Изменение активности липазы из поджелудочной железы свиней и липазы из бактерии Pseudomonas fluorescens в комплексе с полиэлектролитами

• Автор: Каштиго, Татьяна Викторовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 112 с. : ил.

Содержание

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы.

Раздел 1.

1.1 Современные представления о липолитических ферментах

1.2 Липазы

1.3 Структурная организация липаз

1.4 Фермент субстратный комплекс

1.5 Кинетика липолиза

1.6 Влияние жирных кислот

1.7 Термолабильность ферментов
1.8 Зависимость активности ферментов от среды
1.9 Влияние неорганических солей на липолиз
Раздел 2.
2.1 Современные аспекты иммобилизации ферментов
2.2 Иммобилизованные ферменты
2.3 Методы иммобилизации ферментов
Глава 2. Материалы и методы
Раздел 1. Материалы
Раздел 2.Методы
Раздел 3 Статистическая обработка
Глава 3. Результаты собственных исследований
Раздел 3.1 Изучение влияния факторов среды на липазы из
различных источников
Раздел 3.2 Исследование влияния заряда полимерного окружения
на липазы из различных источников
Раздел 3.3 Изменение активности ферментов в комплексе с одним
полиэлектролитом и неорганическими солями
Раздел 3.4 Иммобилизация липазы из
в смесь из двух полиэлектролитов
Раздел 3.5 Иммобилизация липазы из в смесь
из двух полиэлектролитов
Вы воды
Рекомендации по использованию
Список литературы


Одними из наиболее широко использующихся ферментов являются липазы, которые относятся к третьему классу ферментов гидролазам и способны гидролизовать сложноэфирные связи в молекулах ряда липидов главным образом триглицеридов. Большой интерес представляет практическое использование липаз в пищевой и других отраслях промышленности. Липазы микроорганизмов в сочетании с другими ферментами применяются для биологической очистки сточных вод. Липазы, гидролизующие триглицериды с образованием глицерина и жирных кислот, входят в состав набора реактивов для определения содержания триглицеридов во всех биологических жидкостях7, , . Возрастающие масштабы использования липаз в биохимии и биотехнологии вызывают необходимость поиска эффективных продуцентов ферментов данной группы, в связи с чем в настоящей работе проводилось сравнение липаз из разных источников липазы из поджелудочной железы свиньи и бактериальной липазы из ,. Однако данных о регуляции ферментативной активности липаз в комплексах на основе двух противоположно заряженных синтетических полиэлектролитов до наших работ в литературе не было. Такие исследования позволяют глубже понять природу многих важных биохимических процессов, протекающих в живых системах, а также создавать новые материалы для биотехнологии и медицины. Целью данной работы являлось исследование влияния разнозаряженных полиэлектролитов и условий протекания каталитической реакции на активность липаз из различных источников, а также определение оптимальных условий иммобилизации липаз в полимерное окружение. Научная новизна. Впервые получены стабильные комплексы на основе липазы и двух противоположно заряженных полиэлектролитов, проявляющие повышенную каталитическую активность. Предложена модель формирования таких двух и трехкомпонентных комплексов. Изучено влияние знака заряда полиэлектролита на активность липаз из поджелудочной железы свиней и из бактерии . Проведено сравнительное изучение влияния полимерноионного окружения и др. и липазы из поджелудочной железы свиней. Впервые подобраны оптимальные условия для иммобилизации различных типов липаз в трехкомпонентные комплексы с полиэлектролитами. Практическая ценность работы. Полученные экспериментальные данные по иммобилизации липаз в комплексы с различными полиэлектролитами имеют практическую ценность для разработки новейших биохимических тестсистем и биотехнологических методов. Установленное влияние полимерного окружения на фермент позволяет использовать полиэлектролиты как аллостерические модуляторы активности, а также стабилизаторы ферментов. Сравнительное исследование активности липаз микробного и животного происхождения дат возможность выбора подходящего фермента и условий иммобилизации для определнного вида липазы, в целях экономии средств, при производстве и использовании препарата в различных отраслях промышленности. Результаты и основные научнометодические положения диссертации используются в лекционном курсе и лабораторном практикуме по курсу дисциплин Биохимия 3 курс ВБФ, Биоэнергетика. Энзимология, Кинетика и термодинамика ферментативных реакций и Биохимия мембран 4 курс ВБФ при подготовке специалистов высшей квалификации по специальности Биохимия в ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина. Положения выносимые на зашш. и липазы из поджелудочной железы свиней на основе разнозаряженных полиэлектролитов трехкомпонентные комплексы. Апробация работы. Основные материалы диссертации были доложены на Всероссийской научнопроизводственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии в Казани в г. Всероссийской научнотехнической конференции в Мурманске в г. IX Международной конференции vi x i i i, , на Международной учебнометодической и научнопрактической конференции, посвященной летию МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, Москва, г. Публикации. По материалам диссертации опубликованы 8 печатных работ, из них 5 статей и 3 тезисов докладов на российских и международных конференциях.