Гидролитические и окислительные ферменты обмена фенольных соединений растений

• Автор: Кунаева, Рауза Минлиахмедовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Алма-Ата
• Количество страниц: 290 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ .

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Глава I. ФЕНОЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И ИХ ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ

АКТИВНОСТЬ

1.1. Распространение фенольных соединений и

их значение .

1.2. Роль фенольных соединений в обмене

веществ растений .

1.3. Практическое значение фенольных соединений.

Глава П. ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ ПРЕВРАЩЕНИЯ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ПЛ. Ферментативные превращения фенольных

соединений микроорганизмами и растениями

П.2. Свойства гликозидаз .
П.З. Пероксидазы, их свойства и функции .
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Глава Ш. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Ш.1. Объекты исследования
Ш.2. Методы исследования .
Глава 1У. ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ КОМПЛЕКС КАТАБОЛИЗМА ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ПОЛЫНЕЙ
1У.1. Выделение, очистка, некоторые физикохимические свойства и динамика
3 гликозидаз полыней.
1У.2. Выделение, очистка, некоторые физикохимические свойства полифенолоксидазы полыней .
У.З. Функциональная активность полифенолок
сидазы полыней в динамике .
У.4. Выделение и очистка пероксидазы
полыней
У.5. Физикохимические свойства и динамика
пероксидазы полыней
Глава У. ФЕНОЛРАСЩЕПЛЯЮЩЙЕ ФЕРМЕНТЫ СПОРОВЫХ РАСТЕНИЙ
У.. Выбор селективных сред для выращивания i С бОЛЬШИМ ВЫХОДОМ
фенолрэсщепляющих ферментов
У.2. Выделение, очистка и некоторые свойства
гликозидаз i
Глава У. РАСЩЕПЛЕНИЕ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ФЕРМЕНТАМИ
РАСТЕНИЙ
У.. Расщепление фенольных соединений
ферментными препаратами полыней
У.2. Окисление кверцетина бесклеточным
экстрактом полыни метельчатой
У.З. Расщепление флороглюцина, протокатеховой кислоты и кемпферола бесклеточным
экстрактом полыни
У.4. Расщепление кофейной кислоты частично
очищенной пероксидазой .
Глава УП. РАСЩЕПЛЕНИЕ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ФЕРМЕНТАМИ
I
УП.. Расщепление рутина ферментами
i
УП.2. Окисление кверцетина ферментами
i .
УП.З. Расщепление гесперидина ферментами
i
УП.4. Расщепление фенольного комплекса полыней ферментами i 9 Глава УШ. ИММОБИЛИЗАЦИЯ ПЕРОКСИДАЗЫ ПОЛЫНИ НА
НЕРАСТВОРИМЫХ НОСИТЕЛЯХ УШ.1. Стабилизация пероксидазы полыни, ковалентно связанной с сефарозой
УШ.2. Иммобилизация пероксидазы полыни на
биогеле Р0 .
УШ.З. Иммобилизация пероксидазы полыни на
иммуносорбенте
УШ.4. Окислительные превращения фенольных соединений пероксидазой полыни, иммобилизованной на сефарозе .
УШ.5. Применение пероксидазы для приготовления вин кахетинского типа
УШ.6. Биологическая активность полифенольных
соединений полыней
ЗАКЛЮЧЕНИЕ .
ОСНОВНЫЕ ВЫВОДЫ ДИССЕРТАЦИИ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


И.Литвиненко показано, что флавоноидные гликозиды активно гидролизуются очищенными ферментными препаратами из грибов i v, i i, i . Ферментный препарат из i очень быстро 5 минут отщепляет от флавоноидных гликозидов аДглюкозу, несколько медленнее Дглюкозу, а также ос арабинозу и Дгалактозу. Рутин расщепляется дрожжеподобным грибом iii v. i с образованием флороглюцина, протокатеховой кислоты и 2протокатехоилфлороглюцинкэрбоновой кислоты наi, i, . Вестлейк и Симпсон определили условия культивирования i v , способствующие накоплению в культуральной жидкости ферментов, разрушающих рутин, и установили их свойства , i, . В дальнейших работах этих же авторов приводятся условия выделения фермента кверцетиназы из культуральной жидкости i v , очистка, физикохимическая характеристика, установлена молекулярная масса ЭТОГО фермента , i, i, Ока, i, . Таким образом, при изучении механизма расщепления флавоноидов микроорганизмами было установлено два основных пути превращения один путь это расщепление гетероциклического кольца, ведущее к образованию СО и двух замещенных бензойных кислот, представляющих остатки колец А и В. Такая картина расцепления наблюдалась в работах , , когда рутин под действием ферментов из i . Затем кверцетин окислялся с образованием 2протокатехоилфлороглюцинкарбоновой кислоты и СО2. Другой путь окислительное расщепление кольца А. Бесклеточный экстракт из . С, С, С и 53,4диоксифенил4окси3кетовалеролактона. Цит. Т.А. Жанаевой, . К настоящему времени в мировой литературе накопились сведения, указывающие на то, что высшие растения токе способны рас щеплять фенольные соединения. Первое экспериментальное доказа тельство способности высших растений к глубокому расщеплению флавоноидов вплоть до разрыва бензойьных ядер А и В было получено М. Н.Запрометовым в г. В опытах с введением в побеги чайного растения меченых С катехинов обнаружили, что они после их введения подвергаются значительным превращениям Запрометов, Запрометов, Бухлаева, . Сейчас имеется уже достаточно данных о промежуточных продуктах превращения флавоноидов и ферментах, катализирующих эти превращения в высших растениях. Работами С. В.Дурмишидзе и сотр. Дурмишидзе,. Ферментативное расщепление рутина в гомогенатах листьев гречихи v изучали Н. Ногучи и С. Мори. Работами последних лет установлено, что ферментами, ответственными за расщепление флавоноидов, являются пероксидазы , , i, . , , , . Нероксидаза из проростков сои и нута окисляла 4,2,4триоксихалкон с образованием соответствующего дигидрофлавонола и гидратированного аурона , i , . Ферментный препарат из ii расщеплял 5,7,3,4тетрагидроксифлаванон70гликозид с образованием 5,7дигидроксихромон Работами В. Г.Минаевой, М. Н.Запрометова, Т. А.Жанаевой показано расщепление флавонолов бескле точным экстрактом володушки . Установлены и идентифицированы промежуточные продукты расщепления. Изучены ферменты, участвующие в расщеплении флавонолов. Был сделан вывод, что ферментам, ответственным за начальные этапы расщепления в фер ментативном комплексе володушки, является пероксидаза Минаева, Запрометов, Жанаева, Минаева, Запрометов, . П.2. Общим свойством всех гидролитических ферментов является то, что они катализируют реакции гидролиза, расщепления более сложных соединений на более простые с присоединением воды. Специфичность гликозидаз определяется преимущественно типом и формой сахара ос, 3, участвующего в образовании гликозидной связи своим полуацетальным гидроксилом. Природа несахарного компонента гликозида агликона также определяет специфичность соединения. В зависимости от вида сахара, вовлеченного в образование гликозидной связи, различают гликозидазы, галактозидазы и т.