Исследование некоторых механизмов активации клеток иммунной системы

• Автор: Глоба, Александр Георгиевич
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 197 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Пути активации Глимфоцитов.

2. ЫАБРНоксидаза и Активация нейтрофилов.

3.Молекулярные механизмы апоптоза.

4. Возможность образования АТФ на плазматической мембране

5.Свойства некоторых цитокинов, использованных в данном исследовании

ГЛАВА П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. УЧАСТИЕ ПЛАЗМАМЕМБРАННОГО СИНТЕЗА АТФ В РАЗВИТИИ ИММУННОГО ОТВЕТА.
1.1. Плазмамембранный синтез АТФ в спленоцитах мышей под действием 1Е4 и апбМ.
1.2.Совместное действие конканавалина А и интерлейкина2 на плазмамембранный синтез АТФ в Тлимфоцитах крысы и человека.
1.3. Исследование совместного действия фитогемагглютинина ФГА и альфафетопротеина на плазмамембранный синтез АТФ в Т
лимфоцитах человека
1.4. Действие факторов некроза опухолейальфа Та на плазмамембранный синтез АТФ в лимфоцитах.
1.4.1 ТИРосстимулированный плазмамембранный синтез АТФ в спленоцитах мышей
1,4.2.Тастимулированный плазмамембранный синтез АТФ в Тлимфоцитах человека
1.5. Плазмамембранный синтез АТФ в перитонеальных макрофагах мышей линии СЗН, стимулированный макрофагальными колониестимулирующими факторами
2.РОЛЬ ПЛАЗМАМЕМБРАННОГО СИНТЕЗА АТФ В РАЗВИТИИ РЕСПИРАТОРНОГО ОТВЕТА
2.1. Плазмамембранный синтез АТФ в перитонеальных нейтрофилах морской свинки в ответ на действие хемоат1рактантно1 о пептида Ыформилметиониллейцилфеяилаланина РМЕР
2.2.Исследование протеинкиназной активности в ОГТМЧ нейтрофилов возможная дальнейшая судьба плазмамембранного АТФ
2.3. РМЬРстимулированный плазмамембранный синтез АТФ в перитонеальных макрофагах мышей линии СЗН
2.4. Исследование возможного участия плазмамембранного синтеза АТФ в развитии респираторного взрыва нейтрофилов.
2.4.1. Корреляция плазмамембранного синтеза АТФ с продукцией супероксида в экспериментальной септикопиемии.
2.4.2.Исследование состояния формилпептидных рецепторов в нейтрофилах отсутствие корреляции с плазмам ем бранным синтезом АТФ.
3. ПЛАЗМАМЕМБРАННЫЙ СИНТЕЗ АТФ И АКТИВАЦИЯ ИНДУЦИРОВАННОЙ КЛЕТОЧНОЙ СМЕРТИ АПОПТОЗА.
3.1.Исследование ИТОТа. индуцированных однонитевых разрывов ДНК в лимфоцитах доноров связь с плазмамембранным синтезом АТФ
3.2. Апоптоз нейтрофилов и плазмамембранный синтез АТФ.
3.3. Стимулированный дипополисахаридом ЬРБ плазмамембранный синтез АТФ в лимфоцитах и нейтрофилах человека возможное участие в апоптозе.
4. ПЛАЗМАМЕМБРАННЫЙ СИНТЕЗ АТФ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СОСТОЯНИЯ ЛИМФОЦИТОВ И НЕЙТРОФИЛОВ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ.
4.1. Респираторный ответ и состояния рецепторов к ЕМЬР в нейтрофилах при ожоговой травме
4.2. Функциональные состояния лимфоцитов и нейтрофилов при хирургической инфекции.
4.2.1. ТЫТаиндуцированный плазмамембранный синтез АТФ в лимфоцитах и его возможная роль в передаче сигнала апоптоза при
хирургической инфекции
4.2.2. Респираторный ответ и структура ядерной ДНК нешрофилов при хирургической инфекции. Корреляция с плазмамембранным синтезом АТФ
4.2.3. Корреляционная связь между исследованными биохимическими показателями функционального состояния лимфоцитов и нейтрофилов при хирургической инфекции.
4.3. Состояние лимфоцитов и нейтрофилов при пищевых токсикоинфекциях ПТИ
4.4. Сравнительное исследование ОР ДНК и уровня плазмамембранного синтеза АТФ в лимфоцитах и нейтрофилах при эмпиеме плевры и злокачественных новообразованиях легких
5. Обсуждение результатов.
Выводы
