Изменение поверхностных характеристик мембраны эритроцитов при встраивании липополисахаридов грамотрицательных бактерий

• Автор: Кабанов, Дмитрий Сергеевич
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 84 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1.Физикохимическая характеристика липополисахаридов грамотрицатсльных бактерий

1.1.1. Оспецифическая цепь Оантиген.

1.1.2. Состав и структура кора

1.1.3. ЛипидА.

1.1.4. Конформация мономеров эндотоксинов.

1.1.5. Роль температуры, катионов и среды в а фазовом переходе

липида А

1.2. Химический состав и заряд мембраны эритроцитов.

1.2.1. Молекулярная организация мембраны эритроцитов человека.

1.2.2. Заряд поверхности эритроцитов
1.3. Роль белков, фосфолипидов мембраны и заряда поверхности клетки при взаимодействии с ЛПС.
1.3.1. Специфическое взаимодействие ЛПС с мембраной эритроцитов.
1.3.2. Липиды как рецепторы эндотоксинов
1.4. Влияние встраивания ЛПС на физикохимические свойства мембраны эритроцитов человека.
1.4.1. Эластичность мембраны клеток при встраивании липида А
1.4.2. Влияние эндотоксинов на текучесть мембраны.
1.4.3. Эффекты ЛПС на морфологию мембраны эритроцитов.
1.4.4. Модификация заряда клеточной мембраны эндотоксинами
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объекты и методы исследования.
2.1. Определение хемотипа бактерий методом агглютинации клеток
клеток по Линдбергу.
2.2. Получение ЛПС из .
2.3. Определение чистоты препарата ЛПС
2.4. Определение содержания КДО в препаратах ЛПС по реакции с 2тиобарбитуровой кислотой i ., . .
2.5. Определение качественного состава ЛПС методом электрофореза по Крауссе .,
2.6. Определение содержания катионов металлов в ЛПС.
2.7. Получение флуоресцентных форм эндотоксинов.
2.8. Встраивание ЛПС в мембраны теней эритроцитов и нативных клеток.
2.9. Исследование содержания ЛПС.С7. и ЛПСу.в мембранах теней эритроцитов с помощью карбоцианового красителя.
2 Определение электрофоретической подвижности эритроцитов ЭФП.
2 Модификация мембраны эритроцитов ферментами.
2 Исследование способности полимиксина В взаимодействовать
с Ш1См.сар5., встроенным в мембрану эритроцитов
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Сравнительная характеристика ЛПС из и из ii i.
3.2. Исследование способности ЛИСм.сарх. и ЛПСе.соП к насыщению мембран эритроцитов человека
3.3. Влияние ЛПС на электроповерхностные характеристики эритроцитов
3.3.1. Исследование влияния ЛПС и ЛПС.с на заряд клеточной поверхности.
3.3.2. Исследование роли гидрофильного фрагмента ЛПС в изменении ЭФП эритроцитов при встраивании эндотоксинов
3.4. Влияние поверхностных белков и заряда мембраны эритроцитов на взаимодействие с эндотоксинами
3.5. Исследование способности полимиксина взаимодействовать с ЛПСдодо, встроенными в мембрану эритроцитов
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


ВВЕДЕНИЕ. Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Оспецифическая цепь Оантиген. ЛипидА. Конформация мономеров эндотоксинов. Химический состав и заряд мембраны эритроцитов. Молекулярная организация мембраны эритроцитов человека. Роль белков, фосфолипидов мембраны и заряда поверхности клетки при взаимодействии с ЛПС. Специфическое взаимодействие ЛПС с мембраной эритроцитов. Влияние встраивания ЛПС на физикохимические свойства мембраны эритроцитов человека. Влияние эндотоксинов на текучесть мембраны. Эффекты ЛПС на морфологию мембраны эритроцитов. Глава 2. Объекты и методы исследования. Линдбергу. Получение ЛПС из . Определение содержания КДО в препаратах ЛПС по реакции с 2тиобарбитуровой кислотой i . Определение качественного состава ЛПС методом электрофореза по Крауссе . Определение содержания катионов металлов в ЛПС. Получение флуоресцентных форм эндотоксинов. Встраивание ЛПС в мембраны теней эритроцитов и нативных клеток. Исследование содержания ЛПС. С7. ЛПСу. Определение электрофоретической подвижности эритроцитов ЭФП. Модификация мембраны эритроцитов ферментами. Ш1См. Глава 3. Сравнительная характеристика ЛПС из и из ii i. Исследование способности ЛИСм. ЛПСе. Исследование влияния ЛПС и ЛПС. ВЫВОДЫ. Актуальность проблемы. Взаимодействие липополисахаридов ЛПС, эндотоксинов грамотрицательных бактерий с клетками млекопитающих приводит к синтезу биологически активных соединений, избыточное высвобождение которых является причиной эндотоксинового шока. Статистические данные свидетельствуют о том, что эндотоксиновый шок занимает место в списке наиболее частых причин смертности людей. Высокий уровень смертности и развитие тяжелых осложнений при эндотоксиновом шоке связаны с отсутствием специфической терапии. Одним из перспективных направлений предупреждения эндотоксинового шока является применение ЛПС из ЛПСдьсдо. ЛПС на поверхности мембраны клетокмишеней, и тем самым проявлять антагонистическое действие. Эритроциты предегавляют преобладающую популяцию клеток крови и, в первую очередь, подвергаются действию эндотоксинов в кровотоке. Вовлечение клеток крови, особенно эритроцитов, в процессы, связанные с патологией кровеносной системы, обусловлено влиянием ЛПС на морфологию и эластичность мембраны, а также на заряд поверхности этих клеток. В процессе жизнедеятельности клетки, а также при различных патологических состояниях мембрана эритроцитов претерпевает биохимические изменения, способные оказывать влияние на взаимодействие с ЛПС Рязанцева с соавт. Сгеповая с соавт. Рязанцева с соавт. В кровеносном русле эритроциты с встроенными в мембрану молекулами ЛПС способны взаимодействовать с нейтрофилами, приводя к их активации . Очевидно, что события, развивающиеся на поверхности мембраны клеток крови после взаимодействия с эндотоксинами, определяются составом и физикохимическими свойствами встроившихся молекул ЛПС. ЛПС грамотрицательных бактерий различаются количеством остатков 2кетоЗдезоксиЭманнооктулозоновой кислоты КДО и остатков фосфорной кислоты . ЛПС. Кроме того, ЛПС обладают разной длиной кора и полисахаридного фрагмента . Способность эндотоксинов взаимодействовать с поверхностью клеток и вызывать большинство биологических ответов связана с гидрофобной частью ЛПС липидом А.