Модуляция структурно-функциональных изменений мембран Т- и В-лимфоцитов крови человека некоторыми химическими и физическими агентами

• Автор: Дмитриев, Евгений Владиславович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 174 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Краткая характеристика Т и Влимфоцитов крови человека

1.1.1. Морфологические и функциональные особенности лимфоидных клеток

1.1.2. Особенности строения мембран Т и Влимфоцитов

1.1.3. Строение и функции отдельных мембранных маркеров

1.2. Действие УФизлучения на иммунекомпетентные клетки

1.2.1. УФиндуцированное пероксидное окисление липидов клеточных мембран. Роль активных форм кислорода

1.2.2. Фотоальтерация гликокаликса лимфоидных клеток

1.2.3. УФиндуцированные изменения состояния компонентов иммунной системы

1.3. Эндогенные иммуностимуляторы
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Методика дефибринирования крови
2.2.2. Получение Т и Влимфоцитов
2.2.3. Определение жизнеспособности лимфоидных клеток
2.2.4. Определение чистоты клеточных суспензий
2.2.5. Облучение лимфоцитов УФсветом
2.2.6. Модификация лимфоцитов некоторыми иммуномодулирующими соединениями
2.2.7. Метод иммуноферментного анализа
2.2.8. Метод розеткообразования
2.2.9. Метод люминолзависимой хемилюминесценции
2.2 Метод определения супероксиддисмутазной активности лимфоцитов
2.2 Метод определения пероксидазной активности лимфоцитов
2.2 Статистическая обработка результатов ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ НЕКОТОРЫХ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ СОЕДИНЕНИЙ НА АНТИГЕННЫЙ ПРОФИЛЬ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
3.1. Изменение уровня экспрессии поверхностных иммуноглобулиновых цепей при действии соединений аден и нового ряда
3.2. Регуляция экспрессии Есрецепторов препаратами аинтерферона
ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ УФИЗЛУЧЕНИЯ НА ЭКСПРЕССИЮ ПОВЕРХНОСТНЫХ АНТИГЕНОВ ТЛИМФОЦИТАМИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
4.1. Изменение уровня Есрецепторов на мембране Тлимфоцитов
4.2. Влияние УФсвета на экспрессию СЭ4маркеров Тлимфоцитами
4.3. Экспрессия антигенов НЕА II класса нативными и УФмодифицированными Тлимфоцитами
4.4. Влияние УФизлучения на розеткообразующую способность Тлимфоцитов крови человека с эритроцитами барана ГЛАВА 5. ИЗМЕНЕНИЕ АНТИГЕННОГО ПРОФИЛЯ МЕМБРАН ВЛИМФОЦИТОВ ПРИ ДЕЙСТВИИ УФИЗЛУЧЕНИЯ
5.1. Влияние УФсвета на уровень Бсрсцепторов на мембране Влимфоцитов
5.2. Влияние УФизлучения на экспрессию СЭ антигенов Влимфоцитами
5.3. Экспрессия некоторых НЬАЛЖ антигенов нативными и УФмодифицированными Влимфоцитами
5.4. Влияние УФизлучения на розеткообразующую способность
Влимфоцитов крови человека с эритроцитами мыши
5.5. Влияние УФмодифицированных Тлимфоцитов на уровень продукции иммуноглобулина нативными Вклетками
ГЛАВА 6. ВЛИЯНИЕ УФСВЕТА НА ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ СВОЙСТВА ЛИМФОЦИТОВ И ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ АНТИОКСИДАНТОВ
6.1. Хемилюминесцентный ответ нативных и
УФмодифицированных Т и Влимфоцитов
6.2. Влияние УФизлучения на функциональную активность ферментативных антиоксидантов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Контакт с антигеном может служить стимулом для пролиферации и дифференцировки Влимфоцита с последующим формированием клона однородных клетокпотомков, конечной стадией развития которых являются плазматические клетки, оптимально адаптированные к продукции больших количеств антител 0. Популяция Влимфоцитов значительно более гомогенна в сравнении с Тклетками. Выделяют два субкласса В, и В2лимфоциты в зависимости от способности клеток синтезировать антитела в присутствии или в отсутствие Тлимфоцитов. Развитие В2клеток идет