Анализ ассоциации полиморфизма генов "сосудистой системы" и "эндотелиальной дисфункции" с развитием преэклампсии

• Автор: Демин, Григорий Сергеевич
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 202 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Этиология и патогенез преэклампсии.

1.2. Классификация преэклампсии.

1.3. Формирование представлений о генетической природе преэклампсии.

1.4. Генетические факторы, связанные с развитием преэклампсии.

1.4.1. Гены главного комплекса гистосовместимости .

1.4.2. Гены детоксикации ксенобиотиков метаболизма

1.4.3. Гены системы свертывания крови.
1.4.4. Гены, продукты которых участвуют в регуляции артериального давления
1.4.4.1. Ренинангиотензинальдостсроновая и кининогенкалликреиновая системы.
1.4.4.2. Гены ренинангиотензинальдостероновой системы.
1.4.4.3. Ген ангиотензинпревращающего фермента АСЕ.
1.4.4.3.1. Функции и локализация ангиотензинпревращающего фермента АПФ.
1.4.4.3.2. Структура и полиморфизм гена АСЕ.
1.4.4.4. Ген ингибитора активатора плазминогена 1 типа I1.
1.4.4.4.1. Роль ингибитора активатора плазминогена ИТАП1 при различных заболеваниях
1.4.4.4.2. Полиморфизм гена ингибитора активатора плазминогена РАЛ.
1.4.5. Гены эндотелиальной дисфункции.
1.4.5.1. Г сны синтетаз АЮ.
1.4.5.1.1. синтетазы и роль оксида азота 0 в организме
1.4.5.1.2. Полиморфизм гена нейрональной синтетазы
1.4.5.1.3. Полиморфизм гена индуцибельной ГЮсинтетазы 2.
1.4.5.1.4. Полиморфизм гена эндотелиальной ЫОсинтетазы
1.4.5.2. Гены цитокинов и ростовых факторов.
1.4.5.2.1. Роль фактора некроза опухолей альфа ТЫРсх в организме.
1.4.5.2.2. Полиморфизм гена ШРа.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Обследуемые 1руппы.
2.2. Реактивы, ферменты и биопрепараты
2.3. Экстракция геномной ДИК из лимфоцитов периферической крови.
2.4. Анализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов ПДРФанализ.
2.4.1. Проведение полимеразной цепной реакции ПЦР.
2.4.2. Гидролиз ДНК эндонуклеазами рестрикции.
2.4.3. Электрофорез и визуализация результатов
2.5. Математические методы анализа
3. РЕЗУЛЬТАТЫ.
3.1. Разработка системы молекулярных маркеров для определения риска развития преэклампсии.
3.1.1. Выбор молекулярных маркеров преэклампсии.
3.1.2. Выбор нуклеотидных последовательностей, длин ПЦР продуктов, эндонуклеаз рестрикций и последовательностей праймеров
3.1.3. Оптимизация условий ПЦР и электрофоретического разделения ПЦР
продуктов.
3.2. Клиническая характеристика исследуемых групп и подгрупп пациентов
3.2.1. Сравнительный анализ клинических параметров у больных с преэклампсией и в контрольной группе в популяционной выборке из СевероЗападного региона России
3.2.2. Сравнительный анализ клинических параметров у больных с нреэклампсией и в контрольной группе в популяционной выборке из Северо
Западного региона Греции.
3.3. Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов исследуемых генов в популяционных выборках из СевероЗападного региона России и СевероЗападного региона Г реции
3.3.1. Анализ соответствия распределений закону ХардиВайнберга
3.3.2. Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов исследуемых генов между контрольными группами из СевероЗападного региона России и СевероЗападного региона Г реции.
3.3.3. Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов исследуемых генов между группами больных с преэклампсией из СевероЗападного региона
России и СевероЗападного региона Греции.
3.4. Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов исследуемых генов у больных с преэклампсией и в контрольной группе в популяционной выборке из СевероЗападного региона России.
3.4.1. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов сосудистой системы
3.4.2. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов эндотелиальной дисфункции
3.4.3. Анализ сочетаний генотипов по генам эндотелиальной дисфункции и сосудистой системы у больных с преэклампсией и в контрольной группе
3.4.3.1. Анализ сочетаний функционально неблагоприятных и протективных генотипов исследуемых генов у больных с преэклампсией и в контроле
3.4.3.2. Анализ сочетаний функционально неблагоприятных и протективных генотипов исследуемых генов в подгруппах больных с преэклампсией и в контроле
3.5. Анализ ассоциации клинических параметров и генотипов по исследуемым генам у больных из Северозападного региона России
3.6. Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов исследуемых генов у больных с преэклампсией и в контрольной группе в популяционной выборке из СевероЗападного региона Греции.
3.6.1. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов сосудистой системы.
3.6.2. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов эндотелиальной дисфункции
