Роль эндотелия в механизмах ответа на прерывистую нормобарическую гипоксию

• Автор: Макаренко, Владислав Вячеславович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 124 с. : 13 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Обзор литературы

Современные представления о механизмах влияния прерывистой нормобарической гипоксии на сердечнососудистую систему.

1.1. Основные закономерности реакции организма на гипоксическую гипоксию

1.2. Физиологические изменения в оганизме здорового человека при воздействии прерывистой нормобарической гипоксии

1.3. Реакции эндотелия на воздействие гипоксии .

1.4 Клеточные механизмы ответа на гипоксию

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования

2.1. Объекты исследования

2.2. Воздействие
2.2.1. Прерывистая нормобарическая гипоксия здоровых добровольцев .
2.2.2. Прерывистая нормобарическая гипоксия в культуре
эндотелиоцитов микрососудов легких человека
2.3. Функциональные методы обследования добровольцев
2.3.1. Исследование артериального давления и частоты сердечных сокращений
2.3.2. Биомикроскопия конънюктивальных сосудов
2.4. Схема лабораторного обследования здоровых добровольцев.
2.5. Лабораторные методы обследования здоровых добровольцев
2.5.1. Измерение показателей оксидантного статуса организма
2.5.2. Определение активности антиоксидантыых ферментов
2.5.3. Измерение концентрации большого эндогелина и васкулярного эндотелиального фактора роста в сыворотке крови
2.5.4. Определение уровня эндотелиальных микрочастиц в плазме
2.6. Методы исследования в культуре эндотелиальных клеток микрососудов легких человека
2.6.1. Определение тиобарбитуратреактивных продуктов в лизате эндотелиальных клеток микрососудов легких человека
2.6.2. Определение образования активных форм кислорода.
2.6.3. Измерение концентрации васкулярного эндотелиального фактора роста в клеточной среде.
2.6.4. Оценка проницаемости монослоя культуры эндотелиальных
клеток микрососудов легких человека.
2.6.5. Определение концентрации индуцируемых гипоксией факторов ШР1а, Н1Р2а в лизате культуры эндотелиоцитов микрососудов легких человека.
2.7. Статистическая обработка результатов
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 3. Исследование влияния курса прерывистой
нормобарической гипоксии на биохимические маркеры
повреждения и активации процессов регенерации эндотелия у здоровых людей.
ГЛАВА 4. Исследование влияния курса прерывистой нормобарической гипоксии на показатели метаболизма активных форм кислорода у здоровых людей.
ГЛАВА 5. Исследование влиянии прерывистой нормобарической
гипоксии на культуру эндотел ионитов.
5.1. Исследование изменений межклеточных контактов в культуре эндотелиоцитов при воздействии прерывистой нормобарической гипоксии.
5.2. Исследование влияния прерывистой нормобарической гипоксии на продукцию активных форм кислорода и перекисное окисление липидов в культуре эндотелиоцитов
5.3. Влияние активных форм кислорода на показатели состояния межклеточных контактов эндотелиоцитов при прерывистой нормобарической гипоксии.
5.4. Исследование влияния прерывистой нормобарической гипоксии на продукцию васкулярного эндотелиального фактора роста сосудов в культуре эндотелиоцитов
5.5. Влияние прерывистой нормобарической гипоксии на содержание индуцируемых гипоксией факторов НПМа и ШР2а в эндотелиоцитах микрососудов легких человека
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В первичной культуре эндотелиальных клеток человека оценить воздействие прерывистой нормобарической гипоксии на показатели состояния межклеточных контактов, участие в их изменениях активных форм кислорода. Исследовать изменение продукции активных форм кислорода, накопления тиобарбитуратреактивных продуктов в первичной культуре эндотелиоцитов при воздействии прерывистой нормобарической гипоксии. Изучить динамику концентрации васкулярного эндотелиального фактора роста в клеточной среде первичной культуры эндотелиоцитов при воздействии прерывистой нормобарической гипоксии. Оценить влияние прерывистой нормобарической гипоксии на содержание индуцируемых гипоксией факторов НИМ а и Н1Р2а, в клетках первичной культуры эндотелиоцитов человека. Научная новизна. Впервые показано, что механизм воздействия ПНГ ежедневных одночасовых сеансов чередования вдыхания воздуха с вдыханием гипоксической газовой смеси, содержащей об. На культуре эндотелиоцитов человека впервые показано, что ПНГ оказывает прямое влияние на эндотелиоциты приводит к опосредованному активными формами кислорода кратковременному ослаблению межклеточных контактов эндотелиоцитов с их укреплением к третьему сеансу гипоксии, возрастанию продукции васкулярного эндотелиального фактора роста, накоплению в эндотелиоцитах индуцируемых гипоксией факторов транскрипции НИМ а и Н1Р2а. Теоретическая и практическая значимость. Результаты работы свидетельствуют об участии эндотелия в механизмах адаптации к прерывистой пормобарической гипоксии, о возможности формирования не опосредованного системными регуляторными факторами ответа эндотелиоцитов на это воздействие. Установленные закономерности указывают на перспективность исследования применения ПНГ для первичной профилактики артериальной гипертензии и атеросклероза заболеваний сердечнососудистой системы, центральным звеном патогенеза которых является дисфункция эндотелия. Положения, выносимые на защиту. В первичной культуре эндотелиоцитов микрососудов легких человека прерывистая нормобарическая гипоксия 3 одночасовых сеанса чередования воздуха с гипоксической газовой смесью, содержащей 1 об. Механизм реализации эффектов прерывистой нормобарической гипоксии на эндотелиоциты включает активацию системы индуцируемых гипоксией факторов транскрипции НПМа и Н1Р2а. Апробация работы. ГОУВПО Алтайский государственный медицинский университет Росздрава Барнаул, . Публикации По материалам диссертации опубликовано работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материала и методов исследования, четырех глав с результатами собственного исследования, их обсуждения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 7 страницах, иллюстрирована рисунками и 9 таблицами. ГЛАВА 1. Повышенный интерес к изучению влияния на организм гипоксии наблюдается в течение многих десятилетий. Нарушение в кислородном обеспечении органов и тканей считается основным патогенетическим звеном развития многих заболеваний Парный Л. М., Меерсон Ф. Такое понимание сформировало широко распространенное представление о гипоксии, как патологическом состоянии, наступающем в организме при неадекватном снабжении тканей и органов кислородом или при нарушении его утилизации в процессе биологического окисления Парный А. М., . Однако, на протяжении жизни человека кислородное обеспечение организма часто меняется, например, в момент рождения, крика, кашля, при физических и психоэмоциональных нагрузках, восхождении в горы и т. Агаджанян , Меерсон Ф. З., Войткевич В. И. Стрелков Р. Б., Чижов А. Я., Колчинская А. З., Леутин В. П. и др. Более того, с середины прошлого столетия стало известно, что лрекондиционирование гипоксией является эффективным фактором адаптации системы кровообращения и других систем организма к неблагоприятным воздействиям внешней среды и патологическим сдвигам гомеостаза Меерсон Ф. З., Агаджанян и др. А.З. Стрелков Р. Б., Чижов А. Я., . Многообразие проявлений, а также причин гипоксии потребовало создания ее классификации.