Структурные изменения эритроцитарных и липидных мембран при действии тритерпеновых гликозидов женьшеня C.A. Meyer

• Автор: Елемесов, Руслан Ерланович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 104 с. : ил.

1. Гиперосмотический гемолиз эритроцитов и действие фракции сапонинов и тритерпеновых гликозидов.
2. Влияние гликозидов на термоденатурацию белков мембранного скелета эритроцитов в изотонических и гиперосмотических условиях

3. Влияние гликозидов и их агликонов на фазовые переходы липидных мембран.

Влияние общей фракции сапонинов

Влияние 8протопанаксатриола.

Влияние 5протопанаксадиола

Влияние гликозидов ЛЫ и Лд

Влияние агликонов на фазовое поведение ДПФХ в смеси с

холестерином.

4. Исследование действия тритерпеновых гликозидов женьшеня на

бислойные липидные мембраны.

Ионные каналы фрахции сапонинов женьшеня в липидной
мембране.
Действие на мембрану протопанаксадиола, протопанаксатриола,
гликозидов Рм, Рд1, Л
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ТГДР тритерпеновые гликозиды даммаранового ряда
ФС фракция сапонинов женьшеня
ПТ Б протопанаксатриол ПД Б протопанаксадиол ХЛ холестерин
ДПФХ Ьехдипальмитоилфосфатидилхолин ПОЛ перекисное окисление липидов
ФСБ фосфатносолевой буфер 0 мМ С1, 5 мМ натрийфосфат, 7,
ДСКдифференциальная сканирующая микрокалориметрия
БП3 белок полосы
с.в. сухой вес мембран в мгмл
РР протоплазматическая гидрофобная поверхность скола мембраны 7тз температура С максимума пика теплопоглощения перехода ДСртах изменение относительной теплоемкости ДЖКГ1К1 в максимуме
пика теплопоглощения интенсивность перехода дН изменение удельной энтальпии денатурации кДжкг
Д2 полуширина пика теплопоглощения перехода в С.
0Р,7 0 мОсм натрийфосфатный буфер, 7,
5Р,8 5 мМ натрийфосфатный буфер, 8,
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В настоящее время из корня женьшеня выделено и идентифицировано около видов гликозидов, которые, как принято считать, и являются основными действующими компонентами i, ,. Разнообразную активность, которую проявляют экстракты женьшеня фракции сапонинов и его высокоочищенные соединения гликозиды на уровне организма, связывают с их влиянием на процессы, происходящие на клеточном уровне. Показана активация внутри и межклеточных сигнальных систем, отдельных ферментов, а также основных биохимических процессов, связанных с ростом и дифференцировкой клеток i . Имеющиеся в литературе данные не позволяют установить детальные механизмы действия гликозидов на биомембрану. До сих пор остается открытым вопрос о природе взаимодействия гликозидов с липидным матриксом биомембраны. По сей день нет единого мнения о механизмах гемолитического действия тритерпеновых гликозидов. Детали же антигемолитической активности гликозидов женьшеня вообще не исследованы i, , , . Выбор в качестве объекта исследования эритроцитарной мембраны обусловлен тем, что структура эритроцитарной мембраны наиболее хорошо изучена и является адекватной моделью мембран клеток других тканей и органов ii, . ДСК. Выбор данного метода обусловлен его высокой эффективностью в исследовании структуры мембран. ДСК является единственным методом, позволяющим на основе анализа температурной зависимости удельного теплопоглощения мембран одновремменно получить информацию о структуре и характере взаимодействия друг с другом всех основных белков спектрина, анкирина, актина, белков 4. Целью работы являлось исследование действия фракции сапонинов и тритерпеновых гликозидов женьшеня С. А.Меуег на эритроциты, эритроцитарные и модельные липидные мембраны. Изучение влияния фракции сапонинов и гликозидов женьшеня на эритроциты при гиперосмотическом гемолизе. Исследование влияния фракции сапонинов и гликозидов на структуру белковых доменов мембран теней эритроцитов в изотонических и гиперосмотических условиях. Исследование действия фракции сапонинов и гликозидов женьшеня на термоиндуцированные фазовые переходы в фосфолипидных мембранах. Изучение каналоформирующих свойств тритерпеновых гликозидов и фракции сапонинов на бимолекулярных липидных мембранах. Полученные данные расширили и углубили знания о механизмах действия гликозидов женьшеня на клеточном и мембранном уровнях. Впервые показано, что гликозиды женьшеня оказывают защитное действие на эритроциты при гиперосмотическом гемолизе. Подробно исследован механизм антигемолитической активности гликозидов. Показано, что антигемолитическая активность гликозидов носит концентрационнозависимый характер. Впервые обнаружены структурные изменения, происходящие в мембранном скелете эритроцитов при действии гликозидов женьшеня и гиперосмотического шока. Изучено влияние гликозидов на фазовое состояние липидных мембран из дипальмитоилфосфатидилхолина. Обнаружено, что гликозиды влияют на упаковку липидов в искусственной мембране. Впервые показано, что при встраивании гликозидов женьшеня в модельные липидные мембраны, содержащие холестерин, происходит формирование одиночных ионных каналов. Получена информация об основных физических характеристиках этих одиночных каналов. Результаты работы вносят вклад в понимание механизмов биологического действия тритерпеновых гликозидов женьшеня на клеточные мембраны и могут быть использованы при разработке антигемолитических препаратов нового поколения для применения в медицинской практике. Результаты диссертационной работы докладывались на 6м Международном симпозиуме i i Таэчжон, Республика Корея, , Международном симпозиуме i i i i Анкара, Турция, , 4й Конференции молодым ученых Пущино, , 2м съезде биофизиков России Москва, , научных конференциях и семинарах ИБК РАН. По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ, из них 7 статей в реферируемых журналах. Диссертация состоит из Введения, Обзора литературы, Материалов и методов, Результатов и обсуждения, Заключения и Выводов, изложенных на 3 страницах. Диссертация содержит рисунков и 1 таблицу. Список цитированной литературы включает 7 источника.