Пронуклеозидные ингибиторы репликации ВИЧ и вируса герпеса: стабильность и превращения в культурах клеток и в животных

• Автор: Карпенко, Инна Леонидовна
• Шифр специальности: 03.00.03, 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 149 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений.

Введение

Обзор литературы

I. Депоформы модифицированных нуклеозидов ингибиторов репликации ВИЧ

Производные цикло 5 Окарбоксикислот

Производные бкциклсшкарбоксикислоты

Производные амжокиспот.

ЗОпроизводные на основе алифатических жирных кислот.

3,0огидроксиалкил производные и ЗТС.

И. Модифицированные по фосфатному остатку аналоги нуклеотидов как депо формы аналогов нуклеозидов и соответствующих 5монофосфатов.
Депоформы с транспортерными заместителями.
Конъюгаты аналогов на основе
эфиров жирных кислот.
Депоформы на основе конъюгатов
Депоформы на основе фосфодиамидов.
Депоформы на основе фосфотриэфиров
Депоформы на основе фосфоамидатов.
р, 5 Нфосфонаты модифицированных нуклеозидов.
ЗРфосфат
Депоформы .
Депоформы нуклеотидов на основе iРОМ
и аналогичныхмаскирующих групп.
Депоформы на основе тиазамещенных маскирующих групп.
Депоформы на основе арилоксифосфоамидатов РРА.
Депоформы на основе циклосалигениловых производных.
р, III. Депоформы фосфонатных аналогов ациклических нуклеозидов.
Депоформа РМЕА на основе моно и диси1кил и арил эфиров
Депоформы ациклических нуклеотидов на основе
i и i производных
РРА депоформы ациклических нуклеотидов
IV. Депоформы ациклических аналогов гуанозина, обладающие
антиV активностью.
i депоформы ациклических аналогов гуанозина
депоформы ациклических аналогов гуанозина
РРА производные.
Депоформы АСУ на основе фосфолипидов
Депоформы V.
V. Пути метаболизма депоформ модифицированных иуклеозидов и нуклеотидов
Материалы и методы
Реактивы и препараты.
Клеточные культур
Приборы и методы анализа.
Определения гидролитической стабильности.
Изучение метаболизма б3 и 63 на культуре клеток
Изучение метаболизма 83ННрАСУ на культуре клеток.
Изучение превращений и его производных в культуре клеток
Изучение накопления и превращения 63Ii и
63 на животных.
Превращение производных в органах мыши
Статистическая обработка результатов измерений.
Результаты и обсуждение
I. Стабильность и превращения
Стабильность 63Н в , сыворотке крови человека,
культуральной среде, лизате клеток и гомогенате печени мышей.
Метаболизм б3 в культуре клеток
Определение кинетических параметров реакции гидролиза
и катализируемого 5 нуклеотидазой
Превращения б3Н в крови и органах мыши
Превращения в крови кролика.
И. Стабильность и метаболизм фосфонатных эфиров V.
Определение антивирусной активности, гидролитической стабильности
и направления химического и ферментативного гидролиза
. Метаболизм 83Vв культуре клеток V.
Определение кинетических параметров реакции гидролиза
V и V, катализируемого 5нуклеотидазой.
III. Метаболизм 5фосфатных производных 4тио5этил2дезоксиуридина
Антивирусная активность, стабильность и возможные
пути метаболизма 4,тио5этип2,дезоксиуридина и его эфиров
Метаболизм 5 этоксикарбонилфосфоната
в культуре клеток V, инфицированных V1.
Превращения 5 этоксикарбонилфосфоната i viv
Список литературы


