Молекулярно-генетические основы развития предрасположенности к артериальным тромбозам

• Автор: Сироткина, Ольга Васильевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 148 с. : ил

1. Обзор литературы

1.1. Гемостаз и тромбоз

1.2. Наследственные тромбофилии

1.3. Генетические детерминанты, определяющие состояние тромбофилии.

1.3.1. Ген фактора V свертывания крови.

1.3.2. Ген протромбина.

1.3.3. Ген Рфибриногена.

1.3.4. Ген ингибитора активатора илазминогена типа 1.

1.3.5. Ген Ii субъединицы рецептора тромбоцитов IIII.

1.3.6. Ген метилентетрагидрофолат редуктазы

1.3.7. Ген фактора VII свертывания крови.

1.4. Патогенез ишемического инсульта и инфаркта миокарда.
2. Материалы и методы
2.1. Характеристика обследуемых групп
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Выделение ДНК из периферической крови человека
2.2.2. Полимеразная цепная реакция и рестрикционный анализ.
2.2.3. Определение биохимических показателей плазмы крови
2.3. Статистическая обработка результатов исследования.
3. Результаты исследования.
3.1. Контрольная группа
3.1.1. Распределение аллельных вариантов генов, определяющих склонность к тромбофилии, в контрольной группе
3.1.2. Анализ биохимических показателей в контрольной группе.
3.2. Группа пациентов, перенесших ишемический инсульт
3.2.1. Анализ частотных распределений мутаций и полиморфизмов изучаемых генов у пациентов, перенесших ишемический инсульт
3.2.2. Анализ результатов биохимического исследования в группе пациентов, перенесших ИИ
3.2.3. Кооперативный вклад генетических и приобретенных факторов в риск развития ИИ
3.2.4. Анализ аллельного распределения генов, определяющих склонность к тромбофильным состояниям, у пациентов в зависимости от семейной истории сердечнососудистых заболеваний
3.2.5. Распределение частот аллелей анализируемых генов в зависимости от количества перенесенных ИИ.
3.2.6. Гснгснныс взаимодействия в группе пациентов с ИИ.
3.3. Группа пациентов, перенесших инфаркт миокарда в молодом возрасте.
3.3.1. Анализ частотных распределений мутаций и полиморфизмов изучаемых генов у пациентов, перенесших ИМ в молодом возрасте
3.3.2. Анализ биохимических показателей в группе пациентов, перенесших ИМ.
3.3.3. Анализ аллельных распределений исследуемых генов в зависимости от семейной истории сердечнососудистых заболеваний.
3.3.4. Приобретенные факторы риска и развитие инфаркта миокарда в молодом возрасте.
3.3.5. Анализ кооперативного вклада генетических и приобретенных факторов риска в развитие ИМ у мужчин молодого возраста
3.3.6. Распределение аллелей исследуемых генов у пациентов, перенесших несколько инфарктов миокарда
3.3.7. Генгенные взаимодействия в группе пациентов с ИМ
4. Обсуждение.
Список литературы.
Список сокращений.
ССЗ сердечнососудистые заболевания
ИИ ишемический инсульт
ИМ инфаркт миокарда
ИБС ишемическая болезнь сердца
АГ артериальная гипертензия
III антитромбин III
I ингибитор пути тканевого фактора
ТМ тромбомодулин
АПС активированный протеин С
АПСР резистентность к активированному протеину С
активатор плазминогена тканевого типа
иРА активатор плазминогена урокиназного типа
I1 ингибитор активатора плазминогена типа
V i лейденская мутация гена фактора V свертывания крови
2 ген протромбина
7 ген фактора VII свертывания крови
ген фибриногена
5,метилентетрагидрофолат рсдуктаза гликопротеин
V антиген фактора Виллебранда общий гомоцистеин плазмы крови ФГ фибриноген
ВАТ внутрисосудистая активация тромбоцитов
Vx максимальная скорость АДФинлуцированной агрегации тромбоцитов относительный риск I доверительный интервал
Введение


