Особенности белково-протеиназного комплекса пивоваренного ячменя, выращенного на различных агрофонах

• Автор: Диаби Ибраима Калил
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1994
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 105с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Обшэя характеристика протеолитических

ферментов.

1.2. Протеолитические ферменты растений

1.3. Протеолитические ферменты семян

растений

1. 4. Протеолитические ферменты ячменя.

1. 5. Белковые ингибиторы протеаз растений

1. 6. Белковые ингибиторы протеиназ ячменя.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Агрохимическая характеристика почв
2.2. Материалы, а.
2. .3. Подготовка образцов к исследованию.
2. 4. Определение белка по методу Лоури.
2. 5. Выбор субстрата для нейтральных протеаз
2.6. Определение активности протеаз по
методу Ансона.
2. 7. Определение начальной скорости реакции
2. 8. Гельхроматография.
2. 9. Определение молекулярной массы
водорастворимых белков ячменя
гельхроматографией на сефадексе Б
2 Выделение белковых ингибиторов протеаз. .
2 Выделение ферментного препарата
нейтральных протеаз ячменя .
2 Определение активности ингибиторов
протеаз. . Г.г.
21. Определение активности ингибиторов
трипсина. V..
22. Определение активности ингибиторов
нейтральных протеаз ячменя
3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
3.1. Характеристика исследуемого зерна
ячменя
3.2. Активность нейтральных протеаз, ингибиторы нейтральных протеаз и трипсина зерна ячменя, выращенного на
различных агрофонах
3.3. Активность кислых протеаз зерна ячменя, выращенного на различных агрофонах
3. 4. Влияние условий выращивания на
содержание водорастворимого белка в
исследуемых образцах ячменя
3. 5. Фракционирование водорастворимых белков исследуемых образцов ячменя на
сефадексе3.
3.6. Изменение активности кислых протеаз при прорастании исследуемых образцов ячменя
3.7. Изменение активности нейтральных протеаз при прорастании исследуемых
образцов ячменя
3. 8. Изменение активности белковых
ингибиторов протеаз при прорастании
зерна ячменя. .
3.9. Характеристика солода из исследуемых образцов ячменя по активности
кислых и нейтральных протеаз.
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Фракционирование водорастворимых белков на колонке с сефадексом 3 исследуемых образцов ячменя выявило, что улучшение степени окультуренности почвы приводит к увеличению их молекулярной массы. Установлено влияние на молекулярную массу водорастворимых белков ячменя степени окультуренности почвы и доз вносимых удобрений. Установлена зависимость изменения активности кислых и нейтральных протеаз ячменя, а также белковых ингибиторов протеаз при прорастании зерна от используемого при возделывании агрофона. Выявлена взаимосвязь между активностью кислых и нейтральных протеаз солода и степенью окультуренности почвы и доз вносимых удобрений. Практическая значимость работы. Полученные в ходе проведенных экспериментов данные расширяют представление о влиянии степени окультуренности почвы и доз вносимых удобрений на физические свойства, биохимические показатели качества и технологические достоинства пивоваренного ячменя. Результаты исследований создают предпосылки для получения зерна пивоваренного ячменя с оптимальными технологическими достоинствами. Результаты работы могут быть использованы в сельском хозяйстве при выращивании пивоваренного ячменя. Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на расширенном заседании кафедры биохимии и зерноведения МГАПП Москва, . Публикации. По материалам диссертации опубликовано 2 работы. ЕФ. Пептидгидролазы катализируют реакции расщепления пептидных связей в белках и пептидах. В соотвествии с классификацией Бергмана протеазы делятся на пептидазы экзопептидазы, действующие на концах полипептидной цепи и протеиназы эндопептидазы, действующие на центральных участках. В основу их деления на подклассы положена специфичность и особенности механизма катализа Ден, . Экзопептидазы, включающие подподклассы 3. Эндопептидазы разделены на четыре подкласса 3. В подкласс 3. Протеиназы наиболее изученные и легко поддающиеся кинетическим и структурным исследованиям фермент Механизмы каталитического действия некоторых протеиназ изучены достаточно полно, другие исследованы в общих чертах Фрпгг, Клсов, Березин, , . СЕРИНОВЫЕ ПРОТЕИНАЗЫ Н. Ф. З. К ней относятся ферменты животных и человекатрипсин, химотрипсин, эластаза, тромбин, плазмин и другие, некоторых растений и микроорганизмов субтилизин. Ферменты этой группы обладают, как правило, максимальной активностью при нейтральных значениях . Для этих ферментов характерно наличие цепи переноса заряда, образованной гидроксильной группой серина, имидазольным кольцом гистидина и карбоксильной группой аспарагиновой кислоты Фршт, Антонов, . ТИОЛОВЫЕ ПРОТЕИНАЗЫ ЕФ. К ним относятся ферменты папаин, бромелаин, фицин и ряд других эндопептидаз, для которых характерен общий тип специфичности, зависящий от аминокислотного остатка, удаленного на один остаток от атакуемой пептидной связи. НЗ группы в белках Мосолов, . КИСЛЫЕ ПРОТЕИНАЗЫ Е Ф. Фршт, . Одна из них специфически блокируется ингибиторами с диазоацетильной грзгапой, другая, вероятно, избирательно реагирует с эпоксисоединениями. Применение этих типов ингибиторов значительно облегчает идентификацию кислых протеиназ Антонов, . Наиболее изученными ферментами этого подподкласса, проявляющими свою активность в кислой и слабокислой среде, являются пепсин, ренин, катепсин Д, кислые протеиназы лизосом Мосолов, Кретович, . МЕТАЛЛ0ПР0ТЕИНАЗЫ ЕФ. Однако, для ферментов этой группы характерна существенная особенность, заключающаяся в том, что все они содержат ион металла, необходимый для каталитической активности Степанов, Фршт, . Большинство металлопротеиназ представлено ферментами микробного происхождения. Растительные металлопротеиназы были выделены из маиса Антонов, , из семян фасоли Витол, Попов, . Цинкосодержащая протеиназа обнаружена в семенах гречихи Воскобойникова, Дунаевский, Белозерский и др. Протеиназы играют важную роль в физиологических процессах. В случае , деградации белковых молекул, они определяют скорость распада белков в организме и участвуют в регуляции их кругооборота.