Биологически активные в сверхмалых дозах регуляторные белки, выделенные из тканей млекопитающих

• Автор: Борисенко, Андрей Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.02, 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 139 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ стр.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1ЛИТЕРАТУРЫЙ ОБЗОР

Пространственнофункциональная организация ткани печенн

Пространственнофункциональная организация ткани легкого

Пространственнофункциональная организация ткани тонкого кишечника

Ультраструктура отдельных компартментов межклеточного пространства в печенн позвоночных

Адгезиометричсские методы исследования

Молекулярные основы клеточной адгезии

Регуляторные белки, биологически активные в СМД

Биологически активные в сверхмалых дозах адгезионные белки.
выделенные из печенн млекопитающих
Кислые адгезионные белки печени млекопитающих
Сывороточный регуляторный белок, биологически активный в сверхмалых дозах
Биологическая активность сывороточного регуляторного белка
Свойства биологически активных в СМД регуляторных белков
ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Получение экстракта ткани печени, легкого и тонкого кишечника
Получеш1е супернатагтов экстрактов ткани печени, легкого, тонкого кишечника
Получение супернатанта желчн крупнорогатого скота
Получение супернатанта сыворотки крови крутнюрогатого скота
Получение фракций соответствующих экстрактов и супернатантов метолом пзоэлектрофокусирования
Определение концентрации белка
Электрофорез белков в полиакриламидном геле
Обращеннофазовая высокоэффективная жидкостная хроматография исследуемых фракций ВЭЖХ
Определение вторичной структуры с помощью метода кругового дихроизма
Определение гидродинамического радиуса и формы частиц РЬ в водном
растворе
2 Определение радиуса частиц РБ, методом атомносиловой микросхопии
2 Определение влияния растворов, содержащих РБ. на вязкоупругие свойства мембран гепатоцигов мыши при кратковременном органном культивировании ш vi
2 Получение кроличьей поликлональной антисывороткн на РБ
выделенный из печенн и сыворотки крови
2 Иммунофермекгный анализ антител 1
2 Иммуногнстохимическос исследование локализации РБ печени и
сыворотки крови с использованием I конъюгированных антител
2 Культивирование печени тритона i vi
2 Исследование противовирусной активности регуляторных белков
2 I рнготовленис гистологических срезов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Выделение и очистка ретуляторных белков печенн, легкого, гонкого
кишечника крыс ИI, а также желчи КРС
3.2. Изучение мембранотронной активности фракций РБ, выделенных из
печени, легкого, тонкого кишечника и желчи млекопитающих
3.3. Изучение физикохимических свойств фракций РБ, выделенных из
печени, легкого, тонкого кишечника н желчи млекошттающнх
3.4. Исследование локализации кислого РБ печени и слабокислого РБ
сыворотки крови
3.5. Разработка модели для изучения специфического действия
регуляторных белков
3.6. Исследование специфической биолошческой активности регуляторных
белков, выделенных из тканей млекопитающих
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Поры в решетчатых пластинах, образованные фенестрами, могут менять свои размеры в зависимости от давления, создаваемого в синусоидах. Функционирование пор и сохранение их размеров регулируется системой актнновых филаментов, окружающих феиестры. Эидотелиоциты участвуют в захвате и клиренсе макромолекул, относящихся к различным классам биополимеров это и гликопротенны, и глюкозаминогликаны, и липопрогеины частицы мснсс 0,1 мкм . Барьерную функцию осуществляют также и звездчатые ретикуяоэндотелиоциты или клетки Купфера, которые распределены по печеночной дольке преимущественно в пери портальных зонах и способны передвигаться в ткани. Клетки Купфера, по сути, являются макрофагами, происходящими от циркулирующих в крови предшественников макрофагов моноцитов Хем, Кормак. i. Кроме способности поглощать различные клетки, бактерии, вирусы, мультимолекулярные комплексы, макромолекулы и продукты их распада, токсины и др. Купфера, как это и свойственно макрофагам, участвуют в секреции большого количества важнейших белков, в том числе ряда цитокинов, факторов гемопоэза, фибронсктина, эритропоэгина, компонентов комплемента Щеголев, Мишнев, i, . Кроме того, клетки Купфера осуществляют активацию гормонов инсулина, кортикостероидов, оказывают влияние на рост и регенерацию генатоцнтов, а также на регуляцию структурного гомеостаза печени. Форма клеток Купфера вариабельная, амебоидная или звездчатая, на поверхности этих клеток имеются выросты. В синусоиде каждая отдельная клетка заключена в эндотелиальную выстилку i Липоциты расположены в пернсинусондальном пространстве Диссс под эндотелиальными клетками. Отростки лииоцитов могут располагаться между мнкровиллями гспатопитов и эндотслиоцитами, участвуя таким образом в формировании стенок сннусондов. . . i . Но, как правило, липоцнты не имеют собственных батальных мембран, чем и отличаются от перицитов кровеносных капилляре. И тем ни менее, именно липоцнты являются основными продуцентами компонентов ВКМ печени, осуществляя синтез и секрецию коллагенов I, III и IV типов, фибронсктнна, ламннина и протсогликанов . Предполагается, что iкяетки относятся к субпопуляцни лимфоцитов, способных мигрировать в организме и участвовать в определенных событиях иммушттета. iклетки не проявляют фагоцитарной активности, хотя характеризуются наличием большого количества псевдоподий, с помощью которых они прикрепляются со стороны синусоидов к клеткам Купфера и эндотел ношпам. iклетки имеют специфическую ультраструктурную организацию цитоплазмы и, очевидно, участвуют в продукции биологически активных молекул Щеголев, Мишнев, . i . Все четыре типа синусоидальных клеток постоянно контактируют не только между собой, создавая, тем самым, соединитсльногканный остов аиинусов печени, но и взаимодействуют с гспатошггамн, с которыми они образуют определенную структурнофункциональную клеточную систему органа Щеголев. Мишнев. . Это чрезвычайно важный вывод цитологического исследования печени позволил выдвинуть гипотезу о перисниусоидальной функциональной единице, включающей все топы синусоидальных клеток, сосудистые полюсы гспатоиитов и пространство Диссе. Щеголев. Мишнев. Третья по численности популяция клеток печени эпителий желчных протоков халангиоциты, образующий выстилку каналов, которые выводят продукт эклокриннон секреции железы желчь. Первоначально желчь попадает в желчные капилляры, начинающиеся в виде слепых ходов в печеночной паренхиме и имеющие вид тонкой трубочки, стенки которой образованы ПМ двух соседних гепатоцнтов. В участках, прилегающих к портальным трактам, капилляры открываются в так называемые канальца Геринга. Эти канальца имеют незначительную длину и образованы гепатоцнтами и контактирующими с ними клетками Геринга, которые по размеру значительно меньше гепатощггов и имеют собственную базальную мембрану i, . Далее желчь по холангиолам, выстланным холанпюцитамк, стекает в желчные протоки.