Впервые в российской популяции проанализирован уровень общего гомоцистеина у мужчин, перенесших ишемический инсульт, и определена зависимость уровня общего гомоцистеина от генотипа С7Т у названных пациентов. Впервые установлено, что Т7 аллель гена ассоциируется с повышенным риском развития ишемического инсульта у лиц с семейной историей сердечнососудистых заболеваний. Впервые проанализировано взаимодействие между приобретенными факторами риска развития сердечнососудистых заболеваний и генетическими детерминантами, определяющими склонность к тромбофилии, у лиц мужского пола г. СанктПетербурга. Показан кооперативный эффект курения и V i или р1л,л2 1а, десятикратно повышающий риск развития инфаркта миокарда. Установлено, что сочетание V i и нарушения обмена липидов увеличивает риск развития артериальных тромбозов церебрального и коронарного русла. Впервые в мировой практике проведен анализ межгенных взаимодействий семи вышеуказанных детерминант у пациентов, перенесших ишемический инсульт или инфаркт миокарда, и оценен вклад сочетанных генотипов в риск развития артериальных тромбозов различной локализации. А1А2 и С7Т , а в риск развития инфаркта миокарда i Ша и I1 или С7Т и РАМ. Практическая значимость работы. На основании полученных результатов показана целесообразность определения наличия генетических детерминант, обусловливающих склонность к повышенному тромбообразованию, в первую очередь рА,А2 полиморфизма гена Ша и лейденской мутации гена фактора V, у курящих мужчин с целью профилактики развития инфаркта миокарда. Для определения группы высокого риска развития ишемического инсульта и инфаркта миокарда у мужчин с нарушениями обмена липидов рекомендовано определение лейденской мутации гена фактора V. Для определения группы высокого риска развития ишемического инсульта среди лиц, имеющих отягощенный семейный анамнез по этому заболеванию, рекомендовано определение мутации С7Т II. Это даст возможность проводить генетически обоснованную фармакотерапию повышенными дозами фолиевой кислоты и витаминами Вг и В с целью предотвращения повышения уровня общего гомоцистеина плазмы крови. С целью профилактики развития инфаркта миокарда в молодом возрасте необходимо раннее выявление лиц мужского пола, являющихся носителями i,2 полиморфизма гена Ша. Это имеет большое практическое значение, так как лица с различными генотипами i,2 Ша могут обладать различной чувствительностью к антиагрегантной терапии аспирином. Инсерционный промоторный полиморфизм гена фактора VII свертывания крови I2 встречается достоверно реже среди пациентов мужского пола, перенесших ишемический инсульт в возрасте до лет, по сравнению с контрольной группой. Данный полиморфизм является протективным в отношении развития церебрального артериального тромбоза и его отсутствие повышает риск развития ишемического инсульта. Полиморфизм Р1А1Л2 гена 1а является фактором риска развития инфаркта миокарда у мужчин в возрасте до лет. Риск развития инфаркта миокарда у носителей данного полиморфизма значительно возрастает при сочетании с курением. Лейденская мутация фактора V свертывания крови вносит вклад в риск развития артериального тромбоза в церебральном и коронарном русле при взаимодействии с нарушениями обмена липидов. Апробация работы. Результаты работы были доложены на V Всероссийской конференции Тромбозы, геморрагии, ДВСсиндром. Института экспериментальной медицины СанктПетербург, Россия, , на юбилейной конференции СПбГМУ им. И.П. Павлова 0лет кафедре факультетской терапии им. Г.Ф. Международной конференции Геномика, протеомика и биоинформатика для медицины Москва, Россия, , на ом Международном конгрессе но тромбозам Болонья, Италия, . По теме диссертации опубликовано работ, из них 3 статьи. Структу ра и объем диссертации. Диссертация изложена на 8 страницах машинописного текста, содержит таблиц, иллюстрирована рисунками и состоит из следующих разделов введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов, выводов и списка литературы, включающего 4 научных источника на русском языке и 9 на иностранном.