Изучение структуры транспортного вирусного рибонуклеопротеида X вируса картофеля и способов трансляционной активации РНК в его составе

• Автор: Никитин, Николай Александрович
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 98 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ .

1. С ВОКА ПОТЕКСВИРУСОВ i vi

2. ДИССОЦИАЦИЯ ВИРИОНОВ ХВК .

2.1. Влияние концентрации солей на диссоциацию вирионов.

2.2. Влияние температуры и детергентов на стабильность и диссоциацию вирионов ХВК.

2.3. Линейная дестабилизация и разборка вирионов ХВК при взаимодействии с ТБ 1 ХВК

2.4. Дестабилизация и разборка ХВК при

фосфорилировании БО в составе вириона

3. ТРАНСПОРТНЫЕ ФОРМЫ ВИРУСОВ РАСТЕНИЙ.
3.1 Транспортные формы потсксвирусов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
РЕЗУЛЬТАТЫ.
1. Изучение структуры вРНП, собранного i vi из РНК ХВК,
БО и ТБ1.
1.1 В отсутствие РНК ХВК БО и ТБ1 образуют
нерастворимый комплекс
1.2 Исследование методом частиц вРПП,
образованных при различных молярных соотношениях
РНК БО.
1.3 ТБ 1 связывается с одним из концов вРНП
1.4 Анализ вРНП методом торможения в геле
1.5 Сборка вРН начинается с 5конца РНК ХВК
2. Изучение трансляционной активации РНК в составе вРНП
2.1 Фосфорилирование БО в составе ХВК
2.2 Трансляционная активация РНК ХВК в составе вРНП
2.3 Трансляционная активация РНК ХВК в составе вРНП,собран ного из РНК и БОРкЗ.
2.4 БО мутантного ХВК, содержащего нсфосфорилируемый Иконец утрачивает способность подавлять трансляцию
РНК в составе вРНП.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ . ДИССОЦИАЦИЯ ВИРИОНОВ ХВК . Влияние концентрации солей на диссоциацию вирионов. Влияние температуры и детергентов на стабильность и диссоциацию вирионов ХВК. ТРАНСПОРТНЫЕ ФОРМЫ ВИРУСОВ РАСТЕНИЙ. Транспортные формы потсксвирусов. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. РЕЗУЛЬТАТЫ. БО и ТБ1. РНК БО. Трансляционная активация РНК ХВК в составе вРНП,собран ного из РНК и БОРкЗ. РНК в составе вРНП. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ. ВЫВОДЫ. Транспорт вирусной инфекции в зараженном растении является одной из наиболее интенсивно изучаемых проблем современной фитовирусологии. В момент заражения растения вирусом только небольшое количество клеток оказывается инфицированными. Для развития инфекции необходимо перемещение вируса от зараженных клеток в здоровые. Межклеточный транспорт фитовирусов является активным процессом, происходит через плазмодесмы и для него необходимы кодируемые вирусом транспортные белки ТБ v v, v i, . Объект нашего исследования X вирус картофеля ХВК типичный представитель рода xvi семейства xivii, содержащий геномную одноцепочечную плюс РНК. В литературе были предложены две модели транспортной формы при межклеточной транслокации генома потсксвирусов нативные вирионы . . РНК, белка оболочки БО и транспортного белка ТБ1 . При изучении транспортной формы вируса . РНК с БО и ТБ1 и использовали смесь для микроинъекций. Однако структура таких комплексов изучена не была. Независимо от структуры транспортной формы, вирусная РНК в ее составе должна исключается из процессов репликации и трансляции и вновь становится доступной для рибосом в процессе развития инфекции. Ранее в нашей лаборатории было показано, что в отличие от ряда вирусов, РНК ХВК в составе вириона недоступна для рибосом. БО вируса i i протеинкиназами серинового типа или 2 при взаимодействи ХВК с ТБ1 v . iv . В связи с этим, целью настоящей работы было изучение структуры рибонуклеопротеидов, собранных i vi из РНК, БО и ТБ1 ХВК возможной транспортной формы потексвирусов, а также выяснение возможности трансляционной активации РНК ХВК в составе тройных комплексов РНКБОТБ1.