Бинуклеарный микроядерный метод: оценка возможности биологической индикации и дозиметрии радиационного поражения

• Автор: Михайлова, Галина Федоровна
• Шифр специальности: 03.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Обнинск
• Количество страниц: 104 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. История развития микроядерного метода

1.2. Природа микроядер

1.3. Спонтанная частота микроядер в лимфоцитах крови человека.

1.4. Кривая дозаэффект выхода микроядер и эффект мощности дозы при действии редкоионизирующего излучения.

1.5. Кривая дозаэффект выхода микроядер при воздействии нейтронов и ОБЭ

1.6. Возможность оценки дозы бинуклеарным микроядерным методом

П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Методика получения бинуклеарных клеток с использованием чистых выделенных на градиенте фиколлверографин из цельной крови лимфоцитов
2.2. Методика получения бинуклеарных клеток с использованием плазмы крови человека
2.3. Критерии идентификации и учета микроядер в бинуклеарных клетках.
2.4. Источники излучения и условия облучения культуры лимфоцитов
2.5. Схема проведенных экспериментов и статистическая обработка результатов.
Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
3.1. Модификация метода культивирования лимфоцитов крови
человека с цитохалазиномБ с целью получения бинуклеарных
клеток
3.2. Сравнительный анализ частоты бинуклсарпых клеток с микроядрами и числа мякл в зависимости от дозы облучения при различных методах культивирования лимфоцитов
3.3. Спонтанная частота бинуклеарных клеток с микроядрами и числа мякл в лимфоцитах крови человека.
3.4. Зависимость дозаэффект выхода бинуклеарных клеток с микроядрами и числа мякл после гаммаоблучения культуры лимфоцитов человека
3.5. Зависимость дозаэффект выхода бинуклеарных клеток с микроядрами и числа мякл при облучении культуры лимфоцитов человека нейтронами и ОБЭ
У. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Выход бинуклеарных клеток с микроядрами и числа мякл при гаммаоблучении культуры лимфоцитов человека в диапазоне низких доз 0 0,5 Гр характеризуется сложной зависимостью с наличием плато на дозовой кривой, возможно, обусловленной действием репарационных систем клетки. Дозовая зависимость выхода бинуклеарных клеток с микроядрами и числа мякл при гаммаоблучепии в диапазоне доз 0 2 Гр хорошо описывается линейноквадратичной функцией. Дозовая зависимость выхода бинуклеарных клеток с микроядрами и числа мякл при облучении культуры лимфоцитов человека нейтронами со средней энергией 0, МэВ в диапазоне доз 0 2 Гр описывается линейноквадратичной функцией с отрицательным квадратичным коэффициентом в области высоких доз. Радиочувствительность лимфоцитов периферической крови человека при облучении i vi не зависит от присутствия аутологичной плазмы. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Практическая значимость работы определялась важностью полученных результатов для биологической дозиметрии острого облучения. На основании проведенных исследований разработаны калибровочные кривые для гаммаоблучения Со в диапазоне доз 0, 2,0 Гр и для нейтронов со средней энергией 0, МэВ в диапазоне доз 0, 1,5 Гр. Представлены методические рекомендации по определению величины поглощенной дозы с помощью калибровочных кривых по бинуклеарным клеткам с микроядрами при остром гаммаоблучении и по числу мякл при нейтронном облучении по теме Алмазник, гос. Результаты диссертационной работы использованы в методических рекомендациях Министерства Обороны Российской Федерации Диагностика радиационных поражений . АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Результаты диссертационной работы были представлены и докладывались на VI Всесоюзном совещании ио микродозиметрии Канев, , на I Всесоюзном радиобиологическом съезде Москва, , Всесоюзной конференции, приуроченной к летию со дня рождения Н. В. ТимофссваРессовского Обнинск, . ПУБЛИКАЦИИ. Полученные данные представлены в заключительном отчете НИР Разработка способа определения поглощенной дозы острого облучения у личного состава ВМФ по цитогенетическим показателям лимфоцитов периферической крови, гг. Основные результаты работы изложены в 8 публикациях, включая 3 журнальные статьи. СТРУКТУРА РАБОТЫ. Диссертационная работа состоит из введения, литературного обзора, материалов и методов, экспериментальных исследований, обсуждения и выводов. Работа изложена на стр. Список литературы, использованный в данной работе, содержит наименование, из которых работ отечественных и зарубежных авторов. В последнее время в радиационноцитогенетических исследованиях все большее применение находит бинуклеарный микроядерный метод с применением цитохалазинаБ для анализа структурных повреждений хромосом. Учитывая простоту и быстроту подсчета микроядер в бинуклеарных клетках по сравнению с метафазным анализом аберраций хромосом, данный тест может с успехом использоваться в качестве метода биологической дозиметрии при радиационном поражении организма. Однако для этого необходимо иметь точное представление о природе микроядер, знать спонтанную частоту микроядер в лимфоцитах человека, кривые дозаэффект выхода микроядер в лимфоцитах человека при различных типах облучения редко и плотноионизируещего, влияние мощности дозы на выход микроядер. Знание этих факторов позволит оценить возможности установления дозы при радиационных поражениях человека микроядсрпым методом с использованием цитохалазинаБ. В году в эритроцитах костного мозга обнаружил включения, которые были по структуре и склонности к окраске подобны ядру, но значительно меньше его по размерам. Затем, эти включения были подробно описаны и в классической гематологии получили название телец . Позднее такого же типа включения были найдены и в других клетках сперме крыс, клетках проростков корешков растений и лимфоцитах периферической крови животных и человека. В х годах, сначала на клетках проростков корешков растений , , а затем на лимфоцитах периферической крови животных , и костном мозге человека i .