+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Регуляторные аспекты биосинтеза эктоина у аэробных метилотрофных бактерий

Регуляторные аспекты биосинтеза эктоина у аэробных метилотрофных бактерий
  • Автор:

    Мустахимов, Ильдар Ильдусович

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2009

  • Место защиты:

    Пущино

  • Количество страниц:

    95 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    250 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы
"ГЛАВА 1. Галофильные микроорганизмы 1.3. Спектр совместимых растворимых веществ


ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений


ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. Галофильные микроорганизмы

1.1. Осмоадаптация.

1.2. Гиперосмотическнй шок.

1.3. Спектр совместимых растворимых веществ

ГЛАВА 2. Биосинтез эктоина и гидроксиэктоина.

2.1. Гены и ферменты биосинтез эктоина и гидроксиэктоина.

2.2. Регуляция биосинтеза эктоина


ГЛАВА 3. еемейство транскрипционных регуляторов.
3.1. Транскрипционные регуляторы семейства
3.1.1. Регуляторы ответа на стресс и факторов вирулентности
3.1.2. Регуляторы генов катаболизма ароматических соединений.
3.2. Структурная организация белков семейства .
3.3. Механизм транскрипционного контроля экспрессии генов
белками семейства.
ГЛАВА 4. Осмоадаптация аэробных метилотрофных бактерий.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 5. Материалы и методы исследования.
5.1. Культивирование бактерий
5.2. Выделение геномной ДИК
5.3. Расщепление ДНК эндонуклеазами рестрикции.
5.4. Очистка фрагментов ДНК
5.5. Лигирование фрагментов ДНК
5.6. Получение компетентных клеток и их трансформация
5.7. Выделение плазмид из рекомбинантных клонов
5.8. Полимеразная цепная реакция ПЦР и создание праймеров
5.9. Определение и анализ последовательностей нуклеотидов
5 Клонирование и экспрессия генов и
5 Очистка и определение молекулярной массы рекомбинантных белков
5 Определение активности и характеристика ДДБацетилтрансфераз.
5 Деления гена у метанотрофа ii ii
5 Выделение РНК.
5 Метод удлинения праймера
5 Анализ образования комплексов ЕсК ДИК методом задержки в геле
5 Защита ДИК белком от воздействия ДНКазы 1.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
ГЛАВА 6. Очистка и первичная характеристика рекомбинантных
ДАБацетилтрансфераз метилотрофных бактерий.
ГЛАВА 7. Идентификация и определение функциональной активности генов есК
метилотрофных бактерий
7.1. Идентификация генов есЯ у мешлотрофных бактерий.
7.2. Определение функциональной активности белка ЕсК еИуопгсгоЬит ЫсаИрЫЫт 2
ГЛАВА 8. Определение стартовых точек транскрипции соперона и гена еаК
у МекуотсгоЬит асарЬит 2Л6 и 4 Иааухса.
8.1. Определение стартовой точки транскрипции есАонерона
8.2. Определение стартовой точки транскрипции генов есЯ
ГЛАВА 9. Очистка и характеристика транскрипционных реуляторов ЕщК
метилотрофных бактерий
9.1. Сравнительный анализ белков Ес галофильшлх бактерий.
9.2. Очистка и первичная характеристика транскрипционных регуляторов ЕсЯ
из ШИуотсгоЬит асарЬит и 1 Ьаахса
Заключение
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Поскольку накопление осмолитов бактериями процесс, зависимый от внешней солености, логично полагать, что существует специфическая регуляция биосинтеза эктоина на биохимическом и генетическом уровнях. Однако, несмотря на интенсивные исследования физиологии и биохимии продуцентов эктоина, ферменты, катализирующие реакции биосинтеза эктоина, частично охарактеризованы только у гетеротрофной бактерии . ЕйА для выявления эффекторов, влияющих на их активность, а также регуляцию транскрипции оперона сс