по Тзависимому пути, который характерен для ответа на большинство антигенов и осуществляется с помощью цитокинов, продуцируемых Тхелперными лимфоцитами С. При воздействии антигена одновременно с Влимфоцитами активируются и Тхелперы. Последние продуцируют ИЛ2, стимулирующий пролиферацию Влимфоцитов и их первое деление 5, 0. Впопуляции вплоть до формирования конечных плазматических клетокп роду центов основной массы иммуноглобулинов. В ходе продукции иммуноглобулинов цитокины способствуют переключению синтеза иммуноглобулинов с М, характерных для ранних этапов гуморального ответа, на другие классы 4. Второй путь формирования иммунного ответа Вглимфоцитами, Тнезависимый, осуществляется без помощи Глимфоцитов и индуцируется некоторыми небелковыми, в том числе микробными, антигенами. Гнезависимые антигены обладают митогенным действием и способствуют формированию клона клеток, продуцирующих 1М антитела 5. Тнезависимый путь иммунного ответа менее эффективен, так как не сопровождается формированием иммунологической памяти и при нем не происходит переключение синтеза антител с на другие классы иммуноглобулинов ,6. Помимо перечисленных выше известна еще одна функциональная категория Влимфоцитов клетки памяти. Влимфоциты памяти формируются в ходе иммунного ответа на антиген, составляют около 1 всех Вклеток, отличаются долголетием и способностью быстро отвечать на повторное поступление антигена. Влимфоциты памяти не имеют морфологических отличий от других Влимфоцитов, но обладают активным геном Ьс. Продукты этого гена обеспечивают устойчивость клеток к апоптозу, и они сохраняются в организме в течение многих лет , 3. Важные функции, выполняемые в организме человека Т и Влимфоцитами, делают их привлекательным обгектом для исследователей, работающих в клеточной биологии. Наряду с этим, лимфоциты периферической крови доступны для выделения, хорошо репрезентируют т уНго состояние организма в целом и поэтому являются классическим объектом для цитологических, иммунологических, биофизических экспериментов. Мембрана лимфоцитов представляет собой классическую модель биологической мембраны, состоящей из бислоя липидов и белков, однако, установлен ряд особенностей ее строения. Количество липидов в лимфоцитах сравнительно невелико. Оно составляет от 2 до 9 сухой массы клеток. Для лимфоцитов характерно низкое содержание холестерина и высокое фосфолипидов . На долю триглицеридов приходится сухой массы клеток . Липидный компонент в различных мембранах лимфоцитов распределн неравномерно. Сфингомиелина в плазматической мембране найдено много и мало в ядерной. Фосфатидилинозина, напротив, мало в плазматической и много в ядерной мембране 8. При действии различных антигенов и митогенов изменение липидного компонента мембраны является одним из ранних проявлений активации клетки. Кроме того, в последние годы получены новые данные об участии сфингомиелина в механизме иммунного надзора 7. Наружный покров Влимфоцитов состоит из нейтральных гликопротеидов, содержащих фукозиды, а наружный покров Тлимфоцитов богат сиалопротеидами и не содержит гликопротеиды гликопротеиды сообщают клетке отрицательный электрический заряд. Выявлены различия в содержании сиаловых кислот между Т и Влимфоцитами. Вклетки содержат больше сиаловых кислот, возможно, изза большей поверхности. Учитывая неодинаковые свойства наружных мембран Т и Влпмфоцитов, было высказано предположение, что различия в характере и интенсивности миграции этих клеток могут контролироваться поверхностными структурами лимфоцитов. Действительно, показано, что компоненты клеточной поверхности играют определнную роль в рециркуляции лимфоцитов. Предполагается, что углеводные компоненты мембраны лимфоцитов являются частью рецепторов, содействующих эктотаксису .