Гемоглобины человека: иммуннобиохимическая характеристика и медико-биологическое значение

• Автор: Кривенцов, Юрий Алексеевич
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 230 с. : 36 ил.

1.1. Основы эритропоэза человека

1.2. Общие свойства гемоглобинов

1.2.1. Структурная организация молекулы гемоглобина

1.2.2. Физикохимические свойства гемоглобина

1.2.3. Транспортнодыхательная функция.

1.3 Гетерогенность системы гемоглобина.

1.3.1. Принципы классификации гемоглобинов.

1.3.2. Характеристика генотипов гемоглобина

1.3.3. Эволюция гемоглобинов.

1.4. Клиникодиагностическое значение гемоглобинов

1.4.1. Нормальные вариации продукции гемоглобинов

1.4.2. Изменение концентрации гемоглобинов при патологических состояниях
1.5. Методы определения гемоглобинов
Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика и объем материала исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Методы выделения и очистки
2.2.2. Получение и обработка антисывороток.
2.2.3. Методы индикации белков.
2.2.4. Методы статистического анализа
1
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ ПОПОЛНЕНИЕ СВЕДЕНИЙ ПО ФИЗИКО
ХИМИЧЕСКИМ СВОЙСТВАМ НЬА,, НЬА2, НЬЕ И НЬР . Изучение относительной электрофоретической подвижности НЬА,,НЬА2, НЬЕ и НЬР
Изучение относительной электрофоретической подвижности ЬА, НЬА2,ЬЕ и ЬР в агарозном геле.
Изучение относительной электрофоретической подвижности ЬД, ЬА2, НЬЕ и НЬР в ПААГ.
Изучение воздействия детергентов на гемоглобины.
Влияние детергентов на электрофоретическую подвижность гемоглобинов.
Гельпрон и кающая хрома тография на 0 с бихроматом калия.
Сравнительный анализ основных физикохимических
свойств НЬА, НЬА2, НЬЕ и НЬР.
РАЗРАБОТКА ОПТИМАЛЬНЫХ СПОСОБОВ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ ОСНОВНЫХ ТИПОВ ГЕМОГЛОБИНА
ЧЕЛОВЕКА .
Выделение и очистка гемоглобина А
Выделение и очистка гемоглобина А
Выделение и очистка фетального гемоглобина
Выделение и очистка эмбрионального гемоглобина
Сравнительная характеристика качества новых способов
выделения и очистки.
МОДЕЛИРОВАНИЕ ИММУНОХИМИЧЕСКИХ ТЕСТСИСТЕМ
Моделирование иммунохимической тестсистемы на НЬЕ Моделирование иммунохимической тестсистемы на НЬР.
5.3. Моделирование иммунохимических тестсистем на НЬА и
наНЬАз
Глава 6 РАЗРАБОТКА СПОСОБОВ КОЛИЧЕСТВЕНЮГО АНАЛИЗА ОСНОВНЫХ ТИПОВ ГЕМОГЛОБИНА ЧЕЛОВЕКА
6.1. Разработка способа количественного анализа ЬБ
6.2. Разработка способа количественного анализа НЬР
6.3. Разработка способа количественного анализа НЬАг.
6.4. Разработка способа количественного анализа НЬА, и новой
схемы количественной оценки гемоглобинового профиля по основным типам гемоглобина
Глава 7 ИММУНОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРОДУКЦИИ ЭМ
БРИОНАЛЬНОГО И ФЕТАЛЬНОГО ГЕМОГЛОБИНОВ В РАННЕМ ЭМБРИОГЕНЕЗЕ ЧЕЛОВЕКА.
7.1. Характеристика и обработка материала.
7.2. Результаты и их анализ.
Глава 8 ИЗУЧЕНИЕ КЛИНИКОДИАГНОСТИЧЕСКОГО УЧЕ
НИЯ ИММУНОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ГЕМОГЛОБИНОВОГО ПРОФИЛЯ
8.1. Обоснование клинического спектра апробации иммунохимических тестов на генотипы гемоглобина
8.2. Иммунохимичсский анализ содержания эмбрионального и
фетального гемоглобинов в крови больных с онкогематологичсской патологией.
8.2.1. Характеристика и обработка клинического материала
8.2.2. Результаты и их анализ.
8.3. Иммунохимический анализ содержания фетального и эм
брионального гемоглобинов в крови новорожденных детей
в норме и при патологии.
8.3.1. Определение фетального гемоглобина.
8.3.2. Определение эмбрионального гемоглобина
8.3.3. Резюме.
8.4. Иммунохимический анализ фетального гемоглобина у наркологических больных.
8.4.1. Характеристика и обработка клинического материала
8.4.2. Результаты и их анализ
8.5. Оценка диагностической эффективности иммунохимиче
ских тестов на НЬР и .
