Свободнорадикальные процессы и состояние биомембран при действии пиретроидных пестицидов в тканях белых крыс и в модельных системах

• Автор: Москвичев, Дмитрий Валентинович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 141 с. : ил.

Введение.

1. Обзор литературы

1.1. Свободнорадикальные процессы в биологических системах

1.1.1. Свободные радикалы кислорода и липидов

1.1.2. Основные этапы ПОЛ

1.1.3. Регуляторы ПОЛ антиоксиданты

1.2. Структура, свойства и механизмы действия пестицидов

1.2.1. Краткая характеристика пестицидов.

1.2.2. Эффекты пестицидов в живых организмах.

1.2.3. Механизмы токсического действия пестицидов

1.2.4. Действие пестицидов и ПОЛ.

1.2.5. Детоксикация ксенобиотиков
2. Экспериментальная часть,.
2.1. Постановка эксперимента и материалы исследования.
2.2. Методы исследования
2.2.1. Определение активности цитохрома Р0
2.2.1.1. Определение лгидроксилазной активности цитохрома Р0
2.2.1.2. Определение Мдеметилазной активности
2.2.2. Определение радикальных продуктов ПОЛ
методом Бе инициированной ХЛ.
2.2.3. Получение хлороформного экстракта липидов.
2.2.4. Определение диеновых конъюгатов.
2.2.5. Определение малонового диальдегида.
2.2.6. Определение активности СОД и СУА
2.2.7. Определение активности каталазы.
2.2.8. Определение оксидазной активности церулоплазмина
2.2.9. Определение суммарной пероксидазной активности
2.2 Определение содержания мочевой кислоты
2.2 Определение содержания мочевины.
2.2 Определение содержания гемоглобина
2.2 Определение общего белка.
2.2 Определение общих липидов
2.2 Определение физикохимических и структурных свойств мембран эритроцитов.
2 Работа с пиреном
2 Работа с АНС.
2.3. Математическая обработка результатов.
2.3.1. Статистическая обработка
2.3.2. Корреляционный анализ
3. Результаты исследования.
3.1. Воздействие дециса и фастака на уровень СРП в модельной системе I фосфолипидах желтка куриного яйца.
3.2. Влияние дециса на уровень СРП и системы их регуляции
в тканях белых крыс .
3.2.1. Система детоксикации активность цитохрома Р0.
3.2.2. Свободнорадикальное окисление липидов кинетика ХЛ
3.2.3. Молекулярные продукты ПОЛ.
3.2.3. Антиоксиданты регуляторы интенсивности ПОЛ.
3.2.4. Физикохимическое состояние мембран эритроцитов при действии дециса
3.3. Продукты ПОЛ и состояние мембран эритроцитов при действии дециса в модели II цельной крови крыс.
4. Анализ корреляционных зависимостей исследованных показателей.
5. Обсуждение результатов
6. Выводы.
7. Литература
ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
АКМ.активированные кислородные метаболиты
АНС.1 анилинонафталин8сульфат
АОантиоксидантный, антиоксидант
АФК.активные формы кислорода
ВЭГ.внеэритроцитарный гемоглобин
вБН ОББСглутатион восстановленный окисленный
ДКдиеновые конъюгаты
Кат.каталаза
Ктконстанта Михаэлиса
ЛДлетальная доза, вызывающая гибель организмов
М.мочевина
МДА.малоновый диальдегид
МКмочевая кислота
Мммолекулярная масса
ММО.микросомальное монооксигеназное окисление
ОБ общий белок
ОЛобщие липиды
ПНЖКпол и ненасыщенные жирные кислоты
ПОЛ.перекисное окисление липидов
СОД.супероксидцисмутаза
СПА.суммарная пероксидазная активность
СРО.свободнорадикальное окисление
СРП.свободнорадикальные процессы
ФОП.фосфорорганические пестициды
ХЛхемилюминесценция
ХОП.хлорорганические пестициды
ЦПцерулоплазмин
ЭТЦ.электронтранспортная цепь
ВВЕДЕНИЕ