3.6.3. Анализ сочетаний генотипов по генам сосудистой системы и эндотелиальной дисфункции у больных с преэклампсией и в контрольной
группе в популяционной выборке из СевероЗападного региона Греции 0.
3.6.3.1. Анализ сочетаний функционально неблагоприятных генотипов исследуемых генов у больных с преэклампсией и в контроле
3.6.3.2. Анализ сочетаний функционально неблагоприятных генотипов исследуемых генов в подгруппах больных с преэклампсией и в контроле
3.7. Анализ ассоциации клинических параметров и генотипов по
исследуемым генам у больных из Северозападного региона Греции
4. ОБСУЖДЕИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Анализ аллельного полиморфизма генов сосудистой системы АСЕ I и I1 и эндотелиальной дисфункции 1 ААТП, 2 , 3 4 и 4а4Ъ и 8 и 8 можно рекомендовать в качестве прогностического теста для оценки риска развития преэклампсии с учетом межпопуляционных различий. Основные положения, выносимые на защиту. Разработана система идентификации молекулярных маркеров риска развития преэклампсии. Контрольные группы и группы больных с преэклампсией из России и Греции отличаются по частотам аллелей и генотипов по генам эндотелиальной дисфункции гены I, 2, 3 и . Генотипы 1 и 3 4а4Ь. Северозападного региона России. Носительство сочетанного генотипа 3 4Ь4Ь РАН 4 увеличивает риск развития преэклампсии в популяции Северозападного региона Греции. Выявлена ассоциация определенных сочетаний генотипов по генам сосудистой системы и эндотелиальной дисфункции с развитием легкой и тяжелой форм преэклампсии в популяциях из России и Греции. Аллельные варианты генов сосудистой системы и эндотелиальной дисфункции ассоциированы с рядом клинических и биохимических параметров у больных с преэклампсией. Предложена молекулярнобиологическая модель развития преэклампсии при наличии молекулярных маркеров риска заболевания. Апробация работы. Результаты работы, были представлены на й и й. СанктПетербург, , , конференции Молодые биологи СанктПетербурга 0летию города СанктПетербург, , Всероссийской конференции Научнообразовательных центров Казань, , ПГ Международной ii конференции Медицина долголетия и качества жизни Москва, , 3й ежегодной встрече Международного общества по фармакогеномике в году Санторини, Греция, на Европейском конгрессе погенетике человека, в году Прага, Чехия. Диссертация апробирована на научных семинарах Лаборатории пренатальной диагностики наследственных и врожденных болезней человека ГУ научноисследовательского института акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта и Лаборатории репродуктивной генетики человека Университета г. Иоаннина Греция. Работа была подержана грантами Администрации СанктПетербурга М2. Д6, М2. Д3, М2. К5, РФФИ 5э, , I 9. Публикации. По материалам диссертации опубликовано работы. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 2 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов и обсуждения, выводов, списка литературы и приложений. Библиографический указатель включает 9 источников, из них 6 зарубежных. Диссертация иллюстрирована таблицами и рисунком, содержит 3 приложения. Зильбер и др. Несмотря на то, что термин гестоз был принят ВОЗ в году, в иностранной и отечественной литературе практически везде употребляется термин преэклампсия во многом соответствующий понятию гестоз. Существует более различных теорий о причинах возникновения преэклампсии, однако несомненно, что она является осложнением беременности, в основе которого лежит генерализованное повреждение эндотелия, вызванное нарушением процессов имплантации и плацентации Абрамченко и др. Повреждение эндотелия и увеличение проницаемости сосудов вызывает ряд негативных последствий уменьшения синтеза оксида азота , расслабляющего сосудистую стенку возрастание выработки цитокинов повышение чувствительности к эндогенным вазопрессорам увеличение спазма сосудов и уменьшение клубочковой фильтрации . Предполагаемые патогенетические механизмы возникновения и развития преэклампсии представлены на рисунке 1 рис. Проявлением всех этих последствий можно объяснить возникновение классической триады диагностических признаков преэклампсии артериальная гипертензия, отек, прогеинурия повышенное содержание белка в моче. Рис. Предполагаемые патогенетические механизмы преэклампсии по , , . Классификация преэклампсии На основании триады диагностических признаков существуют различные варианты классификации преэклампсии. В настоящее время чаще всего используют классификацию преэклампсии Американской ассоциации акушеров и гинекологов, которая легла в основу современной классификации ВОЗ табл. В России принята классификация гсстоза, представленная в таблице 2.