Усовершенствование иммунохимических методов лабораторной диагностики классической чумы свиней

• Автор: Шарифуллин, Альберт Ильдарович
• Шифр специальности: 03.00.07, 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 139 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Современное представление о возбудителе классической

чумы свиней КЧС.

1.2. Распространение КЧС

1.3. Лабораторная диагностика классической чумы свиней

2. УСЛОВИЯ И МЕТОДЫ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Материалы

2.2. Методы исследований

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ ДИССЕРТАЦИИ.

3.1. Подбор оптимальных условий культивирования вируса
3.2. Изучение антигенного состава вируса КЧС штамма Ши
Мынь.
3.2.1. Очистка, выделение и концентрирование антигена вируса
3.2.2. Анализ полипептидного профиля возбудителя КЧС в
однородной и градиентной системах ПААГ
3.2.3. Выявление и оценка специфических антигенных структур
возбудителя КЧС методом иммуноблотинга
3.3. Сравнительная оценка эффективности способов получения
антигена вируса КЧС.
3.3.1. Оптимизация метода выделения, очистки и
концентрирования специфического антигена вируса КЧС.
3.3.2. Определение серологической активности
иммунодоминантного белка вируса КЧС.
3.4. Определение антигенной иммуногенной активности полипептида вируса КЧС на белых крысах, кроликах, овцах
3.4.1. Подбор продуцентов, наиболее подходящих для получения иммунопреципитинов
3.4.2. Оценка специфической активности иммунопреципитинов к
вирусу КЧС для обнаружения антигена возбудителя в ИЭОФ.
3.5. Усовершенствование ИФА для индикации возбудителя
3.5.1. Сравнительная оценка методов выделения и очистки иммуноглобулина в из сыворотки крови
3.5.2. Оптимизация способа выделения РаЬ фрагментов
3.5.3. Изготовление иммунопероксидазных компонентов на основе РаЬ2 фрагментов антител и их сравнительная характеристика
3.6. Применение ИФА и ИЭОФ для индикации возбудителя
3.6.1. Прижизненная индикация возбудителя КЧС.
3.6.2. Индикация возбудителя КЧС в патологическом материале
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Покров, на юбилейной научной конференции, посвященной летию НИИ микробиологии МО РФ г. Киров, на конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии Казань на научнопрактической конференции ВНИИВВиМ г. Покров, на международной научнопроизводственной конференции Воронеж, . Публикация результатов исследования. По материалам проведенных исследований опубликовано работ, 1 работа сдана в редакцию журнала Ветеринария. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 7 страницах машинописного текста состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы и приложений. Указатель литературы содержит отечественных и 0 иностранных источников. Классическая чума свиней КЧС болезнь, характеризующаяся лихорадкой, геморрагическим диатезом, септическим процессом вирусемия, которая протекает сверхостро, остро, подостро, хронически и атипично с поражениями легких и толстого отдела кишечника Юсупов Р. Х., Сосова Р. Ф., Бакулов И. А. и др. Вирусная природа чумы свиней установлена в г. До открытия истинного возбудителя чуму свиней часто путали с паратифом и иастереллезом. ii . Классическая чума свиней, согласно решению МЭБ включена в список особо опасных болезней домашних и диких свиней, характеризуется быстрым распространением, высокой контагиозностыо и смертностью. Классическая чума свиней вызывается одним из семейства vii большой группы РНК содержащих вирусов, имеющих липидную оболочку. Возбудитель КЧС относится к роду ivi Мищенко Н. К., i V. Название тогавирусы от латинского плащ впервые было предложено для оболочечных РНКсодержащих вирусов, имеющих нуклеокапсид с кубической симметрией. Данный термин вошел в обиход для наименования арбовирусов типа А и В. В настоящее время семейство vii включает 4 рода vi арбовирусы антигенной группы А, vi арбовирусы антигенной группы В ivi, который представлен пока единственным вирусом краснухи, и ivi в состав которого вошли вирусы классической европейской чумы свиней КЧС, диареи крупного рогатого скота ВДКРС и пограничной болезни овец ВПБО, объединенные на основании сходства физических характеристик Фомина II. ., Белоусова Р. В. и др. Сергеев О. В., Колонцов . ., i М. . ., . Серологические перекрестные реакции наблюдаются внутри рода, но не другими членами семейства тогавирусов . ., . В противоположность вирусу диареи, который может распространятся от КРС на свиней, вирус КЧС поражает только свиней в естественных условиях, что характеризует его специфичность по отношению к хозяину . ., . По вирулентности различают Л, В, С варианты вируса КЧС Фомина Н. В., Белоусова Р. В. и др. Многие полевые изоляты вируса КЧС имеют низкую вирулентность и приводят к хроническому заболеванию или абортам, рождению мертвых поросят или гибели новорожденных. Хотя среди изолятов вируса КЧС можно обнаружить небольшие антигенные вариации, вирус продолжают считать монотштичным. Свиньи, выжившие после заражения любыми штаммами вируса КЧС, защищены от заражения другими штаммами данного вируса. Минорные вариации различимы, но четких серологических групп не существует i В. Антигенные свойства. Несмотря на широкий спектр вирулентности штаммов вируса КЧС, проведенная сравнительная оценка . ., i . Все штаммы вируса чумы свиней серологически близкородственны, что указывает на их антигенную однородность. Это подтверждается высокой эффективностью штамма АСВ и К в различных зонах земного шара Фомина Н. В., Белоусова Р. В. и др. i В. Вирус КЧС размножается в ограниченном диапазоне клеточных культур, большая часть которых имеет свиное происхождение клетки почек свиньи и семенников поросят, не вызывая цитопатического эффекта Лярски 3. Куринов В. В. и др. . ., . Исследованиями Егерева С. А., Ильясовой Г. Х. и др.