Индукция и подавление апоптоза тимоцитов крысы ультрафиолетовым облучением

• Автор: Долгачев, Владислав Александрович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 99 с. : ил.

1П. Результаты и их обсуждение.

Исследование способности мембранных н цитоплазматических антиоксидантов предотвращать УФС вызванный апоптоз тимоцитов крысы.

Исследование роли полнЛДФрибозо полимеразы ПАРП и эксцизионной

репарации ДНК

Влияние афнднколнна, ингибитора дельта и эпсилон ДНК полимераз.

Действие 3аминобензамида ингибитора ПАРП.

Действие ингибиторов синтеза белка и макромолекул.

Исследование роли внутриклеточных протеннкиназ.

Исследование роли фосфолипазы А2, циклооксигеназы и липоксигеназы.

Изучение роли внутриклеточного Са2.

Выводы.
.Литература.
. .
. . . . . . .Л
. Список сокращений.
ЭРН экецнзионная репарация нуклеотидов
ЭРО экецнзионная репарация оснований
ПАРП полнАДФрибозо полимераза
ПКС п роте инки паза С
ПКА протеинкиназа А
ФЛАг фосфолипаза А
ТИК тирозиновая протеинкиназа
УФС коротковолновое ультрафиолетовое облучение с максимумом при 4 ач
Введение


Однако, несмотря на большой интерес многих исследователей к апоптозу клеток иммунной системы, вызванному УФС, мало известно о механизме его реализации. Целью настоящей работы явилось исследование эффекторных механизмов индукции и подавления апоптоза в ткмоцитзх крыс, подвергнутых облучению i vi ультрафиолетом с максимумом при 4 нм диапазон С. В результате проведенных исследований было установлено, что вызванный У ФСоб лучением апоптоз тимоцитов крысы предоьращался синтетическим прсдшесгвсшаосом внутриклеточного глугапюна антиоксидантом цистсином за счт поддержат необходимого уровня глугапюна в клетках. Таким образом, У ФСвыз ванный апоптоз зависит от содержания в клетке глютатиона. Ингибитор псрскисного окисления липидов ПОЛ антиоксидант ноно л не влиял на индукцию и развитие апоптоза тимоцитов под действием УФС, что говорит о несущественном влияние ПОЛ на апоптоз пшоцитов. Апоптоз тнмоцтггов, вызываемый УФС, зависит от активности протсинкинаэы С, причем от ее кальций независимой изоформы. Согласно результатам исследований, тирозиновыс киназы, чувствительные к ингибиторам гсннетсин, тирфоепш В , Н8 не участвуют в УФС вызванном апоптозс. Активация апоптоза тимоцитов дозами УФС до Джм3 связана с подавлением активности чувствительных к афидиколину полимераз дельта и эпсилон и возможно с ингибированием эксцизионной репарации нуклеотидов. При дозах УФС более Джм3 лбель клеток дозозависимо снижалась, почти достигая контрольного уровня при дозе УФС облучения Джм3. С помощью ингибггорного анализа было установлено, что наблюдавшееся снижение связано с активностью полиАДФрнбозо полимеразы и повидимому с актвацией экецнзионной репарации оснований. В присутствии ингибиторов синтеза белка и макромолекул как активация так и снижение апоптоза тимоцитов в зависимости от дозы УФС практически элиминировались, указывая на то что оба процесса зависят от синтеза белка v. Апоптоз тимоцитов, вызванный УФС облучением, не был чувствителен к ингибиторам фосфолипазы А2, липокситеназы и циклооксигеназы, т. УФС зависимый апоптоз тимоцитов не требует участия этих ферментов. Не было зарегистрировано изменения концентрации внутриклеточного кальция и участия калмодуяина. Диссертационная работа начинается обзором литературных данных. Поскольку исследованию алотоэа, вызванного в различных типах клеток разнообразными воздействиями, посвящены многие сотни научных публикаций, приведенный здесь обзор включает только тс вопросы, которые так или иначе затронула в работе. Основные результаты, полученные автором, сформулированы в выводах. Обзор литературы. В первой части обзора будет рассмотрен процесс апогттоза с морфологической и биохимической точек зрения. Так как в настоящей работе апогттозные клетки регистрировались с помощью методов проточной цитометрии, их рассмотрению посвящена отдельная глава. В заключительной, третьей части работы изложены полученные результаты и сделаны выводы. Существуют два типа гибели клеток некроз и апоптоз. Первый ассоциируется с действием вредоносных агентов и обстоятельств, приводящих к нарушению целостности клеточной мембраны вследствие повреждения или формирования пор и изоляции внутренней среды клетки от ей окружения. Второй тип гибели представляет собой активный процесс реализации программы гибели клетки, он может бьггь вызван действием поступающих извне сигналов, которые сами по себе не являются токсичными или деструктивным и. Этот тип гибели иногда обозначают как самоубийство клетки i А Н . Апоптоз выражается в деградации ДНК, заканчивается он распадом клетки на фрагменты, сохраняющие целостность внешней мембраны, и поэтому, в отличие от некроза, не сопровождается развитием воспаления и не вызывает поражения других клеток и тканей организма ii . Основные морфологические признаки апогттоза вакуолизация и конденсация цитоплазмы и хроматина с последующей клеточной фрагментацией на апогпические тельца, содержащие остатки ДНК и клеточные органеллы ii . Уманскнй СР. Апоптоз является обязательным компонентом жизни многоклеточных организмов их развггтня. Ярклин А. А. . Наибольший интерес у исследователей вызывает апоптоз. Щ . ЙР iii.