Анализ спектров флуоресценции производных нафтиламина для исследования структуры клеточных мембран и их составляющих

• Автор: Бойцов, Виктор Михаилович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 136 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА I. Флуоресцентные зонды в исследовании мембран

достоинства и недостатки.

1. Информативные параметры флуоресценции.

1.1. Интенсивность

1.2. Положение максимума спектра

2. Гетерогенность распределния зонда в мембране и методы

е определния

2.1. Анализ кривой затухания флуоресценции

2.2. Спектральные методы
ГЛАВА 2. Электронноколебательные спектры многоатомных
молекул
1. Характер спектров в различных условиях.
2. Энергетика процессов излучения и поглощения света.
3. Теоретические исследования электронноколебательных взаимодействий.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
ГЛАВА 3. Метод анализа электронноколебательных спектров жидких растворов многоатомных молекул.
1. Модель формирования элетронноколебательных спектров и система уравнений для их анализа.
2. Процедура решения системы уравнений
ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
ГЛАЕМ 4. Анализ спектров в гомогенных растворах
1. Спектры флуоресценции зондов.
1.1. 1анилинонафталин8сульфонат.
1.2. Нфенил1нафтилшлин
2. Докозательства адекватности предложенной модели.
3. Интерпретация параметров распределения неоднородного уширения спектров.
3.1. Неоднородное уширение и ыешолекулярные взаимодействия
3.2. Неоднородное уширение и энергетика флуоресценции
ГЛАВА 5. Анализ спектров флуоресценции зондов, сорбированных на гетерогенных объектах
1. Молекула сывороточного альбумина быка
2. Мембрана эритроцитов.
3. Оценка предложенного подхода.III
ВЫВОДЫПо
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Целью данной работы был поиск такого подхода к описанию и анализу спектров флуоресценции АНС и ФНА в гомогенных растворителях и сорбированных на гетерогенных биологических объектах, который позволил бы более однозначно интерпретировать полученные данные. I. Построить модель формирования электронноколебательных спектров жидких растворов многоатомных молекул, которая позволяла с достаточной точностью описывать их формы и интенсивности. АНС и ФНА сорбированных на гетерогенных биологических объектах. Научная новизна работы. Научная новизна работы заключается в том, что впервые найден подход к анализу спектров флуоресценции зондов АНС и ФНА в гомогенных растворителях, который позволяет с достаточной точностью описывать как их формы, так и интенсивности в растворителях различной полярности и вязкости. Проведн анализ спектров АНС и ФНА и найдены параметры распределения неоднородного уширения спектров в различных растворителях. . Установлена связь между параметром Э спектров зондов и вязкостью растворителей. С помощью этого метода показано, что молекула САБ имеет два различных типа центров сорбции АНС и ФНА. Дана характеристика этих центров. Показано, что правильно ориентированные везикулы мембраны эритроцитов имеют по крайней мере три различных типа центров сорбции обоих зондов. Определено относительное содержание зондов в каждом из этих центров и охарактеризованы их полярность и микровязкость. Е мембране эритроцитов обнаружен центр сорбции ФНА, полярность которого ниже полярности таких растворителей как гексан и толуол. Практическая ценность. Предлагаемый подход к анализу спектров флуоресценции зондов позволяет получать больший объм информации о структуре исследуемого объекта, чем ранее использованные методы. Он открывает новые возможности для исследования структурного сотояния биологических мембран и макромолекул. В нашем отделе этот метод сейчас используется для изучения влияния различных факторов на структуру искусственных и природных мембран, а также для изучения особенностей структурной организации плазматических мембран при первичной артериальной гипертензии. Апробация работы. Всемирном конгрессе кардиологов Москва, , а также на теоретических семинарах в ЦНИ лаборатории 4го ГУ при м3 СССР, НИЦ 2го МОЛГСП, кафедры общей физики и волновых процессов Физического факультета ИГУ им. М.В. Ломоносова. Публикации. По материалам диссертации опубликовано печатных работ. Объм работы. Работа изложена на 4 страницах текста, содержит рисунков, II таблиц, 6 ссылок на цитируемую литературу и включает обзор литературы, экспериментальную часть, обсуждение результатов и выводы. ГЛАВА I. ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ ЗОНДЫ В ИССЛЕДОВАНИИ МЕМБРАН ДОСТОИНСТВА И НЕДОСТАТКИ. В последние лет метод флуоресцентных зондов получил широкое распространение для изучения структуры и функций биологических мембран и молекул белков. Этим исследованиям посвящено большое число обзоров 1 4, что значительно облегчает нашу задачу. В настоящее время многие флуоресцентные красители используются в качестве флуоресцентных зондов. Так в книге Ю. А.Владимирова и Г. Г.Добрецова Некоторые наиболее часто используемые соединения и их структурные формулы приведены в Таблицах I и 2. Различают универсальные и специализированные зонды. Универсальный зонд должен реагировать на самые разнообразные перестройки, которые могут происходить в мембране. Специализированный зонд должен реагировать на изменения какоголибо одного физического параметра мембраны, происходящие в е определнном районе. Параметры флуоресценции молекул, используемых в качестве зондов, в значительной степени зависят от физических свойств их ближайшего окружения. Таблица . Часто используемые зонды. Сокращение Полное название Д и К. I. АНС, I,8АНС анилинонафталин8сульфонат I,7АНС АО Бензоапирен ДАНС, I,5ДАНС ДАНСА ДАНСА ДАНСФЭ ДАНСфосфатидилэтаноламин ДМХ ДФГТ Iдифенил1,3,5гексатриен МАНС II. МБА Мероцианин 0 Пирен ТНС, 2,6ТНС ФНА Фенил1нафтиламин ФНА Таблица 2. Структурные формулы некоторых наиболее часто используемых зондов, названия см. Табл. На.