Клонирование и характеристика генов, отвечающих за формирование соцветия представителя сложноцветных - хризантемы

• Автор: Щенникова, Анна Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 143 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ЖИЗНЕННЫЙ ЦИКЛ РАСТЕНИЯ. ИНИЦИАЦИЯ ЦВЕТЕНИЯ.

1.1.1. Цветковое разнообразие. Цветок . i и основные стадии его развития. Клеточная дифференциация

1.1.2. Переход растения к репродуктивной стадии развития

1.2. МОДЕЛЬ ФОРМИРОВАНИЯ ЦВЕТКА

1.3. ФАКТОРЫ ТРАНСКРИПЦИИ РАСТЕНИЙ. СЕМЕЙСТВО.

1.4. МОЛЕКУЛЯРНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ РАЗВИТИЯ ЦВЕТКА.

1.4.1. Генетическая регуляция формирования и развития меристемы побегав. i

1.4.2. Определение идентичности цветковой меристемы.
1.4.3. Околоцветник.
1.4.4. В активность. Лепестки и тычинки.
1.4.5. С активность. Гинецей
1.4.6. активность. Развитие семязачатка.
1.4.7. Е активность. Модель квартет развития цветка.
1.5. МОДЕЛЬ И ДРУГИЕ ВИДЫ ЦВЕТКОВЫХ РАСТЕНИЙ.
1.6. ГЕНЕТИКА ЭВОЛЮЦИИ МОРФОЛОГИИ РАСТЕНИЙ.
1.7. СЛОЖНОЦВЕТНЫЕ.
П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
II. 1. Бактериальные и дрожжевые штаммы. Растения
П.2. Выделение суммарной РНК из ткани соцветий и цветков хризантемы
.3. кДНК библиотека из соцветий хризантемы.
П.4. Выделение плазмидной ДНК из . i и . i
П.5. Секвенирование. Сравнительный анализ полученных последовательностей с
последовательностями из банка данных.
П.6. I i гибридизация тканей соцветия хризантемы со специфичными пробами.
П.7. Получение кассет экспрессии генов хризантемы и петунии.
П.8. Получение агробактсриального штамма с бинарным вектором и
трансформация им растений
П.9. Выделение геномной ДНК из растительной ткани
П. . Трансформация дрожжевого штамма 4 плазмидной ДНК и анализ кДНК
библиотеки и белков хризантемы и петунии в дрожжевой
системе
П. . Выделение плазмидной ДНК из дрожжевых колоний и трансформация ею Е.
Приложения.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ
Ш.1. Получение и гибридизационный анализ кДНК библиотеки. Анализ
последовательностей выделенных кДНК генов хризантемы
Ш.2. Анализ паттерна экспрессии генов 1, , 8 и .
Ш.З. Функциональный анализ генов , и 2.
Ш.4. Изучение бслокбслковых взаимодействий и белков в
двухгибридной дрожжевой 4 системе.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
БЛАГОДАРНОСТИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Рис. . АМП и АМК имеют похожие размеры мснсс 0 мкм в диаметре и состоят из более чем сотни клеток. АМП покрытосеменных, в частности . Группа увеличенных и высоковакуолизированных клеток на верхушке АМП составляет центральную зону ЦЗ это резервуар плюрипотентных стеблевых клеток. ЦЗ окружена периферийной зоной ПЗ, состоящей из маленьких, плотно расположенных клеток. Под ЦЗ лежит так называемая рибзона РЗ большие вакуолизированные клетки, которые составляют сердцевину меристемы и основную массу стебля. Клетки ЦЗ по мере деления пополняют пул клеток ПЗ, участвующих в органогенезе. Таким образом, клетки ПЗ более ограничены в потенциале своего развития, нежели клетки ЦЗ, и ПЗ представляет собой переходную область АМП, где потомки плюрипотентных клеток ЦЗ обретают определенную судьбу. Дополнительный уровень организации АМП туника и корпус основан на разных паттернах клеточного деления рис. Поверхностный рост осуществляется посредством антиклинального перпендикулярно плоскости меристемы деления клеток туники, внутренний рост достигается делением клеток корпуса во всех направлениях. Туника состоит из 1 и 2 одноклеточных слоев. Корпус представляет собой группу 3 клеток, лежащих под туникой. Слой 1 предшественник эпидермиса побегов, листьев и цветков, 2 пополняет мезодермальные и зародышевые клетки пыльцы и семязачатков, 3 формирует сосудистую систему стебля и сердцевину листьев и цветковых органов. Надо отметить, что фиксированного паттерна развития АМП нет, клетки одного слоя частично вторгаются на чужую территорию, не вызывая какихлибо видимых дефектов развития. Таким образом, судьба клеток АМП определяется скорее их местоположением, нежели клональным происхождением. Клетки сообщаются друг с другом внутри своего слоя и в прилегающих слоях, оценивая свои относительные позиции в меристеме и соответствующую им роль. Рис. , Схематическое изображение организации АМП. А Радиальные домены. Латеральные органы формируются из клеток ПЗ, в то время как клетки РЗ образуют сердцевину стебля. ЦЗ являет собой резервуар стеблевых клеток, пополняющих расходуемый на органогенез пул клеток ПЗ и РЗ. В Клонально различимые клеточные слои. Эпидермальный 1 и субэпидсрмальный 2 слои делятся антиклинально и вместе представляют тунику. Клеточный слой 3 составляет корпус, клетки которого делятся во всех плоскостях. На вегетативной стадии развития АМП . Листья очередные, без прилистников, как и стебель, покрыты характерными волосками. В процессе перехода растения к репродуктивному развитию стебель удлиняется, в пазухах листьев формируются вторичные АМП, и на флангах первичных и вторичных репродуктивных АМП они же МС появляются ЦМ рис. ЦМ представляет собой небольшую сферообразную группу клеток, производящую четыре концентрических круга латеральных органов первый круг чашелистики, второй лепестки, третий тычинки, четвертый плодолистики. Формируя гинецей, ЦМ завершает свое развитие. Структурно ЦМ повторяет АМП. Она также состоит из туники и корпуса и делится на три клеточные зоны. Это свидетельствует в пользу идеи о том, что цветы представляют собой измененные побеги, а цветковые органы модифицированные листья, то есть побеги и цветки являются гомологичными структурами. Несмотря на одну структурную матрицу, АМП и ЦМ имеют существенные отличия. Одно из главных различий тип и организация формируемых ими латеральных структур. АМП генерирует листья по спирали, в то время как ЦМ образует органы концентрическим образом. Второе важное отличие АМП недстерминирована и растет неограниченно, в то время как ЦМ детерминирована и завершает свое формирование с появлением гинецея. Резервуар стеблевых клеток в ЦМ, таким образом, временный, и активность его прекращается на соответствующей стадии развития. Подобно поддержанию пула стеблевых клеток в АМП, угнетение активности стеблевых клеток в ЦМ является необходимым условием нормального развития растения и находится под строгим генетическим контролем.