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Текст диссертации иллюстрирован таблицами и рисунками. ГЛАВА . Настоящий Обзор имеет цель показать роль фосфорилирования в регуляции таких функциональных ответов клеток иммунной системы, как дифференцировка, пролиферация, респираторный ответ и апоптоз В главах 1 3 Обзора приведены сведения об основных путях передачи регуляторных сигналов в лимфоцитах и нейтрофилах. В главе 4 рассматриваются сведения о возможности синтеза АТФ на плазматической мембране и предполагаемой биологической роли этого уникального явления. В главе 5 приводятся свойства некоторых питокинов, использованных в качестве материалов данного исследования. В данном Обзоре были использованы цитаты из отечественных и зарубежных обзоров , 7, 2. Их названия подробно приведены в списке цитируемой литературы. Уже на самых ранних стадиях в активацию Тлимфоцитов вовлекаются рецепторные тирозинспецифические киназы. Связанный с ТСК антиген генерирует сигнал, который передатся через ПМ в цитоплазму посредством внутриклеточных сайтов, представляющих из себя СОЗ у, 6, и е цепи и молекулы ТСЯ Каждая СЮЗ у, 5, и цепь содержит единственный родственный семейству иммуноглобиновых рецепторов тирозиносновной активационный мотив ТАМ, а сцегш содержа по 3 таких мотива в свом цитоплазменном домене. Каждый ТАМ содержит мотив ЕХ2 УХЛХ7УХЛ. Среди этих белков центральную роль играют две тирозиновые киназы и р1уп, которые связываются посредством 2 доменов 9. I и и связывается посредством своих 2 доменов преимущественно с одной из трх цепей I. Молекулы содержат также трансмембранные и внутриклеточные домены, которые связывают третью тирозинкиназу 7. Таким образом, рекогносцировка антигена опосредуется последовательной активации каскада гирозинкиназ. Поэтому предполагается, что неспецифические ингибиторы тирозинкиназ блокируют активацию Тлимфоцитов именно на этой стадии . Кроме вышеописанной последовательности молекулярнобиохимических событий возможно таюке участие кросслинкинга и активация киназ дефосфорилированием их негативных регуляторных сайтов. Этот процесс, возможно, осуществляется с помощью трансмембранной молекулы , у которой внутриклеточный домен содержит тирозинфосфатазу. Затем киназы фосфорилируют 1ТАМы. Результатом является привлечение киназы, которая последовательно профосфорилирована и активирована i 4, 6. Считается, что фосфорилирование и активация посредством р является ключевым событием для инициализации сигнальной цепочки . В конечном итоге инициируется полный репертуар конечных ответов Тклеток. Сигнальные пути изучены далеко не полностью, и физиологически субстраты для киназы ещ окончательно не идентифицированы. Наиболее подходящим кандидатом на эту роль является 2домен, содержащийся в лейкоцитарном белке . Тлимфоцитом специфических лигандов. Взаимодействие этих двух белков увеличивает активность фактора транскрипции 4. Фосфорилирование уменьшается в Тклетках, когда в них экспрессирована каталитически неактивная . Этот фермент может фосфорилировать i vi пептиды, предположительно близкие по структуре Vvсвязывающему сайту 4. Vv представляет собой протоонкоген с молекулярной массой кДа. Этот продукт специфически экспрессируется в гематопоэтических клетках и задействован в нескольких сигнальных процессах, инициированных поверхностными клеточными рецепторами. Он содержит несколько функциональных доменов, включая 2 и 3, а также домен фактора обмена гуаниновых нуклеотидов. Тирозинспецифическая протеинкиназа, которая активирует и фосфорилирует Vv вследствие активации антигеном, в настоящее время не идентифицирована. Предполагается, что активация и фосфорилирование Vv может осуществляться как самой АРкиназой , так и рецепторассоциированной 2киназой 9 и тирозинспецифическими протеинкиназами семейства Тес 7. Iоследовательность фосфорилирования и активации Vv неясна, но активированный Vv может играть роль в активации подобного ГТФсвязывающего белка. Эта активация является критическим этапом при передаче сигнала . Имеются сведения, что Vv может связывать , и что активность повышается при тирозинфосфорилировании Vv , .