Иммунологические показатели при экспериментальном моделировании генерализованных инфекций

• Автор: Букин, Евгений Константинович
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Кольцово
• Количество страниц: 127 с. : 13 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Страница

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современное представление о патогенезе инфекционных заболеваний

1.1.1 Понятие о цитокинах

1.1.2 Провоспалитсльные и противовоспалительные цитокины.

1.1.3 ТЫТЬ2 ответ при инфекционных заболеваниях.

1.1.5 Цитокины и противовирусный ответ.

1.1.6 Цитокины зашита на грани патологии

1.2 Энтерогсморрагическая Е.со 7
1.2.1 Общая характеристика бактерий вида ii i.
1.2.2 Клииикоэпидемиологическис аспекты Е.со Н7 инфекции
1.2.3 Патогенез заболевания, вызываемого Е.со Н7.
1.2.4 Экспериментальное моделирование Е.со Н7 инфекции.
1.2.5 Средства лечения и профилактики Е.со Н7 инфекции.
1.3 Флавнвирусные инфекции
1.3.1 Общая характеристика флавивируеов.
1.3.2. Вирус КЭ.
1.3.2.1 Клиникоэпидемиологические аспекты вирусного КЭ.
1.3.2.2 Патогенез вирусного КЭ
1.3.2.3 Средства специфического лечения и профилактики вирусного КЭ.
1.3.3 Вирус лихорадки Денге.
1.3.3.1 Эпидемиология вирусной лихорадки Денге.
1.3.3.2 Клиническая картина ВДинфекции.
1.3.3.3 Патогенез ВДинфекции.
1.3.3.4 Экспериментальные модели ВДинфекции
1.3.3.5 Лечение и профилактика ВДинфскцни
I ЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Животные
2.2 Бактериальные препараты.
2.2.1 ii i
2.2.2 Препарат ЕНЕС I .
2.3 Вирусные препараты.
2.3.1 Вирус лихорадки Денге.
2.3.2 Вирус клещевого энцефалита
2.3.3 Вакцины клетевого энцефалита
2.4 Препарат X
2.5 Методы
2.5.1 Получение образцов сыворотки крови
2.5.2 Получение образцов кишечных смывов
2.5.3 Определение наличия .i Н7 в образцах фекалий.
2.5.4 Определение наличия .i Н7 в образцах крови
2.5.5 Определение инфекционной активности вирусных препаратов методом титрования
на мышах.
2.5.6 Определение концентрации цитокинов сыворотки крови
2.5.7 Определение суммарного содержания I в кишечных смывах.
2.5.8 Определение специфических I и I к .i Н7
2.5.9 Приготовление антигенов ВД и вируса КЭ
2.5. Определение специфических I и I к вирусу КЭ и ВД.
2.5. Приготовление суспензии клеток селезнки мыши
2.5. Определение концентрации жизнеспособных клеток.
2.5. I i i анализ
2.5. Исследование пролиферативной активности сплеиоцнтов
2.5. Выделение суммарной РНК
2.5. Проведение реакции обратной транскрипции.
2.5. Диагностическая ОТПЦР для обнаружения РНК вируса КЭ
2.5. Диагностическая ОТПЦР для обнаружения РНК ВД.
2.5. Определение гематологических показателей
2.5. Измерение концентрации фибриногена
2.5. Статистический анализ.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОПЕННЫХ И ПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ
ПРЕПАРАТА ЕНЕС I .
3.1 Влияние пероральных и парентеральных схем иммунизации препаратом ЕНЕС С1Р на течение и исход .i 7 инфекции у мышей
3.1.1 Динамика системной продукции цитокинов у мышей , иммунизированных препаратом ЕНЕС I , после заражения.
3.1.2 Динамика показателей гуморального иммунитета у мышей , иммунизированных препаратом ЕНЕС I .
3.1.3 Динамика показателей специфического клеточного ответа у мышей , иммунизированных препаратом ЕНЕС I .
3.2 Исследование иммуногенных свойств препарата ЕНЕС I при
ректальном способе введения.
3.2.1 Влияние ректальных схем иммунизации препаратом ЕНЕС I на
течение и исход соН7 инфекции у мышей
3.2.2 Динамика системной продукции цитокинов у мышей , иммунизированных ректалыго препаратом ЕНЕС I , после заражения.
3.2.3 Динамика специфического гуморального иммунитета у мышей при
ректальной иммунизации препаратом ЕНЕС I
3.2.4 Динамика клеточного иммунитета у мышей при ректальной иммунизации препаратом ЕНЕС I
ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ МОДЕЛИРОВАНИИ ВИРУСНОГО КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА.
ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ ПАТОГЕНЕЗА И НОВЫХ НАПРАВЛЕНИЙ ТЕРАПИИ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВИРУСНОЙ ЛИХОРАДКИ ДЕНГЕ
5.1 Патогенетические аспекты экспериментальной ВДинфскции
5.1.1 Клинические особенности течения экспериментальной ВД2 инфекции у мышей
5.1.2 Изменение гематологических показателей и системной продукции цитокинов при экспериментальной ВДинфекции.
