Изучение функциональной активности глюкозаминилмурамоилдипептида на опухолевых клетках

• Автор: Петрова, Елена Эдуардовна
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 117 с. : ил

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Противоопухолевая

активность мурамилпептидов.

I. Противоопухолевая активность МП i vi и i viv.

Ы.МДПиГМДП

1.2. Аналоги с модифицированной ацетилмурамовой кислотой

1.3. Аналоги с заменой остатка атанина

1.4. Аналоги с модификацией остатка изоглутамина

1.5. Инкапсулированные МП

II. Механизм противоопухолевог о действия МП

II. 1. Активация макрофагов

И.2. Увеличение активности нормальных киллеров
II.3.овышснис активности нейтрофилов, лимфоцитов и эндотелиальных клеток
И.4. Индукция биосинтеза цитокинов
И.5. Прямое действие на опухолевые клетки
III. Применение МП в комплексной терапии
III. 1. Задачи комплексной терапии
1.2. Комбинация МПхимиопрепарат
1.3. Комбинация МПцитокин
1.4. Комбинация МПлипополисахарид
IV. Использование МП в клинике
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ГЛАВА 2. Результаты и обсуждение
2.1. ГМДП индуцирует секрецию , который повышает чувствительность популяции клеток меланомы к восприятию сиг нала ГМДП
2.2. увеличивает число сайтов специфического связывания ГМДП на
клегках меланомы
2.3. Демаскирование как механизм увеличения числа сайтов специфического связывания ГМДП на поверхности клегок меланомы
2.4. Влияние ГМДП и на жизнеспособность клеток резистентных
и чувствительных клеточных линий i vi
2.4.1. Влияние ГМДП на цитотоксическое действие в отношении клеток
линии 9
2.4.2. Цитотоксическое действие аналогов ГМДП и Акт ,
на клетки линии 9
2.4.3. Влияние ГМДП на цитотоксический эффект цисплатина и доксорубицина в отношении клеток линии 9
2.4.4. Влияние ГМДП на цитотоксическое действие комбинаций с цитостатиками проявленное в отношении клеток линии 9
2.4.5. Влияние аналогов ГМДП на цитотоксический эффект в
присутствии актиномицина в отношении клеток линии 9
2.4.6. Влияние ГМДП на цитотоксический эффект комбинаций цисплатин
и доксорубицин в отношении клеток линии 9
2.4.7. Влияние комбинаций ГМДП, цисплатина и на жизнеспособность трансформированных клеток чувствительных линий человека и мыши
2.4.8. Влияние ГМДП и на жизнеспособность резистентных
клеточных линий i vi
2.4.9. Влияние комбинаций препаратов ГМД, и цисплатина на
опухолевые клетки онкологических больных
2.4 Влияние комбинации препаратов ГМДП, цисплатин и на
нормальные клетки
2.4 Влияние комбинаций препаратов ГМДП, доксорубицин и на жизнеспособность нормальных клеток и трансформированных клеток
чувствительных линий человека и мыши
ГЛАВА 3. Экспериментальная часть
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Срывы в работе иммунной системы ведут к развитию злокачественных опухолей. Поэтому одним из направлений профилактики и лечения онкологических заболеваний является использование препаратов, способных нормализовать иммунный статус организма. К таким препаратам относятся компоненты бактериальных стенок мурамиллептиды, которые вызывают нсспецифическую стимуляцию клеток иммунной системы 1. Мурамилпептиды представляют собой фрагменты пептидогликана муреина главного структурного компонента клеточной стенки всех бактерий. Это макромолекула, в состав которой входят линейные полисахаридные цепи, которые соединены через лактильные остатки мурамовой кислоты короткими олигопептидными фрагментами. В результате формируется жесткий двумерный каркас. Эгот каркас окружает бактериальную клетку и обеспечивает ей защиту от физических воздействий, в том числе от осмотического тока при попадании в гипотоническую среду. У остальных родов бактерий мурамовая кислота ацетилирована. ЫацетилмурамоилЬаланилОизоглутамин мурамилдипептид МДП, открытый группой французких исследователей во главе с Ледерером минимальная структура, обладающая иммуномодулирующей активностью 2. Химический синтез МДП впервые был осуществлен во Франции в году 3 и чуть позже в Японии 4. Это положило начало получению и интенсивному изучению аналогов МДП. В настоящее время описано несколько сотен синтетических аналогов МДП, обладающих выраженным иммуностимулирующим действием, и проведены обширные исследования по изучению их влияния на иммунный ответ 5. Первые даные о противоопухолевой активности соединений, впослсдствие казавшихся мурамилпептидами, появились в конце х годов. При ферментативном идролизе одного из штаммов i i болгарскими учеными был получен
препарат бластолизин, проявляющий выраженный противоопухолевый эффект 9, . Этот эффект заключался, в частности, в индуцированном бластолизином избирательном некрозе опухолевой ткани у мышей с саркомой 0. Примечательно, что бластолизин некротизировал опухоль, не угнетая гемопоэз и проявляя низкую токсичность в отношение организма хозяина. Бластолизин проявлял противоопухолевую активность при введении в дозах 0 мкгмышь 9. Дальнейшие исследования показали, что специфическая противоопухолевая активность препарата обусловлена присутствием в гидролизате нейтральной гликопептидной фракции, состоящей из смеси полимеров гомологичного строения с молекулярной массой , и 0 дальтон. Было показано, что углеводная часть активного компонента бластолизина представляет собой дисахарид ацетилглюкозаминилр4Мацетилмурамовую кислоту и его олигомеры. Структура пептидной части не была полностью выяснена, по по мотивам компонентов бласголизина была синтезирована серия соединений с короткой пептидной частью, которые обладали выраженной иммуиомодулирующей и противоопухолевой активностью 8,. Наиболее изученным из этих соединений является ГМДП ацетилглюкозаминилр4ацети лмурамоилаланилизоглул амин. I. Противоопухолевая активность МП i vi и i viv. Сам МДП не оказывает прямого цитотоксического действия на опухолевые клетки. Его противоопухолевое действие определяется индукцией цитотоксической активности макрофагов. МДП с высокой эффективностью активирует мышиные и человеческие макрофаги i vi , , однако i viv противоопухолевая активность МДП низка. Свободная форма МДП практически не активна 1, . Так однократное введение МДП в дозе мкгмышь через недели после переноса опухолевых клеток не ингибировало рост неметастазирующей фибросаркомы МС у сингенных мышей . Четырехнедельный курс МДП введение 0 мкгмышь 2 разанеделю, начатый через 3 дня после оперативного удаления основной опухоли, не ингибировал рост легочных метастазов меланомы 6. Все животные погибли одновременно с контрольными к дню 1. Введение 0 мкгмышь МДП на 3, 7, и день после переноса опухолевых клеток не подавляло рост метастазов в печени меланомы 1 9 и ретикулярной саркомы М . МДП быстро в течение часа после парентерального введения выводился из организма , , этого времени было недостаточно для индукции цитотоксических свойств макрофагов 1.