Роль лактобактерий в модуляции факторов иммунитета в норме и при экспериментальной шигеллезной инфекции

• Автор: Зорина, Виктория Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.07, 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 199 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ стр.

ВВЕДЕНИЕ

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. Экология бактерий рода i.

1.1. Классификация и геносистематика бактерий рода

i.

1.2. Локализация ЛАБ в организме человека.

1.3. Роль ЛАБ в регуляции состава микрофлоры

1.3.1. Участие в обеспечении колонизационной резистентности

1.3.2. Антагонистическая активность.

1.3.2.1. Продукция бактериоцинов

1.3.2.2. Синтез антимикробных соединений небелковой природы
Глава 2. Особенности строения и функционирования желудочно
кишечного тракта
2.1. Морфология слизистой оболочки тонкого
кишечника.
2.2. Особенности строения иммунной системы ЖКТ
2.2.1. Нелимфоидная составляющая иммунной системы. .
2.2.2. Лимфоидные структуры слизистой оболочки ЖКТ.
2.2.2.1. Пейеровы бляшки.
.2.2. Мклетки.
2.2.3. Эффекторная зона иммунной системы
2.3. Особешюсти функционирования иммунной системы ЖКТ.
2.3.1. Феномен физиологического воспаления.
2.3.2. Мшрация иммунокомпетентных клегок.
2.3.3. Феномен оральной толерантности
2.3.4. Апоптоз клеток иммунной системы ЖКТ.
Глава 3. Цитокины
3.1. Функциональная характеристика отдельных цитокинов
3.1.1. Интерлейкин
3.1.2. Интерлейкин
3.1.3. Интерлейкин
3.1.4. Интерлейкин.
3.1.5. Интерлейкин.
3.1.6. Интерлейкин.
3.1.7. Фактор некроза опухолей
3.1.8. Интерфероны
3.1.9. Фактор, ингибирующий миграцию макрофагов
Глава 4. Влияние лактобактерий на гомеосгаз макроорганизма.
4.1. Участие в поддержании баланса метаболических
процессов.
4.2. Модуляция иммунных функций макроорганизма.
4.2.1. Участие в органогенезе вторичной лимфоидной ткани
4.2.2. Влияние на факторы естественного иммунитета
4.2.2.1. Модуляция активности фагоцитирующих клеток.
4.2.2.2. Активация функций ЕКклеток.
4.2.3. Модуляция приобретенного иммунитета
4.2.3.1. Влияние на пролиферацию лимфоцитов
4.2.3.2. Влияние на синтез иммуноглобулинов
4.2.4. Эффекты ЛАБ, оказываемые на цитокиновую сеть макроорганизма
Глава 5. Лактобактерии основа пробиотических препаратов
5.1. Критерии для отбора пробиотических штаммов
5.2. Клинические испытания пробиотических штаммов ЛАБ
5.2.1. Использование пробиотических штаммов ЛАБ в
терапии ротавирусных инфекций
5.2.2. Использование пробиотических штаммов ЛАБ в профилактике и терапии диареи путешественников
5.2.3. Использование пробиотических штаммов ЛАБ в профилактике и терапии антибиотикассоциированной диареи
5.2.4. Использование пробиотических штаммов ЛАБ в профилактике нозокоминальных инфекций.
5.2.5. Использование пробиотических штаммов ЛАБ в профилактике и терапии системных инфекций и нсспецифичсских воспалительных заболеваний ЖКТ.
5.2.6. Использование пробиотических штаммов ЛАБ при лечении аллергии
5.2.7. Противоопухолевая активность ЛАБ
5.3. Вакцины на основе лактобактерий.
ЧАСТЬ II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
Глава 6. Материалы и мегоды
6.1. Клеточные линии.
6.2. Животные
6.3. Антигенные препараты
6.4. Вирусы
6.5. Бактерии
6.6. Клеточные суспензии.
6.7. Метод обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции ОТПЦР.
6.8. Реакция бласттрансформации лимфоцитов РБТЛ
6.9. Определение иигерферонов в сыворотке крови и супернатантах клегок лимфоидных органов экспериментальных животных.
6 Определение МИФ в реакции торможения миграции макрофагов РТММ i vi.
6 Метод определения питотоксической активности ЕКклсток
6 Статистическая обработка результатов
Глава 7. Результаты исследований
7.1. Влияние бактерий рода i на экспрессию генов цитокинов клеток пейеровых бляшек мышей СВА.
7.2. Влияние бактерий рода i на пролиферативную
активностьклеток лимфоидных органов мышей СВА.
7.3. Влияние бактерий рода i на активность естественных киллеров.
7.4. Влияние лактобактерий на миграционную активность макрофагов.
7.5. Влияние бактерий рода i на продукцию интерферонов клетками лимфоидных органов экспериментальных животных.
Глава 8. Развитие экспериментальной шигеллезной инфекции на
фоне предварительного введения ЛАБ.
8.1. Сравнительный анализ экспрессии генов цитокинов пейеровых бляшек мышей СВА при экспериментальной шигеллезной инфекции и на фоне предварительного пероралыюго введения лактобактерий
8.2. Сравнительный анализ пролиферативной активности клеток пейеровых бляшек мышей СВА при экспериментальной шигеллезной инфекции и на фоне предварительного нерорального введения . ii