АФК, радикалы липидов, радикалы белков, нуклеиновых кислот, хинонов, углеводов, и т. В контексте данной работы интерес представляют первые два класса. Радикалы, в которых свободный электрон связан с атомом кислорода, называют активированными кислородными метаболитами АКМ. К ним относятся АФК и радикалы липидов и хинонов. Коротко рассмотрим основные формы АКМ. Кислород в синглетном состоянии 1А характеризуется тем, что спин одного электрона, находящегося на внешней орбитали одного из атомов обращается, в результате чего разрывается одна из двух связей в молекуле кислорода. Синглетный кислород представляет собой бирадикал с двумя неспаренными электронами, хотя и не несет заряда. Бирадикальная форма обуславливает его высокую реакционную способность и позволяет ему запускать ПОЛ он в раз быстрее, чем взаимодействует с жирными кислотами, при этом по механизму 1,3циклоприсоединения образуются несопряженные гидроперекиси. Извест
но участие в повреждении нуклеиновых кислот преимущественно повреждается гуанин и индукции канцерогенеза Меньшикова, Зенков, . При взаимодействии с аминокислотами в составе белков в первую очередь с окисляются гистидин и триптофан, несколько слабее метионин, тирозин и цистеин Шинкаренко и др. Хотя специализированных систем генерации не выявлено за единственным исключением белок церкоспорин у гриба СегсоБрога, он нарабатывается во многих реакциях ЛФК в виде побочного продукта и в небольших количествах он образуется при спонтанной дисмутации супероксидных радикалов при разложении перекиси водорода каталазой 0. Владимиров и др. Н2 при участии простагландинсинтетазы. Эффективными ингибиторами синглетного кислорода являются фенольные антиоксиданты, каротиноиды особенно ркаротин, гистидин и др. Супероксидный анионрадикал представляет собой продукт одноэлектронного восстановления молекулярного кислорода. Супероксид весьма реакционноспособное соединение, время его жизни порядка 6 сск и радиус диффузии 0. Меньшикова, Зенков, . Он является окислителем средней силы, эффективно окисляет аскорбат, атокоферол, водные растворы Си и Ре2 легко окисляется люминолом, Си2, Ре3 и цитохромом с Владимиров и др. Биоэффекты супероксида прежде всего связаны с его патологической ролью, которые обусловлены несколькими реакциями депротонирование и окисление субстратов что позволяет ему запускать непосредственно процессы ПОЛ, а также образование Н2 и восстановление Бе3 что приводит к образованию ОН. Помимо патологической роли известны и другие его эффекты внутриклеточная регуляция, вазомоторное действие, супероксид из макрофагов необходим для пролиферации лимфоцитов Вольский и др. Система микросомально1Т окисления. При работе цитохрома Р0, главного фермента детоксикации ксенобиотиков, происходит образование за счет окисления НАДФН Иванов и др. По отдельным данным, до поглощенного кислорода переходит в супероксид. Ксантиноксидаза. НАДН Щепеткин, . Фермент локализован на цитоплазматической мембране главным образом эпи и эндотелиальных клеток и создает бактерицидный потенциал молока и слизистой глаз. НАДФНоксидаза фагоцитов. Этот сложный мультиферментный комплекс КФ 1. ФАД, цитохром Ь8 и, возможно, убихинон, осуществляет восстановление молекулярного кислорода за счет электронов НАДФН. Именно через реализуется микробицидный потенциал фагоцитов, поэтому до потребляемого нейтрофилами кислорода идет на образование супероксида Скарус и др. Куликов и др. Электронтранспортная цепь. Супероксид образуется в качестве побочного продукта в цикле при работе двух звеньев ЭТЦ НАДН убихинон оксидоредуктазы и убихинона в форме семихинона, которые сбрасывают электроны на молекулярный кислород Туровецкий и др. Меньшикова и др. Демин и др. Супрол супероксидпродуцирующий липопротеин. В сыворотке крови человека и животных обнаружена фракция липопротеидов, способная при физиологических значениях при участии НАДФН и Ре3 генерировать супероксид Симонян и др. Главной системой защиты от является супероксиддисмутаза, дисмутирующая молекулы супероксида в перекись водорода. Кроме того, тушителями являются убихинон и аскорбиновая кислота.