NO-продуцирующая способность тканей головного мозга в условиях острой гипоксии-ишемии

• Автор: Чайковская, Наталья Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 86 с. : 31 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Сгр.
1. Список сокращений
2. Введение
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Оксид азота и его регулирующая роль в биологических системах
1.2. Оксид азота и нервная система
1.3. Свободнорадикальное окисление липидов и оксид азота
1.4. Методы детектирования оксида азота
1.4.1. Динитрозильные комплексы жезеза (ДЭТК) и Б-нитрозотиолы
1.5. Фармакологическая коррекция тканевого уровня оксида азота
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Группы исследованных животных
2.2. Методы исследования
2.2.1. Метод определения NО-продуцирующей
способности тканей
2.2.2. Определение оксидативного гомеостаза
2.2.3. Морфологическое исследование ткани головного мозга
3.1. Изучение уровня N0 в ткани головного мозга в условиях гипоксии-ишемии у новорожденных крыс
3.2. Исследование уровня N0 в ткани головного мозга
взрослых животных
3.3 Оксидативно-антиоксидантные параметры крови крыс в
условиях острой гипоксии-ишемии
3.4. Морфологическое исследование ткани головного мозга

крыс в условиях острой гипоксии-ишемии
3.4.1. Микроскопическое исследование ткани головного мозга
3.4.2. Морфометрия ткани головного мозга крыс в условиях
острой гипоксии-ишемии
3.5. Сравнительная оценка уровня N0 в ткани мозга, СРОЛ параметров и морфологии крыс в условиях острой гипоксии-ишемии под влиянием иминобиотина и мексиданта
3.5.1. Изменение уровня N0 в тканях головного мозга в условиях острой гипоксии-ишемии и при введении антиоксиданта мексиданта и ингибитора ИО-сингазы иминобиотина
3.5.2. Изменение уровня ГПЛ, АОА в тканях головного мозга в условиях острой гипоксии-ишемии и при введении антиоксиданта мексиданта и ингибитора ИО-синтазы иминобиотина
3.5.3. Изменение уровня Цп и Тр в тканях головного мозга в условиях острой гипоксии-ишемии и при введении антиоксиданта мексиданта и ингибитора МО-синтазы иминобиотина
3.5.4. Изменение активности АОС Цп/Тр в тканях головного мозга в условиях острой гипоксии-ишемии и при введении антиоксиданта мексиданта и ингибитора МО-синтазы иминобиотина
3.5.5. Изменение морфометрии в условиях ишемии-гипоксии в ткани головного мозга и при введении антиоксиданта мексиданта и препарата иминобиотина
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ И ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ЛИТЕРАТУРА

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АОА - антиокислительная активность АО - антиоксидант АОС - антиоксидантная система АФК -а ктивные формы кислорода ГПЛ - гидроперекиси липидов
ДНКЖ - динитрозильные комплексы негемового железа
Fe-ДЭТК - железо - диэтилдитиокарбамат
ДЭТК - диэтилдитиокарбамат
МНКЖ - мононитрозильные комплексы железа
ОС - оксидативный стресс
ПОЛ - перекисное окисление липидов
СРОЛ - свободнорадикальное окисление липидов
ТР - трансферрин
ХЛ - хемилюминесценция
ЦП - церулоплазмин
ЭПР - электронный парамагнитный резонанс
N0 -оксид азота
NOS -NO-синтазы
eNOS -эндотелиальная NO-синтаза
iNOS - индуцибельная NO-синтаза
nNOS - нейрональная NO-синтаза
Мх - Мексидант
Нр - гипоксия
IB - иминобиотин
С - контроль

8- группа животных (гипоксия-ишемия), подвергшихся эфирному наркозу, оперативный разрез в области левой сонной артерии, перевязка левой сонной артерии, экспозиция в камере с 8% кислородной смесью в течение часа, забой (п=8)
2.2. Методы исследования
2.2.1 Метод определения NO-продуцирующей способности тканей
NO-продуцирующую способность тканей оценивали методом ЭПР-спектроскопии по количеству парамагнитных мононитрозильных комплексов железа с ДЭТК (МНКЖ-ДЭТК), образующихся в ткани при связывании N0 с его экзогенной ловушкой - комплексами Fe2+ с ДЭТК. Для улавливания оксида азота в тканях животных использовали его способность образовывать с Fe и диэтилдитиокарбаматом (ДЭТК + Fe) парамагнитные мононитрозильные комплексы железа (МНКЖ). Согласно разработанной методике (Ванин А.Ф., Налбандян P.M., 1965; Ванин А.Ф., 1998), животным в эксперименте внутрибрюшинно, подкожно или внутримышечно (в бедро) вводили цитратный комплекс Fe(FeS04-7Il20) в 0,2 мл физиологического раствора (молярное соотношение Ре:цитрат-1:5) в дозе 1-40 мг Fe на 1 кг веса, и 0,2 мл водного раствора ДЭТК + Fe-Na (500 мг/кг).
Ткани органов и кровь замораживали в жидком азоте, после чего в этих образцах регистрировали при 77К сигнал ЭПР на радиоспектрометре (РЭ 1306 (Россия) и Брукер (США)). Для оценки образующихся в тканях МНКЖ-ДЭТК + Fe и тем самым образующегося оксида азота использовали эталонный образец МНКЖ-ДЭТК + Fe в диметилсульфоксиде с известной концентрацией этих комплексов.
Ход анализа сводился к следующему:
1) Взвешивание животного