Оксид азота в фоторецепторных клетках сетчатки глаза

• Автор: Лунгина, Ольга Геннадьевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 120 с. : ил.

Содержание,
Введение

Глава 1. Обзор литературы.

1. Фототрансдукция.

1.1. Строение и функции сетчатки.

1.2. Строение и функции фоторецепторов

1.3. Фоторецепторный ток

1.4. Механизм проведения зрительного возбуждения

1.5. Адаптация

2. Ионные каналы, регулируемые циклическими нуклеотидами.

2.1. Функциональные свойства ЦНканалов.

2.2. Молекулярная структура.
2.3. Модуляция ЦНканалов.
2.4. Механизм работы канала.
3. Оксид азота и его влияние на работу клеток сетчатки.
3.1 Свойства и функции 0 в организме.
3.2. Оксид азота в рецепторных органах
3.3. Взаимодействие ЦНканалов с оксидом азота
Глава 2. Действие оксида азота на фотоответы сетчатки
лягушки.
2.1. Методы.
2.2. Влияние оксида азота на амплитуду фотоответов сетчатки
2.3. Влияние оксида азота на процесс адаптации сетчатки после яркой вспышки.
Глава 3. Оксид азота в фоторецепторном слое сетчатки позвоночных.
3.1. Методы.
3.2. Измерения активности ЫОсинтазы
3.3. Зависимость активности ИОсинтазы от концентрации свободного Са2
3.4. Активность ЫОсинтазы в срезах внутренних и наружных сегментах фоторецепторов
3.5. Эндогенная концентрация 0 в наружном фоторецепторном слое сетчатки.
3.6. Измерения эндогенной концентрации 0 с помощью спинловушки
Глава 4. Влияние 0 на величину цГМФзависимого тока в наружном сегменте фоторецепторной палочки сетчатки лягушки.
4.1. Методы.
4.2. Измерения методом пэтчкламп.
4.3. Измерения методом всасывающего электрода.
Глава 5. Модуляция работы ЦНканалов слуховых колосковых
клеток.
5.1. Методы.
5.2. Активация ЦНканалов оксидом азота.
5.3. Активация ЦНканалов реагентами, модифицирующими 8Нгруппы
5.4. цАМФ и 0 действуют на разные связывающие центры канала.
Глава 6. Обсуждение результатов.
Выводы.
Список литературы


Корти морской свинки. Изучены распределение фермента МОсинтазы в слое фагорецепторных клеток и свойства этого фермента. Доказано, что фермент активен при физиологических условиях. Показано, что активность фермента неравномерно распределена внутри клетки. Двумя независимыми методами определена эндогенная концентрация оксида азота в фоторецепторном слое. Показано, что добавление доноров 0 не влияет на величину проводимости ЦНканалов из наружных сегментов фоторецепторных палочек лягушки. Добавление доноров 0 вызывает активацию ЦНканалов из слуховых волосковых клеток, аналогичный эффект наблюдается при добавлении БНреагентов. Показано, что экзогенное добавление доноров 0 влияет на амплитуду Установлено, что экзогенное добавление доноров 0 ускоряет процесс адаптации сетчатки после насыщающей вспышки. Результаты настоящей работы позволяют более полно представить роль оксида азота в процессе передачи зрительного сигнала и в механизме регуляции проводимости ЦНканалов разных типов. Глава 1. Обзор литературы. Фотогрансдукция. Строение и функции сетчатки. Сетчатка это часть мозга, отделившаяся от него на ранних стадиях эмбрионального развития, но все еще связанная с ним посредством пучка волокон зрительного нерва. Она имеет форму полусферы с толщиной около четверти миллиметра. Сетчатка имеет уникальное морфологическое строение, характеризующееся очень четкой послойной организацией. Она состоит из трех слоев нервных клеток, разделенных двумя слоями синапсов, образованных аксонами и дендригами этих клеток рис. Светочувствительные рецепторы пшючки и колбочки расположены на задней поверхности сетчатки. Своими наружными сегментами, которые и осуществляют восприятие света, они обращены в сторону пигментного эпителия, содержащего экранирующий пигмент меланин. Число палочек и колбочек отличается в разных частях сетчатки, так, например, большая часть колбочек сосредоточена в центральной зоне, тогда как палочки преобладают на периферии сетчатки. Кроме того, общее число палочек существенно выше, чем колбочек. Поскольку фоторецепторы расположены в наружной части сетчатки, поступающий свет должен пройти через два внутренних слоя нервных клеток прежде, чем попадет на фоторецепторы. Необходимо отметить, что эти слои довольно прозрачны и, вероятно, несущественно уменьшают четкость изображения. Следующий за рецепторным слой клеток содержит нейроны трех типов биполярные, горизонтальные и амакриновые клетки. Биполярные клетки связаны с синаптическими окончаниями рецепторов рис. Рисунок I. Поперечный разрез сетчатки. Горизонтальные клетки соединяют рецепторы и биполярные клетки сравнительно длинными связями, идущими параллельно слоям сетчатки. Благодаря тому, что биполярные и горизонтальные клетки являются следующим звеном на пути передачи сигнала от фоторецептора в мозг, они называются нейронами второго порядка. Аналогично горизонтальным, амакриновые клетки связывают биполярные клетки с ганглиозными. Слой нейронов на передней стороне сетчатки содержит ганглиозные клетки, аксоны которых проходят по поверхности сетчатки и собираются в пучок у слепого пятна, образуя зрительный нерв. Сетчатка это уникальный рецепторный орган, так как только она обладает способностью обрабатывать информацию еще до поступления в мозг. Так, в каждом глазу содержится около 5 миллионов палочек и колбочек и только порядка 1 миллиона ганглиозных клеток i . ., . И таким образом сетчатка обеспечивает начальную обработку информации. Необходимо заметить, что окончательно все функции и особенности клеток различных слоев сетчатки так и не выяснены. Одним из стандартных методов изучения работы сетчатки, отдельных ее слоев и клеток является регистрация электроретинограммы рис. Электроретинограмма ЭРГ это запись изменения во времени суммарного трансретинального электрического потенциала, который возникает в ответ на свет, вклад в который в той или иной мере вносят клетки сетчатки всех уровней. Рисунок 2. Пример регистрации электроретинограммы темноадаптированной сетчатки.