Структурные изменения ДНК при действии низкоинтенсивной ионизирующей радиации в малых дозах

• Автор: Заварыкина, Татьяна Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 168 с. : ил.

Содержание
Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Структура макромолекулы ДНК

1.1.1. Полиморфизм спирали ДНК, ее канонические и неканонические формы

1.1.2. форма ДНК и ее функциональная роль в клетке

1.1.3. Организация хроматина в клетке эукариот

1.2. Основные типы радиационных повреждений ДНК и механизмы их репарации

1.2.1. Повреждения ДНК под действием ионизирующей радиации ИР

1.2.2. Репарация радиационных повреждений ДНК и следствия нарушений в этом процессе

1.3. Особенности действия низкоинтенсивной ИР в малых дозах на биологические объекты

1.4. Принципы радиационной защиты биологических объектов Глава 2. Методы исследования
Глава 3. Результаты исследования и обсуждение
3.1. Действие малых доз ИР на ДНК селезенки мышей
3.1.1. Особенности действия малых доз ИР на структуру ДНК мышей линий с различной радиорезистентностью 1x1, и
3.1.2. Действие пероксида водорода на структуру ДНК i vi и i viv
3.1.3. Влияние ИР в малых дозах на структурные характеристики ДНК при развитии лейкоза мышей
3.2. Структурные особенности ДНК лимфоцитов крови при канцерогенезе человека
3.3. Изучение влияния препаратов фенозана, 2,5дифенилоксазола ДФО и его производных на структуру ДНК при низкодозовом облучении
3.2.1. Действие фенозана на структуру ДНК селезенки при облучении мышей Р1 СВАХСВ и развитии лейкоза мышей линии АКК.
3.2.2. Модифицирующее влияние ДФО и его производных на радиационные повреждения ДНК селезенки мышей
3.2.3. Изучение совместного действия фенозана и ДФО и его производных на ДНК мышей Ва1Ьс
Заключение
Выводы
Список литературы


и 5, образующих с помощью топоизомеразы II один супервиток, который закреплен в основании молекулой прочно связанного белка ядерного матрикса. Предполагают, что посредством этих петель ДНК прикрепляется к ядерному матриксу. Данные петли с участками ДНК сохраняются и в выделенных препаратах ДНК Жижииа Г. П., . Обобщая, можно сказать, что в целом ДНК в клетке, безусловно, находится в Вформе, однако отдельные ее участки могут иметь отличающуюся структуру в зависимости от условий среды и потребностей самой клетки. Идентифицировать форму ДНК можно с помощью таких физических методов, как КД в УФобласти спектра, Раман и ЯМРспектроскопия, гсльэлектрофорез топоизомеров плазмид, светорассеяние и фильтрация через нитроцеллюлозу при слабом разрежении. Последний метод в сочетании с УФспектроскопией позволяет обнаруживать наличие участков в макромолекулах ДНК, поскольку связывание их с НЦфильтрами удерживает на фильтре всю молекулу и изменение оптической плотности при 0 нм становится измеримым Жижина Г. П., . Необходимо отметить, что ДНК, в отличие от Вформы, обладает высокой иммуногенностью и возможно создание как поли, так и моноклональных антител для нее Е. М., , . Особенность вторичной структуры формы ДНК важна при изучении действия ионизирующей радиации ИР и состоит в том, что на поверхность молекулы выходят атомы 7 и С8 гуанина, что является причиной их доступности атаке свободными радикалами воды при облучении. Кроме того, напряжение суперспирализации вызывает локальное нарушение Нсвязей в сайтах, что также повышает выход разрывов ДНК при действии ИР Е. В эукариотической клетке двойная спираль ДНК организована в хромосомы, которые вместе с гистоновыми и иегистоновыми белками представляют собой хроматин. Компактизация молекулы ДНК в хроматине в значительной мере определяется взаимодействием с основными белками гистонами. Помимо гистонов, хроматин содержит большое количество так называемых негистоновых белков разных ферментов, участвующих в репликации, транскрипции и других процессах, регуляторных белков и белков ядерного матрикса Не . ДНК в хроматине имеет несколько уровней организации, которые обеспечивают ее компактность в ядре. Самый первый из них нуклеосомная фибрилла. ДНК в Вформе намотана на дисковидный гистоновый октамер, в котором для этого имеются соответствующие борозды, образуя 1, негативных супервитка 67 и. Нуклеосомный диск имеет 0 в диаметре по его окружности намотана ДНК и А в высоту. Между корами находятся участки лиикерной ДНК размером 00 . v С. А., i . ., . При этом точки входа и выхода ДНК из нуклеосомы располагаются не с одной, а с противоположных сторон ее. При дальнейшей упаковке с помощью гистона Н1 формируется равномерная фибрилла диаметром 0 А. При этом места входа и выхода ДНК скреплены гистоном Н1 и практически совпадают, а гистон Н1 располагается в регионе линкерной ДНК рис. Зенгер В. Ii . Однако необходимо отмстить, что существуют участки ДНК, которые вообще не способны образовывать нуклеосомы, как, например, НК в форме i . М. М., v . ., В. Следующий уровень организации хроматина соленоид, или нуклеомер. Это более толстые фибриллы 0 А в диаметре, состоящие из периодических утолщений и перетяжек. Они образованы из 0 Афибриллы, свернутой в спиральную структуру. На один шаг соленоида приходится в среднем 6 нуклеосом, что дает при их плотной упаковке диаметр 0 А и шаг спирали 0 А Георгиев Г. П., . Большую роль в организации данной структуры играют гистоны Н1, которые оказываются локализованными в центре соленоида и, следовательно, находятся в тесном контакте друг с другом. Их взаимодействие между собой и вносит основной вклад в стабилизацию соленоида . i . Вероятно, соленоидная упаковка характерна для неактивного хроматина. При переходе его в транскрипционноактивное состояние соленоид должен разрушаться. Третий уровень организации хроматина петли ДНК.