Все препараты нуклеозидной природы после проникновения в клетки должны пройти каскад фосфорилирования до соответствующих 5трифосфатов, чтобы стать субстратами обратной траискриптазы вируса и включиться в Зкомец растущей вирусной ДНК. ОТ вируса. Скорость образования фосфорилированных форм аналогов нуклеозидов зависит от структуры аналога 6. Так, первая стадия фосфорилирования А2Т, первого утвержденного для клинического применения антиВИЧ препарата, проходит со скоростью, равной скорости фосфорилирования природных нуклеозидов, в то время как скорость второй стадии составляет примерно 0,3 по сравнению с фосфорилированием природного с1ММР. ЦТМР, в то время как вторая стадия фосфорилирования до ТБР высоко эффективна. Накопление АСТМР в клетках является одной из причин токсичности препарата ингибирует клеточные тимидин и тимидилаткиназы, что приводит к дисбалансу в соотношениях сПЧТР, понижает активность некоторых клеточных ферментов, включая 35 экзонуклеазу, играющую важную роль в репарации ДНК 8, 9. Кроме того, токсичность А2Т связана с . Для улучшения терапевтических характеристик препаратов нуклеозидной природы была выработана стратегия создания депоформ нуклеозидов пронуклеозиды или нуклеотидов пронуклеотиды 2. Депоформы это фармакологически неактивные соединения, претерпевающие после проникновения в клетки химическую или ферментативную трансформацию с образованием фармакологически активной формы. Депоформы аналогов нуклеозидов должны иметь высокую антивирусную активность при низкой токсичности, улучшенные био доступность и фармакокинетические характеристики, а также пролонгированное действие по сравнению с соответствующими аналогами нуклеозидов. Дизайн депоформ нуклеотидов пронуклеотиды направлен на создание таких форм аналогов с ЫМР, которые должны быть стабильны в плазме крови, но после проникновения в клетки химически или ферментативно превращаться в аналоги ММРб. Такой подход позволит сократить путь превращения аналога нуклеозида в соответствующий с1МТР и избежать первой, наиболее неэффективной стадии кинирования для большинства аналогов нуклеозидов. Применение 5монофосфатов аналогов нуклеозидов невозможно изза их высокой лабильности в плазме крови и низкой способности заряженных соединений к проникновению в клетку. В разделах 1. В разделах 3 и 4 рассматриваются возможные депоформы ациклических аналогов нуклеотидов и нуклеозидов. В разделе 5 рассмотрены пути метаболизма некоторых существующих антивирусных препаратов и их депоформ. I. Депоформы модифицированных нуклеозидов ингибиторов репликации ВИЧ. Большинство опубликованных в литературе работ посвящено созданию депоформ А2Т, первому антиВИЧ препарату, одобренному в США для лечения ВИЧинфекции. Это связано, вопервых, с тем, что, несмотря на выраженную токсичность, А2Т остается наиболее применяемым препаратом для лечения ВИЧинфицированных людей и входит как обязательный компонент в составе коктейлей. Вовторых, время выведения препарата из организма составляет около одного часа, что вызывает необходимость частого приема лекарства. Улучшение характеристик препарата, а именно понижение токсичности и увеличение времени жизни препарата в организме является актуальной задачей. Этерификация 5оксигруппы один из методов увеличения биодоступности препарата, увеличения времени жизни в организме и улучшение фармакологических свойств по сравнению с 8. Далее будут рассмотрены наиболее перспективные в плане создания на их основе лекарственных препаратов депо формы , сТ и БЬТ. Производные 5Окарбоксиэфнров А7Л Т, ИГ. Описанные в литературе депоформы , б4Т, БЬТ включают 3карбоксикислоты, 1 адамантанкарбоксикислоту, производные бицикламкарбоксикислоты, Оацетилсалициловую кислоту и производные полисахаридов производные Ьаминокислот, 1,4дигидро1метилЗпиридинилкарбоксикислоты, аналоги алифатических жирных кислот, не содержащие гетероатомы стеариновая кислота или содержащие гетероатомы миристиловая кислота аналоги ненасыщенных жирных кислот, содержащие углеводородные линкеры ретиноловая кислота производные 50согидроксиалкил и ряд других , .