Характеристика пептидазной активности тонкой кишки цыплят

• Автор: Таврид, Ирена Леоновна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Рига
• Количество страниц: 212 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Переваривание белка в организме животных

1.2. Регуляция активности ферментов Т

1.3. Адаптация кишечных ферментов

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Общая характеристика экспериментальных животных и методов исследования

2.2. Изоляция петли тонкой кишки i viv

2.3. Получение препаратов тонкой кишки i vi

2.3.1. Приготовление интактных кишечных препа

2.3.2. Приготовление гомогенатов слизистой тонкой кишки
2.3.3. Получение препаратов солюбилизированных ферментов
2.3.4. Выделение апикального гликокаликса
2.3.5. Фракционирование солюбилизированных ферментов
2.4. Определение интенсивности гидролитических
процессов
2.4.1. Определение пептидазной активности по убыли субстрата
2.4.2. Определение пептидазной активности по приросту свободного глицина
2.4.3. Ферментативный метод определения пептидазной активности с помощью оксидазы ъаминокислот
2.4.4. Определение активности сахаразы
стр.
.5. Определение содержания белка
2.6. Субстраты и модификаторы
2.7. Источники реактивов
2.8. Оборудование Глава 3. РЕГУЛЯТОРНЫЕ СВОЙСТВА ГЛИЦИЛЛЕЙЦИНДИПЕПТИДАЗЫ
ТОНКОЙ КИШКИ ЦЫПЛЯТ
3.1. Влияние модификаторов на гидролиз глициллейцина межцепные взаимодействия
3.2. Взаимодействие пептидов в процессе гидролиза внутрицепные взаимодействия
3.3. Влияние модификаторов на гидролиз пептидов
i viv
3.4. Заключение
Глава 4. АДАПТАЦИЯ КИШЕЧНЫХ ДИПЕПТИДАЗ
4.1. Влияние голодания на свойства кишечных пептидаз ЬЗ
4.2. Влияние диет с различным уровнем белка на свойства кишечных пептидаз Ь
4.3. Изменения активности и регуляторных свойств дипептидаз в онтогенезе
4.4. Заключение 2 Глава 5. РЕГУЛЯТОРНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ И ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА ПЕПТИДАЗ КЛЕТОЧНЫХ ФРАКЦИЙ
5.1. Регуляторные характеристики пептидаз апикального гликокаликса и слизистой, лишенной его 1
5.2. Регуляторные характеристики солюбилизированных ферментов
5.3. Некоторые физикохимические характеристики пептидаз проксимального и дистального отделов
5.4. Специфичность пептидаз с
стр.
5.5. Кинетика солюбилизированной глициллейциндипептидазы
5.6. Фракционирование солюбилизированных ферментов
5.7. Заключение
ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Существование таких комплексов создает ряд преимуществ, заключающихся в сопряжении различных гидролитических процессов, что облегчает и ускоряет переваривание и ассимиляцию пищевой смеси. Для понимания механизма действия ферментов важное значение имеет природа их сеязи с мембраной. Анализ таких связей проводится в основном в экспериментах по изучению влияния различных агентов, при обработке которыми ферменты тонкой кишки переходят в раствор. Способностью солюбилизировать ферменты обладают протеолитические агенты трипсин, папаин, детергенты, ультразвук, полярные и неполярные растворители и ряд других факторов обзоры , i, 7Х . УголеЕ, лолтушкина, ,, . Результаты проЕеденг ных исследований убеждают в том, что ферментмембранные контакты осуществляются за счет пептидных связей и гидрофобных взаимодействий. При обработке изолированной мембраны микроворсинок неполярным детергентом Тритоном Х0 освобождается вся молекула фермента, тогда как при действии протеолитических агентов трипсина запайка отщепляется гидрофильная часть, обладающая каталитической активностью x . , , v . v . x, v . Одной из особенностей дипептидаз, по сравнению с другими кишечными ферментами является низкая прочность их связи с мембраной, и возможность спонтанного перехода в раствор без применения каких либо солюбилизирующих агентов i ,, , , , Кушак и др. Уголев и др. Исследование феномена спонтанной солюбилизации дипептидаз в опытах i viv и влияния ишемии на этот процесс позволило установить, что интенсивность солюбилизации в условиях живого организма существенно ниже по сравнению с опытами i vi. В то же время полное исключение кровообращения в кишечной петле вызывает резкое увеличение интенсивности солюбилизации дипептидаз Кушак и др. Физиологическое значение феномена спонтанной солюбилизации в живом организме не представляется существенным, но изучение механизма этого процесса в опытах i vi имеет несомненный теоретический интерес и позволяет решать проблемы локализации дипептидаз на поверхности мембраны и прочности ферментмембранных взаимодействий. Таким образом, расщепление белка в организме животных, в том числе и птиц, представляет собой сложный многоступенчатый процесс, в котором принимают участие различные ферменты. Уголев, , , Кушак, . Регуляция активности ферментов в тканях лежит в основе всех метаболических процессов и способности организма поддерживать самые разнообразные жизненные функции. У высших животных активность ферментов зависит от этапа индивидуального развития, физиологического состояния, характера питания, наличия патологических процессов и ряда других факторов. Изменения ферментативной активности по своему характеру могут быть разделены на 2 группы. К первой группе относятся изменения концентрации или активности фермента е ткани, которые находятся под контролем генетического аппарата клетки, Еключающем механизмы синтеза и распада специфических белков или биогенеза мембранных структур клетки если изменения затрагивают мембранносЕязанные ферменты. Ответная реакция клетки развивается, как правило, после определенного лагпериода,после воздействия регулирующего фактора. Чаще всего такие медленные изменения ферментативной активности носят приспособительный характер по отношению к изменяющимся условиям окружающей среды. В этом случае изменения ферментативной активности называют адаптивными Парина, Калиман, . Молекулярные механизмы длительной регуляции или адаптации еще не выяснены, однако ясно, что в качестве индуктороЕ могут выступать пищевые вещества, гормоны, лекарственные препараты Уголев, ,i, ,i, ,, , , , , . Более подробно этот тип регуляции активности кишечных ферментов будет рассмотрен в следующем разделе. Второй тип регуляции характеризуется быстрыми изменениями ферментативной активности и непосредственно связан с факторами, определяющими условия ферментативного катализа.