Реконструированные липопротеины плазмы крови : Получение, структура, свойства, применение

• Автор: Мишарин, Александр Юрьевич
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 257 с. : ил.

Активность СЕТР обычно не обнаруживается в плазме мышей и крыс. У этих животных, как известно, уровень ЛВП очень высок, а уровень ЛИП и ЛОНП низок. Поскольку время жизни липопротеинов разных классов в плазме сильно различается, а в отсутствии СЕТР обмен холестериновых эфиров и триглицеридов не происходит, в плазме крови крыс и мышей клиренс холестерина и триглицеридов независимы. Это является одной из главных причин резистентности мышей и крыс к атеросклерозу. Для исследования роли СЕТР в метаболизме ЛВП были получены линии трансгенных мышей с экспрессированным СЕТР человека , и макаки . У мышей с экспрессированным СЕТР человека уровень ЛВП менялся незначительно и лишь СЕТР было обнаружено во фракции ЛВП . Как оказалось, причиной этого являлось низкое сродство СЕТР человека к ЛВП мыши. Рис. Особенности метаболизма ЛВП при дефиците ЛХАТ А болезни рыбьего глазаБ и дефиците СЕТР В. СЕ холестериновые эфиры, эндосомы, гепатическая липаза, лизосомы, липопротеинлипаза. Нишиде и соавторы идентифицировали в плазме крови человека подфракцию мигрирующих ЛВП с низким содержанием ало А1 и апо А2. В составе этой подфракции ЛВП был обнаружен белок, подавляющий активность СЕТР, названный I ii iii i. Очень интересно, что плазма крыс после пропускания через иммуносорбент с антиI антителами, приобретала значительную способность к переносу холестериновых эфиров. Наследственный дефицит СЕТР, обусловленный дефектом сплайсинга соответствующего гена , вызывает повышение уровня ЛВП и приводит к появлению в плазме крупных ЛВП, обогащенных апо Е. В обзоре Шмитца и соавторов , в частности, приведены особенности метаболизма ЛВП при дефиците СЕТР, болезни рыбьего глаза и наследственном дефиците ЛХАТ рис. МЕТАБОЛИЗМ ГЛОБУЛЯРНЫХ ЛВП РОЛЬ ЛИПАЗ. Основную массу ЛВП в плазме крови человека составляют глобулярные ЛВП с аподвижностью в агарозном геле. Обычно различают две основные фракции ЛВПЗ сферические частицы с массой кДа и ЛВП2 сферические частицы с массой 0 кДа. В составе ЛВПЗ присутствуют апо А1 и апо А2, в составе ЛВП2 обычно также находят апо Е и апо С. Каждая из фракций может быть разделена на подфракции градиентным гельэлектрофорезом . Характеристика подфракций ЛВП, полученная комбинацией седиментационных, микроскопических, иммунохимических и спектральных методов была проведена в работе . В результате этой работы было охарактеризовано 9 дискретных подфракций ЛВП, различающихся размерами, липидным составом, присутствием апо А2 и апо С, причем для нескольких из охарактеризованных подфракций была продемонстрирована неоднородность. В этой работе впервые было экспериментально показано различие конформации апо А1 в составе крупных и мелких сферических ЛВП, а также предложена структурная модель, объясняющая эти конформационные различия. По данным работы , в середине полипептидной цепи апо А1 имеется фрагмент, состоящий из двух аспиральных участков шарнирный домен, связанный с поверностью в составе крупных ЛВП2, но экспонированный в воду в составе мелких ЛВПЗ. Различное положение шарнирного домена может стабилизировать поверхность сферической частицы при изменении размеров неполярного кора рис 2. Рис. Положение шарнирного домена апо А1 в составе ЛВП2 А и ЛВПЗ В. Известен процесс укрупнения частиц ЛВП в плазме трансформация ЛВПЗ ЛВП2, приводящий к сферическим ЛВП2, содержащим неполярных молекул. Трансформация ЛВП3ЛВП2 требует присутствия молекул, необходимых для увеличения размеров кора триглицериды и для построения поверхностной оболочки липопротеина фосфолипиды, аполипопротеины, холестерин ,3. Известен обратный процесс трансформация ЛВП2 ЛВПЗ. Уменьшение размеров частицы ЛВП2 обусловлено гидролизом триглицеридов и фосфолипидов. Как увеличение размеров частиц ЛВП трансформация ЛВП3ЛВП2, так и уменьшение размеров частиц ЛВП трансформация ЛВП2ЛВП3 зависит от активности липаз липопротеинлипазы 1Р1 и печеночной липазы Н1 рис. Совместное действие 1Р1 и СЕТР вызывают трансформацию ЛВП3ЛВП2, а Н1 фермент, активно гидролизующий фосфолипиды и триглицериды, вызывает трансформацию ЛВП2 ЛВПЗ 4,5.