Тепловые свойства тканей, ядер, хроматина и ДНК

• Автор: Маджагаладзе, Георгий Варламович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Тбилиси
• Количество страниц: 154 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. СТРУКТУРА ХРОМАТИНА. II

1.1. Структурная организация нуклеосом. II

1.2. Организация нуклеосом в нити диаметром 0 и

1.3. Роль гистона Н1 в организации хроматина.

1.4. Высший уровень организации хроматина

1.5. Тепловые свойства хроматина.

ГЛАВА П. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ. .

2.1. Методика дифференциальной сканирующей микрокалориметрии

2.2. Дифференциальный сканирующий микрокалориметр

а с вводными каналами б с разборной ампулой
2.3. Обработка экспериментальных данных
2.4. Характеристика препаратов
ГЛАВА Ш. МИКРОКАЛОРИМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ НАДМОЛЕКУЛЯРНЫХ СТРУКТУР БИОПОЛИМЕРОВ .
3.1. Тепловые свойства растворов хроматина.
3.2. Тепловые свойства нуклеосом, нуклеосомного кора
и динуклеосом.
ГЛАВА 1У. КАЛОРИМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СЛОЖНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМ.
4.1. Тепловые свойства хроматина в составе клеточных ядер
4.2. Тепловые свойства хроматина, входящего в состав клеток различных тканей
4.3. Термостабильность хроматина и ДНК опухоли
ВЫВОДЫ
Литература


СФРЮ, , на Международном симпозиуме по биокалориметрии Тбилиси, , на Х Международном биофизическом конгрессе Мехико, , на Ш Советскошведском симпозиуме Физикохимическая биология Тбилиси, , на I Всесоюзном биофизическом съезде Москва, , на У Советскофранцузском симпозиуме Структура и функция белков и нуклеиновых кислот Цхалтубо,. Публикации. По диссертационной теме опубликовано работ. Генетическая информация всех живых систем за небольшим исключением РНКсодержащие вирусы и фаги закодирована в структуре ДНК. В каждой клетке молекула ДНК образует комплекс с белками. Этот комплекс для организмов, имеющих истинные клеточные ядра, называется хромати ном. ДНК хроматина связана с основными белками гистонами и малым количеством кислотных белков негистоновыми белками. Работы последних лет показали, что гистоны выполняют структурную роль в процессе функционирования хроматина. Гистоны делятся на 5 основных типов лизинбогатые Н1 или Н5 . Н2А и Н2В и аргининбогатые гистоны НЗ и Н4. Показано также,что длина ДНК хромосомы составляет несколько см,в то время, как линейный размер метафазных хромосом несколько микрон иными словами,ДНК в хромосоме упакована таким образом,что е линейные размеры сокращаются в раз . Предполагается, что благодаря наличию ДНКбелковых взаимодействий, ДНК в хроматине принимает высококомпактную форму. Морфологические исследования показывают,что компактность ДНК меняется с течением клеточного цикла и связана с функцией хроматина. Ясно, что между структурой хромосомы и функционированием генетического аппарата безусловно имеется корреляция. Средняя длина ДНК, приходящаяся на такой элемент, составляет примерно 0 пар оснований нуклеотидов кб. В работе была предложена, модель дезоксинуклеопротеида ДНП. В этой модели основные аминокислоты гистонов связаны с фосфатными группами ДНК,а неосновные аминокислоты выступают наружу,образуя петли,как изображено на рисЛ. Такое расположение гистонов вдоль двойной спирали ДНК способствует образованию структуры,которая под электронным микроскопом видна как нить диаметром А. А РисЛ. За последние лет возникло и укрепилось другое мнение об организации структуры хроматина. Наиболее важный результат, полученный за это время обнаружение субъединиц хроматина нуклеосом, т. ДНПчастиц, регулярно повторяющихся вдоль нитей нуклеоцротеида в препаратах хроматина. Представления о нуклеосомах как о субъединицах хроматина впервые были сформулированы Корнбергом и др. А,состоящую из отрезка ДНК длиной около 0 пар оснований и гистоновго ядра гистонооктагмера. Н2А, Н2В, НЗ и Н4. I. Гистоны НЗ и Н4 образуют тетрамер Н32 и Н42 как в растворе, так и в хроматине . Н3Н42 составляет часть гистоновой глобулы, включающей в себя кроме гистонов НЗ и Н4 по две молекулы гистонов Н2А и Н2В. Гистоновая глобула в комплексе с отрезком ДНК длиной 0 нуклеотидных пар образует нуклеосому. ДНК хроматина расщепляются на фрагменты длиной 0 пар основа ний,причем размеры всех других фрагментов кратны этой длине0, 0,0 . ДНК длиной 0 пар оснований возрастает с увеличением времени инкубации ядер эндогенной нуклеазой . ДНК той же нуклеазой специфический набор фрагментов не образуется, и ДНК гидролизуется на олиго и мононуклеотиды. Хроматиновая нить в электронном микроскопе видна как непрерывная цепочка, вдоль которой на. А , . Исследование кинетики распада ДНК хроматина в клеточном ядре под действием микрококовой нуклеазы показало, что ДНК выборочно разрушается при воздействии нуклеаз . Вначале происходит расщепление межнуклеосомной ДНК линкерДНКс образованием относительно стабильных нуклеосомных корчастиц или коровых частиц, состоящих из гистонового октамера и ДНКфрагмента длиной 0 пар оснований и только после этого происходит расщепление ДНК нуклеосомной корчастицы. Опыты по перевариванию хроматина в составе клеточных ядер различных тканей показали, что длина ДНК в коровых частицах неизменна 0 пар оснований, длина же пЛИНкерДНК меняется в пределах от до 0 пар оснований , .