Лакказы базидиомицетов : свойства, структура, механизм действия и практическое применение

• Автор: Королева, Ольга Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 50 с. : ил.; 20х14 см

1

Ведущая организация

Московский Государственный Университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет.

Защита диссертации состоится июня г. в час. на заседании диссертационного совета Д . по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук при Институте биохимии им. А.Н.Баха РАН по адресу Москва, Ленинский проспект, , корп. 2, конференцзал.
С диссертацией в виде научного доклада можно ознакомиться в Библиотеке биологической литературы по адресу , Москва,

Афинский проспект, , кори. 1.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук, профессор

Т.А. Валуева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность

Проведено сравнительное изучение и температурноиндуцированных изменений структуры активного центра лакказы и лакказы с удаленным юном меди второго типа, а также их каталитического и электрохимического поведения различными методами, включая методы ЯМР и ЗПР спектроскопии. Впервые проведено ЯМР исследование парамагнитного фермента лакказы. На основе полученных данных установлена структура двух интермедиатов лакказы и предложен механизм структурных перестроек активного центра в процессе катализа. Установлена новая физиологическая функция лакказы рнбов белой гнили участие в образовании гуминоподобных веществ. Впервые проведена комплексная характеристика гумипоподобных веществ, образованных грибами белой гнили при культивировании на растительном субстрате овсяной соломе. Установлено, что по элементному, структурногрупповому и молекулярномассовому составу ГПВ близки к почвенным ГК. Показано, что предшественниками ГПВ являются продукты деструкции лигнина. Путем прямого ферментативного синтеза, инициированного лакказой . По своим характеристикам даттые ГПВ были близки природным ГК и ГПВ грибов белой гнили. Изучен процесс биодеградации ксенобиотиков базияиальнымн рибами с использованием атразина в качестве модельного ксенобиотика. Установлена ключевая роль лакказы в деградации атразина i vi и i viv. Предложен механизм данного процесса. Практическая значимость. Полученные фундаментальные знания о взаимосвязи структуры лакказ и механизма их действия, а также физиологической роли этих ферментов имеют важное значение для практического конструирования систем делигнификации, детоксификации и биотрансформацт Разработаны приемы использования лигнинолитических ферментов для делигнификации и отбеливания растительного волокна, позволяющие достигать высокой степени делигнификации Артемов . ., Попов В. О., Королева О. В. и др. Попов В. О., Королева О. В. и др. Заявка от . Изучен процесс детоксификации ксенобиотиков, с использованием в качестве модельного соединения атразина. Показана эффективность деградации данного ксенобиотика базидиомицетаии и продуцируемыми ими лигнинолитическими ферментами до v . Ю I v, О. v О. Впервые установлена ключевая роль лакказы в синтезе гуминоподобных соединений базидиальными грибами, иго позволило не только расширить гтрсдстаатения о роли фермента в генезисе гумивовых веществ, но и разработать подходы к созданию новоготипа биоудобрсний Явметдинов И. С., Степанова Е. В., Гаврилова В. П., Лохшин Б. В., Перминова И. В., Королева О. В., viv V. ., vv . ., v О. V., . Впервые показана возможность использования лакказы в качестве фермегтамаркера для иммуноферментного анализа в различных париантах И ФА со спектрофотометрической и флуоресцентной системой детекции . V. а О.В. Скоробогатько и др. О.В. Скоробогатько и др. Патент 7, А. И.Джафарова, О. В.Скоробогатько и др. На основе коньюгатов дакказаантиген и лакказаантитело показана принципиальная возможность создания псевдобезчюдиаторкых иимуносенсоров на основе прямого биоэлсктрокатализа v В. ., vi . ., v . V. . Разработаны нммукосенсоры на основе лакказы для определения инсулина, иммуноглобулина , морфина и кодеина Т. i . v . V. . . ., . vi . v . V. . Разработан метод для тестирования фенольных компонентов вин определение антноксидангной активности винодельческой продукции на основе грибных лакказы и тирозиназы с электрохимической системой детекции Шлесв С. В., Чеканова С. А., Королева О. В. и др. Данный метод аппробнрозан на различных стадиях технологического процесса зинификации и пастеризации красных сухих вин . ., i . ., i . ., . . . . . vv . ., v . V., I. .. v . ., . ., i . ., v О. V., . Яковлева К. Э., Королева О. В. и др. Публикации. По материалам диссертации опубликованно статьи н 5 патентов. Апробация работы.