Механизмы нарушения обмена хрящевой ткани под влиянием свободных кислородных радикалов в условиях in vitro

• Автор: Ярощук, Галина Васильевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 130 с. : ил.

Изучить влияние свободных кислородных радикалов на пролиферацию хондроцитов крысы, кролика и человека в монослой
ной культуре этих клеток. Исследовать эффект свободных кислородных радикалов на синтез коллагена и протеогликанов хондроцитами в культуре. Определить степень разрушения монослоя хондроцитов и фибробластов человека протеиназами в присутствии свободных кислородных радикалов и различных хондропротективных препаратов. Изучить влияние смеси сульфатированных гликозаминокликанов сГАГ на пролиферацию хондроцитов, на продукцию ими коллагена и протеогликанов. Провести сравнительный анализ хондропротекторного действия артепарона и финоптина на экспериментальной модели остеоартроза у кроликов. Проведены исследования на монослойной культуре хондроцитов кролика, крысы и человека по оценке биосинтеза этими клетками коллагеновых белков и протеогликанов. Предложена модель свободнорадикальных процессов в монослойной культуре хондроцитов с использованием микрометодов. Изучено воздействие различных доз биологически активных препаратов на монослойную культуру хондроцитов, как совместно с СКР, так и после их повреждающего воздействия. Показано, что при одновременном воздействии СКР и протеолитических ферментов резко усиливаются процессы деструкции соединительной ткани. Данный феномен имеет важное значение при любом типе воспаления. Действие СКР на биосинтетическую активность хондроцитов имеет бифункциональный характер. При низких физиологических концентрациях свободные кислородные радикалы стимулируют функциональную активность данных клеток, а при высоких подавляют. Деградация протеогликанов свободными кислородными радикалами происходит за счет разрушения коровых белков данной молекулы. При этом боковые цепи гликозаминогликанов остаются практически неизменными. При одновременном воздействии свободных кислородных радикалов и протеолитических ферментов резко усиливаются процессы деструкции матрикса соединительной ткани. Благодаря проведенным исследованиям было впервые продемонстрировано бифазное разнонаправленное действие СКР на синтез протеогликанов клетками хряща стимуляция при низких концентрациях и подавление при высоких. Показан повреждающий эффект СКР не только на матрикс клеточного монослоя, но и на хондроциты. Этот факт является серьезным указанием на патогенетическую роль СКР при развитии ОА, заключающуюся в повреждении хондроцитов и деструкции матрикса хряща. Следовательно, изучение действия СКР на обмен клеток хряща и межклеточный матрикс хрящевой ткани, особенно в сочетании с протеолитическими ферментами, важно и актуально. Одновременное исследование хондропротективного действия некоторых биологических препаратов, в том числе и в качестве антиоксидантных
средств, имеет существенное значение для практической медицины. Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ. Апробация работы. Материалы диссертации доложены на IV Всесоюзном съезде ревматологов Минск, , V ревматологическом симпозиуме Прага, , XIII Европейском ревматологическом конгрессе Амстердам, , II Всероссийском съезде ревматологов Тула, . Диссертационная работа изложена на 0 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, главы собственных исследований, обсуждения полученных материалов всего 4 главы, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего отечественный и 9 иностранных источников. Диссертация иллюстрирована 7 таблицами, рисунками и 2 графиками. Основная экспериментальная часть работы выполнена автором самостоятельно в лаборатории патофизиологии соединительной ткани при ревматических заболеваниях зав. А.Ф. Панасюк и в лаборатории биологических моделей зав. Г.Н. Плесковская Института ревматологии РАМН директоракадемик РАМН профессор В. А.Насонова. Участие соавторов заключалось в следующем работы с клеточными культурами проводились под руководством и при участии Панасюка А. Ф., монослойная культура хондроцитов была получена при участии
. I, i, , эксперименты по изучению эффекта воздействия кислородных радикалов на гиалуроновую кислоту и на цепи гликозаминогликанов проводились при участии . I, i, .