Физико-химическая характеристика мембран эритроцитов крыс при гипотермии и на фоне введения даларгина

• Автор: Саидов, Магомедрасул Будаевич
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Махачкала
• Количество страниц: 109 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Влияние гипотермии на физикохимические параметры мембран

1.2. Защитные эффекты даларгина при различных экстремальных состояниях

ГЛАВА II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. Обоснование выбора объекта исследования

2.2. Искусственное охлаждение животных

2.3. Методика инъекций животным.

2.4. Препаративные методы исследования

2.4.1. Получение плазмы крови и эритроцитов.

2.5. Биохимические и биофизические методы исследования
2.5.1 Определение свободного гемоглобина в плазме крови.
2.5.2. Определение кислотной резистентности эритроцитов.
2.5.3.Определение перекисной резистентности эритроцитов.
2.5.4. Определение МДА в эритроцитах
2.5.5. Определение поверхностною заряда мембран эритроцитов.
2.5.6. Определение гематокрнгной величины.
2.5.7.Определение структурных параметров мембран эритроцитов
2.5.7.1. Микровязкость липидлипидных контактов мембран эритроцитов.
2.5.7.2. Микровязкость зон белоклипидных контактов мембран эритроцитов.
2.5.7.3. Определение погруженности белка в липидный бислой
2.5.8. Определение активности 3, КАТФазы в эритроцитах
2.5.9. Определение неорганического фосфора
2.5 Анализ содержания ионов натрия и калия в плазме и эритроцитах
2.5 Статистическая обработка результатов
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Кинетика кислотного гемолиза и содержание свободного гемоглобина в плазме крови крыс при гипотермии и на фоне введения даларгина.
3.2. Содержание МДА и перекисная резистентность эритроцитов крыс при гипотермии на фоне введения даларгина
3.3. Поверхностный заряд мембран эритроцитов крыс при гипотермии и введении даларгина.
3.4.Структурные параметры мембран эритроцитов крыс при гипотермии и на фоне введения даларгина.
3.5. Активность , КАТФазы мембран эритроцитов и содержание ионов V и К в плазме и эритроцитах при гипотермии на фоне введения даларгина
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Это даст возможность судить об особенностях развития патологических и адаптационноприспособительных реакций при гипотермии. В последние годы получены убедительные данные, свидетельствующие о способности опиоидных пептидов, в частности, даларгина, препятствовать развитию стресса и стрессорной активации метаболических процессов Дворцин, Шаталов, Маслова и др. Лишманов, Маслов, . Наряду с антистрессорным эффектом даларгин обладает и антиоксидантным действием Шлюзников и др. Короткина и др. Львова и др. В условиях гипотермии даларгин оказывает и мембраностабилизирующий эффект Кличханов и др. В связи с вышеизложенным представляется важным использование даларгина для коррекции изменений в мембранах эритроцитов в условиях низкой температуры тела. Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось выяснение механизмов изменения структурнофункционального состояния мембран эритроцитов при гипотермии и С, а также выяснение возможности химической коррекции обнаруженных изменений путм введения опиоидного гексапептида даларгина. Исследовать кинетику кислотного гемолиза эритроцитов и содержание свободного гемоглобина в плазме крови крыс. АНС и перекисной резистентности эритроцитов. Исследовать состояние транспортных процессов в мембранах эритроцитов по анализу активности Ка, КАТФазы и содержания ионов Ыа и К в эритроцитах и плазме крови. Изучить структурные свойства мембран эритроцитов путем определения относительной микровязкости липидного бислоя, зон белоклипидных контактов и степени погруженности белков в липидный бислой. Основные положения, выносимые на защиту. Начальные этапы гипотермии стимулируют свободнорадикальные процессы, которые ведут к изменению структурнофункционального состояния мембран эритроцитов. Опиоидный гексапептид даларгин при предварительном внутрибрюшинном введении препятствует активации процессов ПОЛ при умеренной гипотермии в эритроцитах и стабилизирует структурнофункциональные параметры мембран эритроцитов. Эффект даларгина зависит от глубины гипотермии. Научная новизна. В настоящей работе впервые проведены систематические исследования структурнофункциональных характеристик мембран эритроцитов крыс при гипотермии разной глубины. Установлено, что при умеренной гипотермии, в отличие от глубокой, в мембранах эритроцитов крыс интенсифицируются процессы ПОЛ, что ведт к дестабилизации мембран эритроцитов, ускорению внутрисосудистого гемолиза и снижению кислотной резистентности. Обнаружено, что гипотермия разной глубины и С способствует активации 8, КАТФазы мембран эритроцитов. В то же время изменяется ионный состав эритроцитов и ионная асимметрия между эритроцитами и плазмой крови, что указывает на нарушение барьерных свойств эритроцитов при низкой температуре тела. Впервые установлено зависимое от температуры тела, изменение структурных параметров мембран эритроцитов. Выявлена возможность коррекции процессов ПОЛ и структурнофункциональных характеристик мембран эритроцитов при гипотермии путм внутрибрюшинного введения даларгина. Теоретическая и практическая значимость. Полученные данные представляют интерес для понимания механизмов патогенеза холодового повреждения, а также формирования адаптационных механизмов к действию низкой температуры на теплокровный организм. Практическая значимость данной работы определяется возможностью использования структурнофункциональных показателей для оценки тяжести холодового воздействия при гипотермии. Результаты работы указывают на возможность применения даларгина в системе лечебных и профилактических мероприятий при гипотермии. Материалы, полученные при выполнении данной диссертации, используются в учебном процессе кафедры биохимии Дагестанского госуниверситета и Махачкалинского филиала Ростовского госуниверситета, при чтении ряда спецкурсов и больших практикумов. Методические аспекты работы включены в учебное пособие Практикум по биохимии РостовДон, , рекомендованное для студентов университетов биологических специальностей. Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на ежегодных итоговых научнопрактических конференциях профессорскопреподавательско