Автоматический количественный анализ электрофоретических спектров белков и их комплексов (аппаратура, математическое обеспечение, эксперимент)

• Автор: Брикач, Георгий Евгеньевич
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Горький
• Количество страниц: 142 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. УСТРОЙСТВО АВТОМАТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ГЕЛЕВЫХ

ЭЛЕКТРОФОРЕГРАММ НА БАЗЕ ЭВМ.

1.1. Электрофорез белков и их комплексов в полиакриламидном геле

1.2. Фотометрирование гелевых электрофореграмм.

1.3. Структура и основные характеристики устройства

ввода электрофореграмм в ЭВМ..

1.4. Блок фотометрирования устройства ввода электрофоре грамм

1,5. Блок сканирования устройства ввода электрофореграмм.

1.6. Блок сопряжения устройства ввода электрофореграмм.

ГЛАВА 2. МАШИННЫЙ КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИХ
СПЕКТРОВ БЕЛКОВ И ИХ КОМПЛЕКСОВ
2.1. Постановка задачи машинной обработки электрофореграмм на ЭВМ Электроника0
2.2. Математическое описание денситометрической реализации.
2.3. Аналогоцифровое преобразование денситометрической
реализации.
2.4. Математическое обеспечение автоматического анализа
электрофоретических спектров
2.5. Оценка погрешности измерения характеристик
электрофореграмм.
СТР.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ АПРОБАЦИИ АВТОМАТИЧЕСКОГО КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИХ СПЕКТРОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
3.1. Структурная схема использования программноалгоритмического обеспечения автоанализатора в
биологических исследованиях
3.2. Применение автоанализатора в сравнительных
исследованиях микроорганизмов
3.3. Применение автоанализатора в типировании липо
протеидемий популяционной выборки
ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОД. РАБОТЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


При этом определены процентные количественные содержания вещества в электрофоретически разделенных фракциях пребета, бета и альфалипопротеидов, Показана целесообразность включения такого количественного определения состава липопротеидов в комплекс широких популяционных обследований людей. Использование автоанализатора для получения данных по сравнительному анализу денситограмм электрофоретических спектров белковых систем микроорганизмов положительно оценено микробиологами. На основании автокорреляционной оценки степени близости сопоставленных денситограмм было проведено группирование ти штаммов стафилококков, которое согласовалось с видовыми признаками 6. Сеггта . Хорошее согласование со штаммовьгми характеристиками стафилококков также было получено по результатам автокорреляционного анализа денситограмм электрофоретических спектров внеклеточных белков штаммов стафилококков. Дальнейшее развитие этих наблюдений представляет большой интерес для эпидемиологических исследований. Практическое внедрение. На базе ГНИИЭМ для использования разработанного автоанализатора в году был создан центр, который по мере необходимости обслуживал кроме лабораторий института три терапевтические клиники Горьковского медицинского института им. С.М. Кирова на базе областной и двух городских больниц и медицинский пункт одного предприятия г. Горького. Горьковского госуниверситета им. Н.И. Лобачевского и используются в учебном практикуме, а также в научноисследовательской работе сотрудников биологического факультета ГГУ. Устройство для автоматического количественного анализа электрофоретических спектров белков и их комплексов. Математическое обеспечение для количественной обработки электрофоретических спектров белков и их комплексов. ГЛАВА I. УСТРОЙСТВО АВТОМАТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ГЕЛЕВЫХ ЭЛЕКТРОФОРЕГРАММ НА БАЗЕ ЭВМ 1. Метод зонального электрофореза входит в число тех приемов, внедрение которых в практику биологических и медицинских исследований позволяет вести анализ состояния организмов на молекулярном уровне. Принцип зонального электрофореза заключается в том, что смеси заряженных компонентов разделяются на достаточно отчетливые зоны на поддерживающем носителе при наложении внешнего электрического поля. Широкое распространение получили методы зонального электрофореза на различных поддерживающих средах фильтровальной бумаге, различных производных целлюлозы, крахмала, агаре, полиакриламиде и вообще на любом пористом материале, не проводящем электричества. Наиболее эффективной поддерживающей средой из числа тех, которые имеются в распоряжении исследователя для электрофоретического разделения веществ, является синтетический полиакриламидный гель. Он используется главным образом для разделения протеинов или их комплексов, обеспечивая примерно такую же степень разделения, как крахмальный гель. Известны два основных способа проведения аналитического электрофореза в полиакриламидном геле электрофорез в горизонтально и вертикально расположенном блоке различной толщины и дисковый электрофорез 1,2,3,4 . Дискэлектрофорез проводится чаще всего в комбинированной системе буферов, при различных буфера, в электродных сосудах и геляхверхнем и нижнем 5,6,7, 8 . Разделяемая смесь предварительно автоматически концентрируется, образуя весьма узкую стартовую зону, что затем позволяет получить четкое разделение этой смеси на небольшом участке геля за короткий промежуток времени. Теоретической предпосылкой принципа автоматического концентрирования вещества на старте является эффект устойчивой подвижной границы Кольрауша. Этот физический эффект достаточно хорошо описан ранее 9 . В настоящее время существующие методики дискового электрофореза в полиакриламидном геле ДЭФ в ПААГе позволяют разделять любые электролиты с молекулярным весом более , малые количества вещества 10 мкг при достаточном быстродействии разделения 3 мин. Оптические методы анализа связаны в большинстве случаев с той или иной формой фотометрии, т. Основой оптических методов анализа являются световые измерения, непосредственно связанные с количественными характеристиками оптических свойств, которые определяются при взаимодействии света с исследуемым объектом. КаСс I е 1.