8.3. Влияние заражения экспериментальных животных вирулентным штаммом .i 1 0 на миграцию макрофагов
8.4. Изучение продукции ИФН клетками лимфоидных
органов мышей СВЛ при экспериментальной
шигеллезной инфекции и на фоне предварительного
перорального введения ЛАБ.
ЧАСТЬ III. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Показано, что исследуемые ЛАБ стимулируют рост титров сывороточного ИФН, индуцируют выработку ИФНа и ИФНу клетками ПБ, селезенки и тимуса, а также являются костимуляторами продукции интерфернов. ПБ и селезенки и его количественное увеличение в сыворотке крови мышей СВА. Впервые показана ведущая роль инвазивных свойств i i в стимуляции пролиферативной активности Т и Влимфоцитов, активации экспрессии генов противовоспалительных ИЛ4 и и прововоспалительных ИЛ1р,6,,,ФНОа и ИФНу цитокинов, а также индукции синтеза ИФНа и ИФНу. Впервые установлено, что предварительное пероральное введение ЛАБ экспериментальным животным усиливает функциональную активность Тклеточного звена иммунного ответа при развитии шигеллезкой инфекции. Выявлено, что при экспериментальной шигеллезной инфекции предварительное введение ЛАБ способствует поддержанию развития клеточноопосредованных иммунных реакций, не вызывая активации экспрессии генов противовоспалительных цитокинов ИЛ4 и ИЛ и усиливая синтез ИФНа и ИФНу клетками ПБ, селезенки и тимуса мышей СВА. Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о существовании системы взаимодействий между макроорганизмом и его индигенной микрофлорой, направленной на поддержание динамического равновесия. Полученные данные являются основой оценки иммуномодулирующей эффективности ЛАБ при создании пробиотических, вакцинных препаратов для профилактической биокоррекции и применения их в комплексной схеме лечения кишечных инфекций. Часть 1. Глава 1. Согласно традиционной классификации род i семейства i отдела ii грачположительные эубактерии, имеющие клеточные стенки относится к группе споронеобразующих грамположительных палочек правильной формы, 0,5 1,2 х 1,0 ,0 мкм, располагающихся в коротких цепочках. Большинство видов неподвижны, в редких случаях наблюдаются перитрихиапьныс жгутики. Спор не образуют. При окраске по Граму или метиленовым синим иногда наблюдаются цитоплазматическая зернистость и исчерченность, а также биполярные включения ,. Лактобактерии относятся к факультативным анаэробам, некоторые при выделении строгие анаэробы. Температурные границы роста от 5С до С, но оптимальная температура оптимум 5,5 5,8. Хсмоорганотрофы. Метаболизм бродильного типа, сахарокластический не менее половины конечных углеродных метаболитов составляет лактат. Нитраты не восстанавливают или восстанавливают редко при выше 6,0, желатину не разжижают, казеин не расщепляют, индол и 2 не образуют каталазоотрицатсльные цитохромов не содержат. Видовую принадлежность определяют по биохимическим свойствам и способности расти при разных температурах. ЛЛБ, утилизируют гсксозы до молочной кислоты лактата по гликолитичсскому пути ЭмбденаМейергофаПарнаса, но неспособные сбраживать пентозы или глюконат . ЭмбденаМейергофаПарнаса, а некоторые виды при дефиците глюкозы с образованием молочной, уксусной, муравьиной кислот, этанола. Также способны ферментировать пентозы с образованием молочной и уксусной кислот . Содержание ГЦ пар в ДНК . Содержание ГЦ пар в ДНК . Содержание ГЦпар в ДНК . Содержание ГЦпар в ДНК . Таким образом, проведенные исследования по таксономии бактерий рода i с использованием генетических и молекулярнобиологических методов, числовой таксономии, газожидкостной хроматографии клеточных жирных кислот, элекгрофоретического исследования спектров растворимых белков, сравнительных иммунологических исследований гомологичных протеинов, химического состава клеточных компонентов позволили составить более точную характеристику известных видов лактобацилл и определить критерии для выявления новых видов бактерий данного рода , 8. Микроэкологическая система организма сложный, филогенетически сложившийся, динамичный комплекс, включающий в себя разнообразные по количественному и качественному составу ассоциации микроорганизмов и продукты их биохимической активности. В норме макроорганизм содержиг сотни видов микроорганизмов с общим численным составом более й клеток, которые способны формировать относительно стабильную структуру микробного пейзажа, качественный и количественный состав которого зависит от их локализации.