Интенсивность окислительной модификации белков плазмы крови сусликов в динамике зимней спячки

• Автор: Астаева, Мария Дмитриевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Махачкала
• Количество страниц: 120 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Активные формы кислорода и механизмы окислительного повреждения макромолекул

1.2. Механизмы окислительной модификации белков

1.3. Физиологические и биохимические изменения в тканях при зимней спячке

1.4. Свободнорадикальные процессы и механизмы их регуляции при зимней спячке

ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект исследования

2.2. Постановка опытов

2.2.1.Исследование состояния гибернации

2.2.2.Исследование индуцированного пробуждения гибернирующих сусликов
2.2.3.Искусственное снижение температуры тела
2.3. Препаративные методы исследования
2.3.1.Получение плазмы крови, эритроцитов и гемолизата
2.4. Биохимические методы исследования
2.4.1.Определение содержания белка в плазме крови биуретовым методом
2.4.2.0пределение окислительной модификации белков плазмы крови
2.4.3.Определение общего содержания среднемолекулярных пептидов в плазме крови
2.4.4.0пределение антиокислительной активности гидрофильных компонентов плазмы крови
2.4.5.Определение активности супероксиддисмутазы
2.4.6.0пределение активности каталазы
2.4.7.0пределение содержания гемоглобина в крови аммиачным
методом
2.4.8.Количественное определение белка по Лоури
2.4.9.Определение содержания мочевой кислоты в плазме крови
2.5. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Интенсивность окислительной модификации белков и активность антиоксидантов крови в разные сроки спячки сусликов
3.1.1.Изменение содержания белка и среднемолекулярных пептидов в плазме крови в разные сроки зимней спячки
3.1.2.Интенсивность окислительной модификации белков плазмы крови сусликов в динамике зимней спячки
3.1.3.Состояние антиоксидантной системы крови при зимней спячке
3.2. Интенсивность окислительной модификации белков плазмы крови сусликов и активность антиоксидантов в динамике баута спячки
3.3. Интенсивность окислительной модификации белков и активность антиоксидантов в ходе спонтанного пробуждения сусликов
3.4. Влияние гипотермии на интенсивность окислительной модификации белков и активность антиоксидантов крови
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Результаты работы указывают на возможность повышения устойчивости гомойотермных животных к низким температурам тела путем повышения емкости антиоксидантной системы. Материалы, полученные при выполнении данной диссертационной работы, используются в учебном процессе на кафедрах биохимии и биофизики Дагестанского государственного университета и Махачкалинского филиала Ростовского государственного университета при чтении ряда спецкурсов. Апробация работы. Пущинской конференции молодых ученых Биология Наука XXI века Пущино, , на XIX съезде физиологического общества им. И.П. Павлова Екатеринбург, , на й научной конференции молодых учных и студентов Махачкала, . Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 работ, из них одна в реферируемом журнале. ГЛАВА 1. Аэробные организмы нуждаются в кислороде для своей жизнедеятельности. Однако повышение концентрации в среде выше уровня, характерного для атмосферного воздуха, является для них токсическим. Степень токсичности зависит от вида организмов, а также от многих других факторов. Токсические эффекты кислорода определяются не им самим, а разнообразными кислородными радикалами, которые образуются в тканях. Основным путм активации молекулярного кислорода в клетке является восстановление его в активных центрах ферментов оксидаз и оксигеназ. Реакционноспособные формы молекулярного кислорода представляют собой гетерогенный класс веществ. Среди них обнаруживаются соединения нерадикальной природы синглетный кислород и перекись водорода Н2, озон а также суперокисные , пергидроксильные Н и гидроксильные НО, алкоксильные , нитрорадикальные , гипохлоритные ОС1 радикалы Арчаков, Мохосоев, Меньшикова, Зенков, ivi, , i, i . . Основным источником этих радикалов является утечка электронов из дыхательной цепи митохондрий на участке коэнзим цитохром Ь, особенно при низкой концентрации АДФ . , , хлоропластов и эндоплазматического ретикулума Кулинский, . i, , детоксикация ксенобиотиков за счт цитохрома Р0, различные метаболические пути арахидоновой кислоты Владимиров, i . . УФсвет, радиация или температура . УФсвет может приводить к образованию синглетного кислорода и других АФК в коже. Атмосферные поллютанты, такие как 2, приводят к образованию радикалов и истощению антиоксидантов в бронхоальвеолярной жидкости, что приводит к респираторным заболеваниям. Сигаретный дым содержит миллимолярные количества свободных радикалов, связанных с другими токсинами. Различные ксенобиотики также являются причиной повреждения тканей, как следствия генерации свободных радикалов. К ним относятся параквот, парацетамол, блеомицин и антрациклин i . Основной свободный радикал, окисляющий биологические системы, супероксиданионрадикал , который находится в равновесии с протонированной формой гидроксильным радикалом Н . Супероксид нормальный бипродукт митохондриального дыхания и составляет около 1 , потреблнного митохондриями i . В тканях организма генерируется за счт одноэлектронного восстановления молекулярного кислорода ii, при неферментативном спонтанном самоокислении ряда химических соединений адреналин, флавиновые нуклеотиды, тиоловые компоненты и глюкоза, особенно при наличии в их составе металлов переменной валентности, таких как медь и железо Соколовский, , i, , как основной или побочный продукт при ферментативных окислительновосстановительных реакциях, протекающих в отсутствие Дубинина, , а также при так называемом дыхательном взрыве в процессе фагоцитоза Меныцикова, Зенков, . Концентрация в тканях невысока ЮПМ Кулинский, , в клетке его содержание незначительно пМ. В митохондриях же печени крысы содержится 0, ШМ а в митохондриях сердца 1, М , vi, . Таким образом, генерация митохондриями важный внутриклеточный источник радикалов кислорода.