Изучение механизма образования и стабильности биологически-активных продуктов фотоокисления псоралена

• Автор: Малахов, Михаил Валентинович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 118 с.

Хотя для получения препаратов ФОП данное ограничение снимается, во всех ранее проведенных исследованиях биологических эффектов ФОН применялось только УФАизлучение 2,4,6,,,,,2,3,5,3. Возникает вопрос возможно ли использование УФСизлучения 0 0 нм для получения биологическиактивных ФОПпродуктов Ответ на этот вопрос априорно неясен. Гак, с одной стороны, по правилу Каши квантовый выход фотохимических реакций не зависит от длины волны действующего света. С другой стороны, в растворах возможно протекание фотохимических реакций с участием образующихся ФОПпродуктов, вклад которых в реализацию биологических эффектов ФОП совсем не изучен. Среди первичных фотопродуктов ФК существуют как поглощающие иногда лучше самого ФК, так и не поглощающие УФАизлучение. При этом все они поглощают УФСизлучение, то есть при переходе от УФАизлучения к УФСизлучению очевидно изменится вклад вторичных фотохимических реакций, биологические последствия чего неизвестны. В этой связи исследование биологической активности препаратов ФОН, полученных при УФСоблучении растворов ФК, является актуальной задачей. Исследования эффектов биологическиактивных ФОПпродуктов на экспериментальных биологических моделях обычно сложны, трудоемки и дорогостоящи. Эго относится и к методу регистрации ФОПгемолиза, и особенно к исследованиям иммуномодулирующей активности препаратов ФОП i viv. Поэтому существует насущная проблема поиска простых и быстрых физикохимических методов мониторинга биологическиактивных ФОПпродуктов. Ре. Поэтому в настоящей работе была сопоставлена кинетика образования и накопления биологическиактивных ФО 1продуктов и ХЛФОПпродуктов. Целью настоящей работы являлось изучение механизма образования и стабильности биологическиактивных продуктов фотоокисления псоралена, а также оценка возможности их мониторинга с помощью метода регистрации хемилюминесценции раствора фотоокисленного псоралена, индуцированной добавлением ионов КеП. ФОПгемолизинов иили ФОПиммуномодуляторов методом регистрации хемилюминесценции, индуцируемой добавлением ионов РсП к раствору ФОП. Фурокумарины ФК вещества растительного или синтетического происхождения, способные сенсибилизировать биологические объекты к действию ближнего ультрафиолетового излучения УФАизлучения, 0 0 нм. Структурно фурокумарины являются трициклическими соединениями, образуемыми в результате конденсации двух гетероциклов фурана и кумарина. ФК имеют широкую полосу поглощения в УФобласти спектра с характерными максимумами около 0 0 нм и длинноволновым плечом, доходящим до 0 нм ,. В работах 8,9 показано, что с ростом концентрации ФК в этаноле наблюдается изменение формы и смещение максимума спектра поглощения в длинноволновую область. Гак для 8метоксипсоралена было показано, что увеличение его концентрации в растворе от 4 до 0 мкМ приводит к смещению максимума поглощения на 5 нм с 7 нм до 2 нм и большей выраженности плеча поглощения при 0 им. Авторы предположили, что данный эффект может бы ть обусловлен явлением агрегации ФК в растворах с ростом концентрации. М, а воде около 0,1 мМ, в полярных растворителях вследствие агрегации молекул ФК может происходить незначительный красный сдвиг максимумов поглощения. При поглощении фотона Ли молекула ФК переходит в синглетное электронновозбужденное состояние ФК 5. Большая часть молекул ФК в синглетном электронновозбужденном состоянии в растворах дезактивируется безызлучательно в процессах внутренней конверсии ВК. При комнатной температуре в неполярных растворителях ФК практически не флуоресцируют 8,9. Замена неполярного растворителя на полярный иили образующий водородные связи растворитель ведет к возрастанию квантового выхода флуоресценции ффя. Данный необычный для большинства флуорофоров эффект исчезновения флуоресценции в неполярных растворителях может объясняться теорией эффекта сближения л,п и п,п электронных энергетических уровней при взаимодействии молекул ФК и растворителя ,6. В работах 8,9 показано, что спектры возбуждения флуоресценции не зависят от концентрации ФК и близки или совпадают со спектрами поглощения растворов при насыщающей концентрации ФК.