Молекулярные механизмы "обратной сигнализации", опосредованной Fas-лигандом

• Автор: Прусакова, Ольга Вадимовна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 101 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Система лиганд

1.1. Структура, экспрессия и функции антигена

1.2. Структура, экспрессия и функции лиганда

1.3. Роль лиганд системы в нормальном функционировании организма.

2. Пути передачи сигналов, опосредованные антигеном.

2.1. Передача сигналов, опосредованная комплексом .

2.2. Передача сигналов, опосредованная комплексом XX.

2.3. Взаимодействия с белками, отличными от и XX.

2.4. Липидные микродомены клеточных мембран и
3. Обратная сигнализация
3.1. Обратная сигнализация, опосредованная некоторыми лигандами семейства.
3.2. Обратная сигнализация, опосредованная лигандом
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
РЕЗУЛЬТАТЫ
1. Клонирование, экспрессия и очистка человеческого рекомбинантного
2. Анализ биологической активности i vi
3. Олигомеризация
4. Противоопухолевая активность i viv
5. Олигомерная форма в сыворотке РА пациентов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


i и i показали, что кросслинкированный I усиливает пролиферацию 8 Тлимфоцитов i, i, i, i, i . лиганда на 4 Тлимфоцитах ингибирует экспрессию I2, и как следствие, подавляет деление клеток и вызывает их гибель . В передаче сигнала посредством лиганда участвуют, повидимому, киназы 1 и 2, фосфолипаза А2, а также ряд белков, содержащих 3 и домены, в частности киназа . i . V . Таким образом, способы активации и пути передачи обратного сигнала, опосредованной парой и лиганд, остаются практически полностью неисследованными. В настоящей работе была предпринята попытка исследовать возможность обратной сигнализации, опосредованной лигандом, в трансформированных клетках различного происхождения, ее направление и ключевые этапы. Цель данной работы заключалась в исследовании условий запуска и этапов реализации лигандзависимой обратной сигнализации в трансформированных клетках. Провести поиск ситуаций i viv, обусловленных реализацией лигандзависимой обратной сигнализации. Структура, экспрессия и функции антигена Ген антигена, включающий 9 экзонов, протяженностью более тыс. ii . . i . ДНК содержит открытую рамку считывания длиной и. . Xi . Сравнительный анализ концевой последовательности с типичными сайтами расщепления сигнальных пептидов показал, что зрелый белок начинается с й от инициирующего кодона аминокислоты . Белок состоит из экстраклсточного 7 а. I типа и принадлежит к семейству рецепторов рецепторов фактора некроза опухолейфактора роста нервов рис. Экстраклеточный домен содержит остатков цистсина, образующих 3 цистеиновых домена, участвующих в связывании лиганда в тримерной форме i . . с Мг кДа. Цитоплазматический участок обогащен заряженными аминокислотами основных и кислых а. Анализ делеционных мутантов позволил выявить в нем два функционально важных домена домен смерти 18 а. Сконцевыс а. . ii . З, определяют гомоассоциацию рецептора и его взаимодействие с адапторными белками i . Анализ мРНК транскриптов в различных типах клеток, проведенный в ряде лабораторий, показал наличие девяти мРНК вариантов , кодирующих изоформы антигена . i . . i . . i . Интронэкзонная организация этих транскриптов показывает, что они являются результатом альтернативного сплайсинга гена . Предложенная номенклатура транскриптов антигена основана на отсутствии того или иного экзона в зрелой мРНК растворимых форм антигена . . x6 предыдущее название , . i . x3,4 предыдущее название 2, i . x3,4,6 предыдущее название 3, i . x4 и x4,6 . x4,7 i . За исключением x6, сплайсинг в котором не нарушает открытую рамку считывания , во всех остальных вариантах делеции приводят к сдвигу с появлением преждевременных стопкодонов. Изоформы человеческого рецептора представлены на рисунке 2 i . Кроме полноразмерной мРНК экспрессируются несколько дслеционных вариантов мРНК рецептора. По крайне мере пять из них кодируют растворимый рецептор. Исследования показали, что эти изоформы растворимого рецептора i vii ингибируют апоптоз, вызванный лигандом. Функциональное сходство этих изоформ обусловлено, скорее всего, первыми аминокислотами зрелого белка, потому что только эта область одинакова для всех молекул. Рис. I. Структура рецептора и . Полноразмерный рецептор состоит из 5 аминокислот. рецептор содержит область, кодирующую сигнальный пептид 1 а. I а. II 8 а. 1II 94 а. ТМ 40 а. 18 а. Сконцсвые а. Белок короче полноразмерного на а. ТМ40 а.