ЛВСахк у галоанкалофильных метилотрофных бактерий. Цель н задачи исследовании. Цель данной работы изучение регуляции биосинтеза эктоина аэробными галоалкалофильными метано и метилотрофными бактериями на уровне активности ферментов биосинтеза эктоина и транскрипции сс11ВСмк оперона. Выделить и охарактеризовать рекомбинантные ДАБацетилтрапсферазы Ес1А из метанотрофа Мт. ИрИИит 7 и метилобактерий М. ЫсаИса и М. НгаБка. Определить нуклеотидные последовательности генов емЯ, кодирующих предполагаемые транскрипционные регуляторы есМВСазк оперонов у Мт. ИрИИит , М. Иса и М. Иа1тса. Определить промоторные области есАВСазк оперонов и генов есШ у Мт. ИрИИит 7 и М. Иа1аяка. Выделить и охарактеризовать предполагаемые транскрипционные белкирегуляторы НсК из Мт. ИрИИит и М. Иак. Научная новизна. Получены и охарактеризованы рекомбинантные ДАБацетнлтрансферазы. Показано, что свойства ДАБацетилтрансферазы коррелирует с экофизиологпческими особенностями изучаемых бактерий. Впервые установлено, что регуляция биосинтеза эктоина у изучаемых метилотрофных бактерий происходит на уровне транскрипции еМАВСазк оперона. Определено, что оперон ес1АВСаьк у Мт. ИрИИит 7 и М. Иа1амка транскрибируется с двух промоторов Р1 и Р2. Выше ееоперона обнаружены гены есЯ, кодирующие белки, гомологичные белкамрегуляторам семейства МагИ Получены и охарактеризованы гомогенные препараты белков БсШ, показана их способность обратимо связываться с Р1 промоторной областью есоисрона в пределах предполагаемой последовательности. Уровень экспрессии с промотора Р1 регулируется белком ЕсК и увеличивается в условиях высокой осмолярности среды, тогда как с промогора Р2 осуществляется низкая конститутивная экспрессия генов биосинтеза эктоина, не регулируемая продуктом гена есЯ. Найдено, что у Мт. ИрИИит 2, в отличие от М. Р1 и 2 оперона. Предполагается, что транскрипция гена у . контролируется собственным продуктом, т. является ауторегулятором. Практическое значение работы. Данная работа расширяет наши представления о регуляции биосинтеза эктоина и создает предпосылки для эффективной реализации биотехнологического потенциала галоалкалофильных метанотрофов и метилобактерий, как возможных продуцентов биопротектора эктоина. Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на ежегодных отчетных конференциях ИБФМ РАН гг, на 8, 9 и ой международных школахкопфереициях молодых ученых Путцино, гг. Всероссийской молодежной школеконференции Актуальные аспекты современной микробиологии Москва, и , на международной научной конференции Современные проблемы микробиологии и биотехпологии Одесса, , на международной научной конференции Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии Минск, , на школеконференцин Биология традиции и инновации в веке Казань, . Публикации. По материалам диссертации опубликованы 3 статьи и 7 тезисов. Место проведения работы. Экспериментальная часть работы выполнена в лаборатории радиоактивных изотопов в рамках плана научноисследовательских работ УРАН ИБФМ РАН по теме Экстремофильныс и экстремотолерантные аэробные метшютрофы Госрегистрации . Благодарности. Автор благодарен сотрудникам УРАН ИБФМ РАН, способствовавшим выполнению и написанию дайной диссертационной работы д. Дорониной , к. Шляпникову М. Г., к. Ивашиной Т. В., к. Захаровой М. В., ст. Вотсвой Г. В., а также сотрудникам УРАН ИБ РАН к. Ксензеко В. Н. и Глухову . . Особую признательность автор выражает своим научным руководителям д. Троцснко Ю. А., д. Хмелсниной В. Н. и к. Решетникову . Структура и объем работы. Диссертация изложена на сгр.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 1.181, запросов: 966