Взаимодействие белка оболочки и вирионов Х-вируса картофеля с компонентами вирусной и клеточной транспортных систем

• Автор: Серазев, Тимур Вазыхович
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 110 с. : ил

ВВЕДЕНИЕ .

ОБЗОРЛ ИТЕРАТУРЫ.

ВИРУСЫ С ТРОЙНЫМ БЛОКОМ ТРАНСПОРТНЫХ ГЕНОВ.

Транспорт вирусов с тройным блоком генов

Ц Цитоскелет и транспорт макромолекул. Особенности растителы юго

цитоскелет а

Цитоскелет и вирусы растений

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ в

РЕЗУЛЬТАТЫ

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ а .
СПИСОК Л ИТЕРАТУРЫ

вжс
ВКВК
ВМБК
ВМЛис
ВНПЖС
ВШМЯ
ХВК
АТФаза
БСА
ГТФ
дсн
КРС
НТФ
ОРТ
ПППС
РНП
мРНК
ТБГ
ЭДТА
ААР
МАР
Список сокращений
Названия вирусов
вирус желтухи свеклы
вирус комковатости арахиса
вирус кустистости верхушек картофеля
вирус мозаики бамбука
вирус мозаики белого клевера
вирус мозаики костра
вирус мозаики лисохвоста
вирус мозаики подорожника азиатского
вирус никротического пожелтения жилок свеклы
вирус табачной мозаики
вирус штриховатой мозаики ячменя
полулатентный вирус мятлитка
Хвирус картофеля
Другие сокращения
аденозинтрифосфат
аденозинтрифосфотаза
белок оболочки
бычий сывороточный альбумин
гуанидиндифосфат
гуанидинтрифосфат
дезоксирибонуклеиновая кислота
додэцилсульфат натрия
дитиотрейтол
крупный рогатый скот
микротрубочки
нуклеотидтрифосфат
однонитевой
открытая рамка трансляции
полиакриламидный гель
предельная пропускная способность плазмодссм
рибонуклеиновая кислота
рибонуклеопротеид
вирусная РНК
матричная РНК
транспортный белок
тройной блок генов
первый белок тройного блока генов этилендиаминтетрауксусная кислота
эндоплазматический ретикулум
ii i белок ассоциированный с актином i зеленый флуоресцирующий белок
ii i белок ассоциированный с микротрубочками
Введение


Показано, что ЗОК белок ВТМ способен кооперативно связывать онРНК и онДНК неспецифично в отношении последовательности, при этом диаметр образуемого ЗОК рибонукпеопротеида РНП составляет 2 нм, в то время как средний диаметр свободно свернутой молекулы РНК составляет нм iv . Вирусспецифические РНП, образуемые ТБ и вирусной РНК, были впервые обнаружены в растениях, инфицированных ВТМ, по отличной от частиц зрелого вируса плавучей плотности в v . Показано, что вирусная РНК в составе РНП комплекса выводится из процесса репликации и вовлекается в межклеточный транспорт v . При этом в составе комплекса с ЗОК белком ВТМ РНК нетранслируема, а после прохождения через ПД комплекс способен транслироваться v . Показано взаимодействие ЗОК белка ВТМ с различными белками, ассоциированными с клеточной стенкой протеинкиназой клеточных стенок и пектинметилэстеразой v . I vi ЗОК белок обладает выраженной ГТФсвязывающей и более слабой УТФсвязывающей активностями i ii, . В связи с чем предполагают возможность его взаимодействия с ГТФазой, ассоциированной с ПД собственной НТФазной активности у ЗОК белка не обнаружено. Показано, что в клетках трансгенных по гену ЗОК растений и протопластах ТБ ВТМ ассоциирован с микротрубочками МТ и в меньшей степени с актиновыми филаментами i . Эти данные подтверждаются опытами, показывающими способность ЗОК ВТМ взаимодействовать с актином и тубулином i vi . На основании вышеприведенных данных предлагают следующая модель межклеточного транспорта ВТМ по . ПД является важной для дальнейшей судьбы РНПкомплскса являясь первоначально нетранслируемым, после прохождения через ПД он приобретает способность транслироваться в результате разборки либо дестабилизации РНП комплекса, что дает начало новому этапу вирусной инфекции. Возможной причиной дестабилизации РНП комплекса является фосфорилирование ЗОК ТБ протеинкиназой клеточных стенок в процессе прохождения комплекса через ПД v . Данная схема межклеточного транспорта считается применимой ко всем вирусам, использующим механизм модификации ПД. В случаях, когда в вирусном транспорте принимают участие несколько вирусспецифических белков два или три ТБ, БО или другие вирусные белки, напр, репликаза, предполагается, что те же функции, что и ЗОК ТБ ВТМ, осуществляются различными белками, что приводит к некоторым изменениям в этой схеме. Универсальность транспортной системы ВТМ косвенно подтверждается данными о том, что в экспериментах по комплементации ген ЗОК ВТМ способн эффективно заменять транспортные модули вирусов с ТБГ, которые используют в качестве транспортной формы РНП комплексы без участия БО. Оба семейства относятся к супергруппе альфаподобных вирусов. Геном этих вирусов представляет собой одну или несколько оиРНК, содержащих кэпструктуру на 5конце и полиАпоследовательность иили тРНКподобную структуру на Зконце. В нем закодирован консервативный набор белковых доменов, включающий РНКзависимую РНКполимсразу, относящуюся к супергруппе 3 домен ПОЛ, хеликазу, относящуюся к суперсемейству I ДНКРНКхеликаз домен X1, и метилгуанилилтрансферазу домен i , . Матрицей для экспрессии 5прокси мал ьных генов является геномная РНК, а для экспрессии 3проксимальных генов субгеномные РНК. ТБГ состоит из трех частично перекрывающихся открытых рамок трансляции ОРТ. Хотя у разных групп вирусов положение ТБГ в геноме может меняться, три составляющие его ОРТ не меняют своего взаимного расположения и характера кодируемых ими белков, составляя, таким образом, единый независимый транспортный модуль. Для большинства групп вирусов, кодирующих ТБГ, показано, что именно белковые продукты ТБГ, обозначаемые как ТБГр1, ТБГр2 и ТБГрЗ vv . В семействе xvii наиболее многочисленным и хорошо изученным является род xvi, чьим типичным представителем является Хвирус картофеля ХВК. Его геном представляет собой однонитевую РНК, длиной нуклеотидов, несущую на 5конце кэпструктуру, а на Зконце полиА последовательность, и кодирующую пять ОРТ рис. ОРТ1 расположена следом за 5нстранслируемой областью и транслируется с геномной РНК с образованием 5 кДа белка рис. МЕТ, НТФазухеликазу домен ХЕЛ и РНКзависимую РНКполимеразу домен ПОЛ i . Продукт 1 выполняет функцию вирусной репликазы .