Усиленная люминолом хемилюминесценция стимулированных нейтрофилов: внутриклеточные и внеклеточные источники свечения, роль соединений с активным хлором

• Автор: Белакина, Наталья Сергеевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 130 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА I. Особенности полиморфноядерных лейкоцитов.

1.1. Морфология и функции полиморфноядерных лейкоцитов

1.2. Активация нейтрофилов

1.3. Активные метаболиты кислорода

1.4. Сульфгидрильные соединения.

ГЛАВА И. Хлораминовые производные аминокислот и таурина

ГЛАВА III. Хемилюминесценция суспензии гранулоцитов

3.1. Хемилюминесценция в присутствии активаторов
3.2. Хемилюминесценция системы нейтрофилы люминол.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Реактивы.
1.1. Получение Ыхлорпроизводных аминокислот и таурина
2. Объект исследования выделение нейтрофилов.
3. Методы исследования
3.1. Регистрация хемилюминесценции
3.2. Определение активного хлора в реакции гипохлорита натрия и хлораминов с серосодержащими соединениями.
3.3. Статистическая обработка полученных результатов
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. Природа оксидантов, непосредственно вызывающих окисление люминола, индуцированное нейтрофилами
1.1. Роль гидроксильного радикала.
1.2. Роль хлораминов
ГЛАВА 2. Влияние серосодержащих соединений на хемилюминесценцию в системе стимулированные нейтрофилы люминол.
2.1. Влияние сульфгидрильных соединений на хемилюминесценцию люминола, вызванную Ыхлорфенилаланином в присутствии пероксида водорода
2.2. Хемилюминесценция в системе стимулированные ФМА нейтрофилы люминол в присутствии сульфгидрильных соединений
ГЛАВА 3. Хемилюминесценция системы нейтрофилы люминол в присутствии биогенных хлораминов
3.1. Влияние Ыхлорфенилаланина на хемилюминесценцию люминола в суспензии неактивированных нейтрофилов
3.2. Влияние хлораминов на хемилюминесценцию люминола в суспензии
клеток, стимулированных ФМА
3.3. Влияние аминокислот и таурина на хемилюминесценцию в системе
нейтрофилы люминол
ПРИЛОЖЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


СЗЬ, СЗа, С4, С5а, что обеспечивает активацию клеток и высвобождение содержимого гранул. Оксифильность специфических гранул в цитоплазме обусловлена содержанием в них основного белка богатого аргинином, предположительно, являющегося фактором резистентности при паразитарных инфекциях. В гранулах выявлена высокая активность гидролитических ферментов. Эозинофилы содержат гистаминазу и киназу, которые инактивируют биологически активные соединения гистамин и кинин, и являются, таким образом, отрицательными модуляторами воспаления 1,2,. Пероксидаза эозинофилов катализирует реакцию пероксида водорода с галойдами, в результате чего образуются НОВг, I и . Окислительный метаболизм и пероксидазная активность у эозинофилов выше, чем у нейтрофилов, хотя фагоцитоз нейтрофилами осуществляется интенсивней. Одной из главных функций эозинофилов считается создание микробицидного потенциала кожи и слизистых поверхностей, где они накапливаются в соединительной ткани в виде одноклеточных желез, секрегирующих гранулы, которые содержат пероксидазу эозинофилов . Эозинофильные гранулоциты участвуют в аллергических, анафилактических и защитных реакциях организма на чужеродный белок 1,,. Базофилы содержат ядро, не имеющее структурных особенностей. На своей поверхности базофилы несут большое количество рецепторов к I. Цитоплазма базофилов заполнена крупными специфическими гранулами полигональной формы диаметром 0,1,2 мкм, обладающими метохромазией способность окрашиваться в тон, отличающийся от цвета красителя. Метохромазия связана с наличием в гранулах кислого гликозаминогликана гепарина. В состав гранул входят гистамин, серотонин, пероксидаза, кислая фосфатаза, гистидиндекарбоксилаза фермент синтеза гистамина 2,. В результате активации базофилы продуцируют пероксидазу, супероксидный анионрадикал и перекись водорода, что свидетельствует о возможных биоцидных эффектах, аналогичных эффектам нейтрофилов. Выделяя гепарин, базофильные гранулоциты способны модулировать процессы свертывания крови и проницаемости сосудов. Фагоцитарная активность и хемотаксис этих клеток выражены слабо 1,. Первым этапом активации клеток является стимуляция, то есть взаимодействие внешнего стимула с плазматической мембраной клетки. Количество рецепторов на клеточной мембране резко возрастает за счет добавления дополнительных рецепторов к уже имеющимся в состояние покоя. Это начальный этап конформационных изменений мембраны, в результате которых возрастает ее проницаемость для различных ионов. Локальное увеличение концентрации ионов натрия с внутренней стороны мембраны приводит к ее деполяризации. В то же время в цитоплазме повышается концентрация ионов кальция одного из медиаторов активации вопервых, так как открываются кальциевые каналы в мембране клетки и ионы кальция свободно поступают в клетку из внешней среды, и, вовторых, расходуются внутренние запасы кальция. Повышение концентрации кальция приводит к 1 усилению активации протеинкиназы С 2 изменению соотношения циклических нуклеотидов цАМФ и цГМФ 3 активации фосфолипазы А2, катализирующей образование арахидоновой кислоты. Арахидоновая кислота включается в цепь реакций синтеза лейкотринов и простагландинов, которые являются физиологическими регуляторами клеточной активности, действующими как на сам нейтрофил, так и на другие клетки 3, 5,,. В процессе активации возрастает в десятки раз потребление клеткой кислорода это явление называют дыхательным или респираторным взрывом ,. Существует несколько способов инициации респираторного взрыва. Один из способов это прямая стимуляция протеинкиназы С такими веществами как фосфатидная кислота произведенная фосфолипазой , диацилглицеролы, форболовые эфиры например, форболмиристатацетат ФМА , ,. ФМА, стимулируя протеинкиназу С, вызывает также ингибирование экспрессии поверхностного антигена 8 нейтрофила, что можно предотвратить предварительной обработкой клеток атокоферолом и бетаметазоном, которые стабилизируют мембрану 3.