5.2 Изучение возможности коррекции экспериментальной ВДинфекции.
5.2.1 Оценка влияния препарата X в различных дозах на исход экспериментальной ВДинфскции.
5.2.2 Изучение влияния препарата X на клиниколабораторные показатели у мышей при экспериментальной ВДинфскции
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Огромные усилия исследователей из разных стран, направленные на разработку эффективных вакцинных и лекарственных препаратов, в настоящий момент не принесли видимого успеха. Неудачи, в частности, связаны с недостатком знаний о иммунопатогенезе ВДинфекции. Большинство последних представлений о сути патологических изменений построены на обобщении клинических случаев ВДинфекции в гетерогенной человеческой популяции. Несмотря на наличие множества неясностей, не вызывает сомнения тот факт, что сама иммунная система при лихорадке играет двоякую роль защитную и губительную. Клиникоэпидемиологические данные указывают на участие в патогенезе лихорадки Денге кроссреактивных к гетсрологнчному серотипу ВД антител, которые способствуют репликации вируса в клетках моиоцитариомакрофагальной линии , , . Важное значение отводится и кроссрсактивиым Тлимфоцитам памяти, которые не способны элиминировать инфицированные клетки, но продуцируют в большом количестве цитокнны . Массивная активация субиопуляций лимфоцитов, сопровождающаяся цитокиновым штормом, вызывает увеличение проницаемости сосудистого эндотелия и последующее развитие . Следовательно, ключевая роль в патогенезе ВДинфекции отводится не самому возбудителю, а иммунопатологическим механизмам, опосредованным цитокинами vi . Дальнейшие изучение иммунопатогенеза лихорадки, в частности с использованием адекватных экспериментальных моделей, поможет уточнить причины . Отсутствие безопасной и эффективной вакцины против ВД диктует необходимость разработки патогенетических средств терапии заболевания. Хотя во многом молекулярные механизмы усиления проницаемости сосудистого русла при вирусных геморрагических лихорадках неясны, экспериментальные данные свидетельствуют о изменение структуры белков, участвующих в образовании межклеточных контактов сосудистою эндотелия, в частности кадгеринового комплекса i . Кроме того, кадгериновый комплекс при взаимодействии с рцепыо молекулы фибрина инициирует диапедез лейкоцитов, тем самым усиливая тканевое воспаление . В5 . Синтетический олигопептид В2 препарат X был успешно использован для коррекции реперфузиониого поражения миокарда при моделировании на животных острого нарушения коронарного кровообращения . Недавно были выявлены терапевтический эффект препарата при экспериментальном эндотоксиновом шоке и его способность ингибировать системную продукцию провоспалительных цнтокинов i . Эти сведения послужили основой для изучения влияния препарата X на течение экспериментальной ВДинфекции. Не менее значимым представителем семейства vivii является вирус клещевого энцефалита КЭ, который так же, как и ВД, способен вызывать у человека генерализованную инфекцию с вовлечением в патологический процесс нескольких органов и систем Иерусалимский, . В отличие от лихорадки Денге, для вирусного КЭ не характерно развитие геморрагического синдрома и циркуляторной недостаточности, но генерализация инфекции сопровождается системной гиперпродукцией ряда цитокинов, что подтверждено экспериментально Игнатьев и др. Тимофеев и др. Ь. Вирус КЭ остатся одной из главных причин нейроинфекций человека в Евразии. Вспышки заболевания, передающегося человеку иксодовыми клещами, регистрируются на обширных территориях от Европы до Дальнего Востока России и Японии . С x . Увеличение заболеваемости отмечается и на территории России. Согласно официальной статистики, приведнной на сайте Роспотребнадзора Роспотребнадзор, , на августа г. Российской Федерации зарегистрировано 2 7 больных с первоначальным диагнозом вирусный КЭ, из них диагноз подтвержден лабораторно у 1 2 человек на этот же период г. Особо угрожающий характер эпидемиологическая ситуация по клещевому энцефалиту приобрела в Новосибирской области. По данным Территориального управления Роспотребнадзора на августа г. Помимо роста заболеваемости, отмечается изменение клинической картины вирусного КЭ. В году в Новосибирске зарегистрировано восемь летальных случаев атипичного течения инфекции, сопровождавшихся развитием геморрагического синдрома vi .