Исследование генерализованного метаболического ответа нервных клеток на смену функционального состояния и на действие повреждающих факторов

• Автор: Гордон, Рита Яковлевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 147 с. : ил.

Оглавление

1. Введение 3

2. Литературный обзор

3. Материалы и методы

4. Результаты и обсуждение

Распад и накопление рибосом в цитоплазме при изменениях функционального состояния

Ультраструктурный анализ состояния ядрышка

Ультраструктурный анализ цитоплазмы

Исследование состояния рРНК в рибосомах

Изменение Ка при смене функционального состояния животных и при действии повреждающих факторов
Изменение Кр при смене функционального состояния животных и при действии повреждающих факторов
5 Заключение
6. Выводы
7. Список литературы
8 Приложение I XXII
ВВЕДЕНИЕ


В интерфазной клетке эукариотов процессы транскрипции и трансляции разделены пространственно, поэтому важное значение для жизнедеятельности клетки имеет взаимосвязь между ядром и цитоплазмой, которая осуществляется путем ядерноцитоплазматического транспорта всех видов РНК. Весь процесс, включающий внутриядерный транспорт, селективный отбор мРНК, функционирующих в цитоплазме данной клетки, транслокация РНК из ядра в цитоплазму, так же, как и транскрипция и процессинг РНК, связан с ядерным матриксом. Через поровые комплексы транспортируются не все рибонуклеопротеиды ядра, а значительная их часть остается в ядре i . Разрушение связи зрелой мРНК с ядерным скелетом, в частности, с актиновыми филаментами, происходит в непосредственной близости к поровым комплексам и обеспечивает, а возможно, и регулирует выход макромолекул в цитоплазму. Транслокация через ядерные поры, какотмечалось выше, сопровождается изменениями в композиции РИЛ. Так, некоторые из них челночно двигаются между ядром и цитоплазмой, и ассоциируют с полиЛ, другие связываются с полиА в ядре, но диссоциируют до или при транспорте через мембрану, оставаясь всегда в ядре. Следует отметить, что полиА связана также с двумя белками, которые непосредственно участвуют в экспорте РНК в цитоплазму. Некоторые факторы обладают плеиотропным эффектом, заключающимся в том, он блокирует белок, импортируемый внутрь, и экпортирует мРНК наружу из ядра. Экспорт РНК различных классов является специфически насыщаемым в том смысле, что например данная тРНК может конкурентно ингибировать экспорт других транспортных РНК, но не влияет на транспорт РНК других классов. Кроме того, благодаря фактору насыщения, РНК частично остается в ядре, отчего снижается их экспорт Ii, , . ГТФазы и т. Таким образом, цитоскелетные элементы контролируют распределение белков между основными клеточными компартментами, являются лигандами при транспорте макромолекул к рецепторным местам в поровых комплексах, поддерживают структуру и динамику поровых комплексов , . РНК к разным внутриклеточным компартментам достигается также благодаря взаимодействию мРНК с цитоскелетом, который осуществляет специальный контроль над белковым синтезом. Рибосомы в цитоплазме находятся в различных функциональных состояних отдельные рибосомаяьные субъединицы, моносомы и фракции полисом свободные и связанные с мембранами и цитоскелетом , , . На рибосомах нуклеотидная последовательность мРНК транслируется в соответствующую последовательность аминокислот. Сам по себе процесс синтеза белка включает следующие этапы инициацию, элонгацию и терминацию. Соответственно, в этом процессе принимают участие целый комплекс ассоциированных белков, включающий факторы инициации, элонгации и многие другие. При смене функционального состояния клетки или при действии различных повреждающих факторов происходит перераспределение рибосом между выше приведенными фракциями. Такое перераспределение отражает изменение в паттерне белков, синтезируемых в данный момент клеткой. Так, действие инсулина увеличивает скорость белкового синтеза, в асцитных клетках Кребс , что вызывает перераспределение рибосом между этими фракциями полисом. Через 0,5 часа после действия инсулина количество свободных полисом снижается, и увеличивается число цитоскелетсвязанных полисом ДСП, через часа инкубации продолжает увеличиваться доля полисом на цитоскелете со снижением рибосом на ЭПР Vi . При более длительной инкубации этих клеток с инсулином идет перераспределение рибосом с цитоскелетных компонентов на мембрансвязанные МСП, сопровождающееся увеличением скорости белкового синтеза на МОП, что отражает потребность клетки в увеличении синтеза белков, ассоциированных с мембраной ii . При термошоке наблюдается перераспределение рибосом с цитоскелетных структур на МСП . При голодании мРНК актина локализуется в свободных полисомах . РНК актина локализуется в свободных и цитоскелетных фракциях полисом. При оплодотворении, когда клетке нужно увеличить белковый синтез, или в клетках, находящихся в фазе роста, наблюдается увеличение количества рибосом, связанных с цитоскелетом .