Исследование неспецифического адгезионного фактора сыворотки крови животных и человека

• Автор: Резникова, Мария Марковна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Купавна
• Количество страниц: 179 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ .

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

I.I. Молекулярные механизмы клеточной адгезии.

Роль факторов сыворотки крови в адгезии клеток

1.1.1. Роль адгезионных взаимодействий клеток в основных биологических процессах .

1.1.2. Исследование адгезии клеток к субстрату .

Роль сыворотки крови в адгезии

клеток к субстратам

I.I.3 . Межклеточная адгезия .

Влияние сыворотки крови на межклеточную адгезию.

1.2. Факторы сыворотки крови, проявляющие
ростстимулирующую активность .
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ .
2.1. Сыворотки
2.2. Растворы
2.3Метод выделения и очистки адгезина из сы .
воротки крови.
2.4. Определение стабильности адгезина в различных условиях
2.5. Исследование комплекса адгезина с носителем в сыворотках взрослых особей .
2.6. Определение аминокислотного состава адгезина из сыворотки крупного рогатого скота.
2.7. Определение биологической активности адгезина
2.7.1. Определение адгезионной активности .
. 2.7.2. Определение действия адгезина на пролиферацию фибробластов китайского хомячка в культуре
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ .
3.1. Выделение, очистка и свойства адгезина из
сыворотки крови .
3.1.1. Выделение адгезина из сывороток
крови .
3.1.2. Метод очистки адгезина из сыворотки
крови .
3.1.3. Аминокислотный состав адгезина .
3.1.4. Стабильность препаратов адгезина .
3.1.5. Молекулярный вес адгезина
3.1.6. Исследование состояния адгезина в сыворотках в развитии.
3.2. Исследование биологического действия адгезина .
3.2.1. Взаимодействие адгезина с клеточной поверхностью и его влияние на адгезию . клеток
3.2.2. Исследование влияния адгезина.на
пролиферацию клеток
3.3. Исследование адгезина из лейкоцитарной
сыворотки .
ЗАКЛЮЧЕНИЕ .
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


П коллаген хряща, стекловидного тела тип Ш коллаген эмбриональной кожи, стенок сосудов, гладких мышц типы 1УУП коллагены базальных мембран Гсм. I. В качестве лигандов такой подложки используются гликопротеины фибронектин, ламинин, хондронектин. Фибронектин гликоцротеин, участвующий в адгезии клеток мезенхимного происхождения фибробластов, шобластов, клеток гладких мышц и др. I и Ш I ii . . i . i . У типа I i . v . ,, I. Хондронектин гликопротеин, синтезирующийся хондроцитами и опосредующий их прикрепление к коллагену типа П I i . i . I , 1. Многочисленные исследования, посвященные изучению механизма адгезии клеток к субстратам, были цроведены на культурах фибробластов. В связи с этим ниже будут рассмотрены результаты, полученные, в основном, при исследовании этих клеток. Адгезия клеток к субстрату является сложным многостадийным Процессом, включающим начальное прикрепление, радиальное распластывание и поляризацию клетки 1см. Васильев, Гельфанд, I. Первая фаза адгезии клетки ее прикрепление к поверхности субстрата. Эта фаза включает взаимодействие между рецепторами клеточной поверхности и соответствующими лигандами фибронектин ламинин, хондронектин, расположенными на субстрате. Гсм. Васильев, Гельфанд, I. Вторая фаза адгезии клеток к субстрату клеточное распластывание, которое начинается с того, что на периферии клетки образуются псевдоподии различной формы. Концами псевдоподий клетка прикрепляется к подложке. Соединившись друг с другом, псевдоподии образуют так называемую ламеллярную цитоплазму специализированную периферическую структуру, прикрепленную к подложке. За счет натяжения со стороны прикрепленных псевдоподий клетка приобретает уплощенную форму. Распластавшаяся клетка сначала имеет кольцевидно распластанную форму. Это выражается в том, что ламеллярная цитоплазма кольцом располагается вокруг центральной части клетки. Далее происходит так называемая поляризация клетки разделение края клетки на активные и стабильные участки. К каждому активному участку цримыкает участок ламеллярной цитоплазмы, на наружном крае которой образуются новые псевдоподии. Посредством образования, прикрепления и сокращения псевдоподий на активных участках края клетка передвигается по субстрату 1смВасильев, Гельфанд, I. Важная роль в распластывании клеток отводится пучкам актиновых филаментов актиновым канатам ГвхЛпа а1. Актиновые канаты появляются во время ранней стадии распластывания и заметны в клетках, показывающих высокий уровень распластывания. Установлено, что в состав актиновых канатов входят миозин Ii еЬ а1. Г Гсапе ег а1. Аактинин 1Ьаааг11ее, 3. СоисЬтап а1. ,, i. На рис. I схематично изображены компоненты, которые выявляются в зоне фокального контакта, образованного цри адгезии фибробластов к подложке. Предполагается существование трансмембранной связи между белками внеклеточного матрикса и белками внутриклеточного цитоскелета цри образовании фокальных контактов клетки с субстратом Шупев, i, . I. В настоящее время идентифицированы вещества, осуществляющие такую СВЯЗЬ 1см. . Предполагается, что образование фокального контакта вызывает формирование исходящего из него пучка актиновых микрофиламентов, который выполняет функцию стабилизатора контакта ГБершадский и др. Свиткина и др. I рис. Помимо фокальных контактов, при которых расстояние между мембраной и подложкой достигает нм, обнаружены также близкие контакты клетки с поверхностью субстрата расстояние между мембраной и подложкой около нм. Образование близких контактов при распластывании и движении фибробласта происходит на активном крае клетки I i, , . В настоящее время в литературе обсуждается два возможных механизма клеточного распластывания. Согласно первому механизму, связанные с субстратом лиганды, индуцирующие распластывание, взаимодействуют со специальным классом клеточных поверхностных рецепторов, которые, в свою очередь, могут взаимодействовать с внутриклеточным цитоскелетом. КЖВТКА. Рже.