Получение и изучение свойств препаратов фактора переноса против некоторых вирусных и бактериальных инфекций животных

• Автор: Кухаркина, Ольга Венедиктовна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Владимир
• Количество страниц: 140 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Медиаторы иммунной системы.

1.2. Характеристика фактора переноса

1.3. Химическая природа фактора переноса

. 1.4. Свойства фактора переноса

1.5. Механизм действия фактора переноса.

1.6. Животные, используемые для получения фактора переноса

1.7. Получение фактора переноса .

1.7.1. Выбор доноров

1.7.2. Подготовка антигена
1.7.3. Сенсибилизация доноров для репродукции фактора
переноса
1.7.4. Выделение лимфоцитарной массы из тканей и жидкостей организма доноров.
1.7.5. Получение диализата экстракта лейкоцитов
1.8. Тестирование активности фактора переноса в диализатах
экстрактах лейкоцитов
1.8.1. Реакция замедления миграции лейкоцитов
1.8.2. Реакция гиперчувствительности замедленного типа
у животных
1.9. Применение препаратов фактора переноса для лечения и
профилактики инфекционных болезней животных и
человека.
1.9.1. Применение фактора переноса для лечения болезней
1.9.2. Экспериментальное изучение фактора переноса
на животных
1.9.3. Осложнения, возникающие у животных и человека при
введении фактора переноса
Заключение по обзору литературы
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материалы и методы
2.1.1. Антигены.
2.1.2. Вакцины
2.1.3. Подопытные животные
2.1.4. Оборудование и реактивы
2.1.5. Растворы и питательные среды.
2.1.6. Анализ данных, собранных во время проведения
2.1.7. Подготовка антигена для сенсибилизации
организма животного.
2.1.8. Отбор доноров для сенсибилизации.
2.1.9. Получение лимфоцитарной массы из лимфоидных
органов, молозива и периферической крови доноров
2.1 Получение препарата фактора переноса
2.1 Определение стерильности препарата
2.1 Проверка безвредности.
2.2. Тестирование иммунологической активности диализата экстракта лейкоцитов.
2.2.1. Реакция ингибиции миграции лейкоцитов под слоем агарозы.
2.2.2. Реакция гиперчувствительности замедленного типа
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Анализ жидкостей и тканей организма, содержащих иммунокомпетентные клетки
3.2. Отработка методики получения диализата экстракта лейкоцитов из периферической крови, лимфоидных органов и молозива.
3.2.1. Выбор оптимальных условий выделения лимфоцитов при цетрифугировании в градиенте плотности
3.3. Получение ДЭП из периферической крови и лимфоидных органов лабораторных животных, сенсибилизированных различными антигенами и тестирование их иммуногенной активности.
3.3.1. Получение и тестирование препаратов ФП на основе ДЭЛ против некоторых вирусных инфекций
3.3.1.1. Особенности иммунитета при желудочнокишечных и респираторных заболеваниях молодняка крупного рогатого скота.
3.3.1.2. Получение и тестирование препарата ФП из периферической крови кроликовдоноров, сенсибилизированных аттенуированной вакциной против парагриппа3 КРС
3.3.1.3. Тестирование диализата экстракта лимфоцитов, полученных из лимфоидных органов и периферической крови кроликов, сенсибилизированных ротавирусом крупного рогатого скота
3.3.2. Активация иммунокомпетентных клеток при иммунизации против ротавирусной инфекции некоторые аспекты
клеточного и гуморального ответа.
3.3.3. Анализ степени активации клеточного и гуморального иммунитета телят при стимуляции их организма препаратами, содержащими вирус ИРТ
3.3.4. Тестирование клеточного и гуморального иммунитета стельных коров и их новорожденных телят в разные сроки после отела
3.3.5. Тестирование фактора переноса на основе ДЭЛ, полученного молозива коров.
3.4. Тестирование ДЭЛ из периферической крови и лимфоидных органов лабораторных животных, сенсибилизированных бактериальными антигенами и тестирование их иммуногенной активности.
3.4.1. Особенности антибактериального иммунитета.
3.4.2. Получение и тестирование препарата ФП на основе ДЭЛ кроликов, сенсибилизированных аттенуированной вакциной против сальмонеллеза свиней.
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.
5. ВЫВОДЫ.
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ФГУ Федеральный центр охраны здоровья животных
ГЗТ гиперчувствительность замедленного типа
ДНК дезоксирибонуклеиновая кислота
ДЭЛ диализат экстракта лейкоцитов
ИМЯ ингибиция миграции лейкоцитов
ИРТ инфекционный ринотрахеит
ИФА иммуноферментный анализ
КОИ клеточноопосредованный иммунитет
КРС крупный рогатый скот
МИФ фактор, угнетающий миграцию макрофагов