Глава 9 ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕ1ДАЦИИ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Кроме эритропоэтина, к ним относятся тромбопоэтин, 3 различных миелоидных колониестимулируюших фактора ГКСФ, ГМКСФ и МКСФ в гранулоцитарномоноцитарной линии и интерлейкины, которые не только активируют лимфоидную систему, но и модулируют скорость пролиферации эритроидных и миелоидных предшественников 3 3 5. Доказана способность андрогенов увеличивать интенсивность эритропоэза женские половые гормоны угнетают эритропоэз, но механизм этого влияния остается пока неясным 2. Синтез гема подвержен регуляции по принципу обратной связи сам гем является аллостерическим ингибитором 5аминолевилинатсинтетазы фермента, катализирующего первую, лимитирующую реакцию синтеза гема 7 9 . Гемоглобин НЬ от греч. Относится к сложным белкам хромопротеидам. В организме НЬ следующие выполняет биологические функции транспортнодыхательную о которой речь пойдет ниже и буферную гемоглобин играет существенную роль в поддержании кислотноосновного равновесия крови. Буферная система, создаваемая гемоглобином, способствует сохранению крови в определенных пределах гемоглобиновый буфер является самым мощным буфером крови около от общей буферной емкости крови 4 8. Гемоглобин можно считать своего рода модельным белком, структура, свойства и функции которого наиболее полно изучены по сравнению с другими белками на протяжении последних лет. Десятки лет исследований гемоглобина во многих лабораториях мира привели к значительному прогрессу в описании и понимании физических, химических и биологических аспектов его функционирования . Американский физик Хопфилд назвал его атомом водорода современной биохимии, имея в виду, что изучение гемоглобина сыграло в биохимии ту же роль, что и изучение атома водорода в физике. Гемоглобин называют также почетным ферментом, поскольку исследования его структуры в статике и динамике позволили значительно продвинуться в понимании механизмов функционирования ферментов 3. Пространственная структура молекулы гемоглобина в деталях изучена методом рентгеноструктурного анализа еще в конце х годов XX века главным образом благодаря работам английского биофизика Макса Перутца 3. Основные типы гемоглобина см. Комплекс, составленный из одного гема и одной полипептидной глобиновой цепи называется Сведберговой единицей. Следовательно, молекула гемоглобина состоит из четырех Сведберговых единиц. Молекулярная масса гемоглобина А равна 8 Д, следовательно, на одну Сведбергову единицу полагается по 5 Д 7 2. На долю гема приходится 4 массы молекулы гемоглобина, а глобина 7 2. Гем протогем тетрапиррольная ароматическая структура протопорфирина IX, в состав которого входит ион Ре2. На долю гема приходится 4 от массы гемоглобина. К тетрапиррольному кольцу гема присоединены 4 метильные, 2 винильные и 2 пропионатные боковые цепи. БРзгибридные атомы С и лэлсктронной системы порфиринового лиганда обеспечивают его плоскостную структуру. Тем не менее, кристаллографические исследования свидетельствуют, что порфириновый остов деформируется и образует куполообразные или гофрированные структуры 8 8 9. Гем является простетической группой гемсодержащих белков гемоглобина, миоглобина цитохромов, пероксидазы, катал азы и др Именно наличие гема в этих белках обеспечивает их главные функции связывание миоглобин и гемоглобин и транспорт кислорода гемоглобин, участие в цепи переноса электронов цитохромы, восстановление кислорода до воды цитохромоксидаза, микросомальное окисление цитохром Рзо разложение перекисей каталаза и пероксидаза и др 3 9. Присутствие иона металла железо, медь, магний и др. Выделяют множество типов гемов, различающихся структурой порфирипового ядра, наиболее распространенными из которых являются гемы типов а, Ь, с 3. Первым, и наиболее хорошо изученным гемом был гем Ь. Протопорфирин IX является его ароматическим планарным лигандом. Поэтому часто гем Ь часто называют Бепротопорфирином, протогемом или просто гемом 0 0 2. Строение глобина. Белковый компонент гемоглобина глобин принадлежит к группе гистонов, следовательно, характеризуется очень высоким содержанием остатков основной кислоты гистидина.