Множественные формы ферментов живородки речной как маркеры токсического загрязнения воды

• Автор: Попов, Алексей Петрович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 171 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Проблема нормирования загрязнения вод

1.2. Оценка токсичности воды по биологическим показателям

1.3. Применение методов биотестирования в практике охраны вод

1.4. Биологические методы анализа качества вод.

1.5. Энзимодиагностика загрязнений.

1.6. Множественные формы ферментов как показатели токсичности воды

1.7. Выбор тестобъектов и тестфункций для токсикологических исследований

Глава 2. Материалы и методы

2.1. Материалыг
2.1.1. Особенности биологии экспериментальных животных.
2.1.2. Сбор материала, содержание моллюсков в лабораторных условиях и схемы токсикологических экспериментов
2.2. Методы
2.2.1. Подготовка биологического материала и экстракция белков.
2.2.2. Спектрофотометрическое определение активности ферментов .
2.2.3. Выявление множественных форм ферментов методом энзимэлектрофореза.
2.2.4. Гельфильтрация.
2.2.5. Субклеточное фракционирование.
2.2.6. Препаративное изоэлектрофокусирование.
2.2.7. Выделение ДНК из тканей живородки речной
2.2.8. Анализ продуктов гидролиза эндогенной ДНК моллюсков.
2.2.9. Статистическая обработка результатов
Глава 3. Изменение активности ферментов печени живородки речной под
воздействием различных токсикантов
3.1. Определение оптимальных параметров для обнаружения активности исследуемых ферментов
3.2. Влияние тяжелых металлов на активность малатдегидрогеназы и
кислых гидролаз печени живородки речной.
3.2.1. Действие тяжелых металлов на гидролазы печени живородки речной
3.2.2. Влияние тяжелых металлов на активность малатдегидрогеназы моллюсков.
3.2.3. Реакция лизосомального аппарата на токсическое воздействие.
3.3. Изменение активности ферментов живородки речной в динамике токсического воздействия бензина. Общие закономерности реагирования ферментных систем организма
на интоксикацию.
3.4. Влияние различных концентраций синтетических поверхностноактивных веществ и фенола на активность литических
ферментов моллюсков.
3.5. Гидролазы живородки речной влияние галогенпроизводных бензола. Чувствительность тестферментов к токсическому загрязнению воды
Глава 4. Множественные формы малатдегидрогеназы и глюкозо6фосфатдегидрогеназы печени живородки речной и влияние на их активность галогенорганических соединений
Глава 5. Влияние токсических веществ на множественные формы кислой ДНКазы печени живородки речной.
5.1. Изменение спектра форм кислой ДНКазы моллюсков в результате интоксикации солями тяжелых металлов
5.2. Влияние бензина на молекулярную гетерогенность кислой ДНКазы в печени живородок
5.3. Множественные формы кислой ДНКазы живородки речной как показатели токсического воздействия на организм
Глава 6. Комплекс кислых ДНКаз печени живородки речной молекулярная гетерогенность, субклеточная локализация, особенности действия на эндогенный и модельный субстраты.
6.1. Субклеточная локализация кислых ДНКаз.
6.2. Разделение кислых ДНКаз.
6.3. Особенности действия кислых ДНКаз печени живородки на
эндогенную и экзогенную ДНК.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Кроме того, принципиально невозможно предположить и охватить контролем основную массу присутствующих в исследуемой воде токсических веществ. V , i, . В странах Западной Европы и Скандинавии в природных водных экосистемах регулярно контролируется только химических показателей загрязнения i . Наиболее технически оснащенные лаборатории, входящие в систему государственного контроля вод Российской Федерации, могут определить около 0 гидрохимических компонентов то есть имеют методики и соответствующую аппаратуру, однако на практике определяется, как правило, не более показателей загрязнения водоема изза высокой стоимости анализов, плохой обеспеченности кадрами и т. Методы химического анализа при всей их сложности, трудоемкости и дороговизне не дают ответа на главный вопрос о характере и степени опасности того или иного загрязнения для экосистемы водоемов. Еще в г. Обобщенные показатели. Исторически гидрохимический контроль качества вод доминировал во всем мире до х годов, однако в настоящее время очевидна невозможность получения совершенной и полной информации о качестве водных систем с помощью методов химического контроля V , , . Современное нормирование сбросов загрязняющих веществ, с одной стороны, должно надежно защитить водные экосистемы от неблагоприятного воздействия сточных вод, и, с другой стороны, позволять максимально использовать ассимилирующую способность водных объектов в отношении загрязняющих веществ, что возможно лишь при самом широком использовании биологических методов в мониторинге водной среды. Токсические эффекты, регистрируемые такими методами, являются интегральными показателями загрязнения, отражая комплексное воздействие всех химических, физических и биологических компонентов, присутствующих в исследуемой воде. Токсичность один из важнейших факторов, определяющих качество воды, ее биологическую полноценность и пригодность для жизни гидробионтов. Оценка токсичности воды по биологическим показателям. Создание научно обоснованной методологии оценки качества вод является актуальной задачей сегодняшнего дня тесно связанной с разработкой критериев состояния водных экосистем и принципиальных подходов к экологическому нормированию антропогенных нагрузок. Биологические приемы оценки качества вод разделяют на методы биоиндикации и биотестирования. Под биотестированием в узком смысле подразумевают определение биокондиции воды по реакциям помещенных в нее тесторганизмов. В широком смысле под биотестированием понимают регистрацию изменений различных биологических тестфункций поведенческих, морфологических, биохимических, функциональных при действии загрязненных токсическими веществами вод на выбранные тестобъекты как в лабораторных, так и в полевых условиях Короленко, . Соответственно поставленным задачам различают три типа биотестов 1 лабораторные тесты, которыми определяется токсичность тех или иных ингредиентов сточных вод и различных веществ и оценивается влияние разнообразных факторов на их токсичность 2 тесты i i, т. Биологические методы контроля водной среды. Так, стоимость химического анализа на присутствие диоксинов в пробе воды в России составляет 1, тыс. Анализ затруднен вследствие крайне малых величин ПДК 7 мгл и наличия многочисленных изомеров. Контроль с помощью биотестирования позволяет выявить их присутствие в среде на уровне доз, оказывающих токсическое воздействие на организм. Токсикологический анализ принципиально дешевле химического, поскольку один тест на токсичность заменяет несколько десятков химических анализов и регистрирует суммарную опасность всех присутствующих химических веществ. Иногда биологическими методами получают результаты, отличные от данных гидрохимических исследований. Очевидно, что биологический анализ имеет решающее значение во всех вопросах, затрагивающих не только качество воды, но и состояние водоемов в целом. В настоящее время методы биологической индикации признаются наиболее точным и адекватным способом оценки состояния водоемов их типа, стадии загрязнения, степени развития процесса звтрофирования и пр. Обобщенные показатели.