МПК мононуклеары периферической крови
НТД нормативнотехническая документация
ПГ3парагрипп
РДП реакция диффузионной преципитации РТГА реакция торможения гемагглютинации ФП фактор переноса Ф.Р. физиологический раствор
I индекс миграции
МНС главный комплекс гистосовместимости трансфер фактор
рге предшественник фактора переноса секреторный фактор переноса мембранный фактор переноса
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Все представленные данные говорят о необходимости изучения передачи клеточноопосредованного иммунитета с помощью лимфоцитов, полученных от сенсибилизированных организмов. Для испытания фактора переноса применяют тесты по оценке клеточного иммунитета . В изучении клеточного иммунитета большую роль вносит познание возможности передачи состояния сенсибилизированности от одного организма другому с помощью иммунных лимфоцитов 4. Реакция организма на введение иммунных лимфоцитов развивается по типу замедленной гиперчувствительности. Это может быть определено соответствующими кожными тестами. Развитие реакции ГЗТ хорошо коррелируетря с реакцией ингибиции миграции лейкоцитов i vi. Реакция ингибиции миграции лейкоцитов ИМЯ является наиболее точным тестом для оценки клеточноопосредованного иммунного ответа. Заболевания молодняка крупного рогатого скота КРС наносят большой экономический ущерб, несмотря на наличие средств специфической и неспецифической профилактики, поэтому необходим новый подход к решению этой проблемы. Диссертация имеет характер поискового экспериментального исследования, которое является фрагментом научной темы по изучению клеточных медиаторов и новых средств специфической профилактики. Цели и задачи исследования. Основной целью работы было экспериментальное изучение возможности использования препаратов ФП для профилактики некоторых инфекционных болезней молодняка КРС. КОИ животных. Научная новизна работы. Практическая ценность результатов исследования. Публикация научных исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ. Апробация работы. Материалы диссертации доложены и опубликованы в материалах научных конференций Достижения молодых ученых в ветеринарную практику г. Владимир, ВНИИЖЗ, г. Современные проблемы селекции, ветеринарной генетики и защиты животных г. Витебск, Республика Беларусь, г. Самарканд, Республика Узбекистан, г. Вет. Пжв1д. ЕКВМ г. Харьков, Республика Украина г. Актуальные проблемы свиней крупного и мелкого рогатого скота г. Владимир, г. Современные вопросы патологии сельскохозяйственных животных г. Минск, Республика Беларусь, г. Актуальные проблемы инфекционной патологии животных г. Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 0 страницах и содержит следующие разделы введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, выводы, практические предложения, приложения. Список литературы включает 9 источников, в том числе работ на русском языке. Исследования по диссертационной работе выполнены в гг. ФГУ Федеральный центр охраны здоровья животных. Автор выражает искреннюю благодарность сотрудникам лаборатории болезней крупного рогатого скота в ФГУ Федеральный центр охраны здоровья животных за практическую и методическую помощь при выполнении и оформлении диссертации. Хорошо известно, что существует единство механизмов клеточного и гуморального иммунитета. Вместе с тем установлены особые иммунологические реакции организма, не связанные с антителами, а свойственные только иммунокомпетентным клеткам. Регуляция иммунного ответа в этом случае происходит за счет так называемых медиаторов клеточного иммунитета, которые представляют собой растворимые белки, полипептиды и гликопротеиды, которые синтезируются в лимфоцитах лимфокины или моноцитах монокины. Они выделяются при специфической и неспецифической активации и прежде всего обеспечивают репродукцию и созревание иммунокомпетентных клеток, включение их в реакции иммунитета, определяют взаимодействие, кооперацию различных иммунокомпетентных клеток и кроме того обеспечивают функционирование Т клеточной системы иммунитета, обучение, премирование Т клеток, формируют и регулируют различные реакции клеточного иммунитета, ГЗТ, реакции трансплантации и другие. Синтез и секреция различных медиаторов стимулируются при контакте антигена с сенсибилизированными лимфоцитами. Лимфокины можно подразделить в зависимости от биологической активности и клеток мишеней на медиаторы, усиливающие функциональную активность обеспечивающие локализацию подавляющие функциональную активность гуморальные факторы макрофагов монокины факторы Тклеток, регулирующие антителогинез табл.