшими ракообразными, червями, моллюсками, насекомыми, рыбами и др. При этом выявлено усиление вирулентности ряда бактерий при пассировании на простейших, что связано с селекцией и накоплением цитопатогенных клонов в ходе взаимодействия с простейшими Пушкарева ВИ, Литвин ВЮ, Литвин В Ю. Пушкарева В И . Пушкарева В. И., , Литвин В Ю и др. Не менее важны и закономерности резервации патогенных бактерий, определяющие длительное сохранение возбудителей инфекций в межзпизоотические межэпидемические периоды, которые изучены гораздо слабее, и лишь в последние годы подчеркивается их значимость в эпидемиологии и природной очаговости инфекций Литвин В. Ю. и др. Литвин В Ю. Коренберг ЭИ , Литвин В. Ю , Гинцбург А Л , . Одним их важных механизмов резервации признан переход неспорообразующих бактерий в покоящееся некультивируемое состояние Гинцбург АЛ, Романова ЮМ, Литвин В. Ю. и др. Vii Четина ЕВ и др. Троицкая В В и др. Сучков ЮГ и др. Литвин В. Ю и др. Емельяненко Е. Н., . Такие покоящиеся формы функционально сходны со спорами клостридий или бацилл Романова ЮМ. Гинцбург АЛ. Романова ЮМ. Литвин ВЮ и др. Резервация патогенных бактерий тесно связана с их хозяевами в почвенных и водных экосистемах. Так, возбудители чумы и псевдотуберкулеза переходят в предцисты почвенных амеб Никульшин С В. Доказано длительное свыше 1 года сохранение покоящихся клеток i и ii в цистах инфузорий после их инцистирования при низкой температуре Пушкарева В И , . Микроводоросли также взаимодействуют с потенциально патогенными микроорганизмами Многие синезеленые водоросли цианобактерии окружены слизистыми оболочками, в которых постоянно обитают бактерии, утилизирующие вещества слизи, прижизненные выделения и отмирающие клетки водорослей Зенова ГМ. Кроме того, слизистые компоненты цианобактерий предотвращают дегидратацию легионелл и способствуют их выживанию в аэрозолях Тартаковский И С. Установлены симбиотические связи синезеленых водорослей с холерным вибрионом, причем доказана индуцирующая роль цианобактерий в переходе холерного вибриона в. Покоящиеся формы холерных вибрионов свыше 2 лет регистрировались в слизистых чехлах цианобактерий I е а , . Водоросли выделяют во внешнюю среду биологически активные соединения, способные стимулировать или угнетать размножение микроорганизмов Установлено также различное воздействие водорослей и продуктов их метаболизма на существование патогенных иерсиний и листерий в вегетативной форме, а также на их переход в покоящееся некультивируемое состояние Сучков Ю Г. Пушкарева В И и др. Литвин В Ю. Выявить фенотипическую изменчивость ii i культуральные морфологические, биохимические свойства, агглютинабельность, цитопатогенность в ходе длительного совместного культивирования с водорослями. Определить возможность перехода иерсиний в покоящееся состояние в ассоциации с синеэелены. Выявить закономерности изменения ультраструктуры иерсиний при длительном взаимодействии с цианобактериями и в процессе образования покоящихся форм. Оценить возможность длительного сохранения иерсиний в слизистых чехлах водорослей и охарактеризовать ультраструктурную организацию бактериальных клеток в стадии резервации. ПЦР для выявления некультивируемых покоящихся форм иерсиний. Результаты исследований показали сохранение патогенного потенциала у покоящихся бактериальных клеток У. Материалы диссертации были представлены на IV международном конгрессе Вода экология и технология Москва, , VIII съезде ВОЗМП Москва, . По результатам исследований опубликованы 8 работ. Материалы диссертации используются при чтении лекций студентам биологического факультета МГУ кафедра микологии и альгологии.