Исследование частоты мутантных по локусу гликофорина A клеток у лиц, подвергшихся действию ионизирующего излучения

• Автор: Селиванова, Елена Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Обнинск
• Количество страниц: 105 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Методы биологической дозиметрии.

1.2 Метод определения клеток, мутантных но локусу гликофорина Л.

1.2.1 Характеристика гликофорина А и его М и аллельных

1.2.2 Разные способы определения мутантных по локусу гликофорина А клеток

1.2.3 Уровень частоты мутантных клеток у контрольных

доноров
1.2.4 Использование гликофоринового теста в биологической дозиметрии острого радиационного воздействия

1.2.5 Пролонгированное облучение и уровень мутантных клеток

по локусу гликофорина А
1.2.6 Определение уровня мутаций в соматических клетках с
целью оценки риска онкологических заболеваний
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Доноры.
2.2 Фенотипирование крови доноров
2.3 Фиксация клеток
2.4 Иммунофлуоресцентное окрашивание фиксированных эритроцитов и их анализ. Подбор оптимальных условий протекания реакции
2.5 Приготовление биотинилированных антител
2.6 Проверка качества биотинилирования.
2.7 Приготовление антител, меченных ФИТЦ.
2.8 Проверка качества конъюгирования антител.
2.9 Статистическая обработка результатов.
ГлаваЗ. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Воспроизводимость лабораторного контроля.
3.2 Зависимость выхода мутантных по локусу гликофорина А эритроцитов от возраста контрольных доноров
3.3 Зависимость частоты мутантных клеток от дозы острого облучения
3.4 Зависимость частоты мутантных клеток от дозы пролонгированного облучения
3.5 Частота мутантных клеток по локусу гликофорина А у онкологических больных.
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1 Анализ распределения эритроцитов по экспрессии Мформы гликофорина А
4.2 Частота мутантных клеток в различных популяциях
необлученных контрольных доноров.
4.3 Влияние острого облучения на уровень мутантных клеток по локусу гликофорина А.
4.4 Влияние пролонгированного облучения на уровень
мутантных клеток по локусу гликофоринова А.
4.5 Повышенная частота мутантных по локусу гликофорина А клеток как возможный критерий для формирования группы риска онкологических заболеваний.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Глава 1. Методы биологической дозиметрии. Метод определения клеток, мутантных но локусу гликофорина Л. Глава 2. Доноры. Иммунофлуоресцентное окрашивание фиксированных эритроцитов и их анализ. Проверка качества биотинилирования. Приготовление антител, меченных ФИТЦ. Проверка качества конъюгирования антител. Статистическая обработка результатов. ГлаваЗ. Воспроизводимость лабораторного контроля. Частота мутантных клеток по локусу гликофорина А у онкологических больных. Глава 4. Влияние острого облучения на уровень мутантных клеток по локусу гликофорина А. Повышенная частота мутантных по локусу гликофорина А клеток как возможный критерий для формирования группы риска онкологических заболеваний. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. ВЫВОДЫ. С момента открытия мутагенного действия ионизирующих излучений на живые организмы Меллером в году прошло немало времени, но проблема воздействия радиации стоит сейчас еще острее, чем прежде. Человечество реально вступило в эпоху практического применения ядерной энергии и катастроф, с ней связанных. При этом возникла острая необходимость решения таких жизненно важных проблем, как влияние повышенного фона радиации и других мутагенных факторов окружающей среды на наследственность человека оценка влияния малых доз и отдаленных последствий облучения, как фактора, вызывающего злокачественное перерождение клеток и т. После аварии на ЧАЭС проблема особенно обострилась в связи с настоятельной необходимостью ретроспективной оценки накопленных доз в различных популяциях облученных людей ликвидаторов аварии и жителей загрязненных радионуклидами территорий. Традиционный для биодозимстрии метод оценка нестабильных хромосомных аберраций позволяет оценить поглощенную дозу в короткие сроки после облучения. Для оценки радиационного воздействия в отдаленные сроки более перспективными являются методы, основанные на выявлении стабильных мутаций в геноме. В качестве материала для этих тестов используются клетки крови. Несомненно метод определения мутантных по локусу гликофорина А клеток является одним из наиболее перспективных в этом отношении, поскольку мутации но этому локусу способны сохраняться и даже накапливаться в течение всей жизни человека Я. О., У. Кроме того, к преимуществам метода следует отнести то, что он выполняется на эритроцитах и для исследования необходимо всего 0,1 мл периферической крови, т. Анализ производится на проточном цитофлуориметрс, что делает метод высокотехнологичным и позволяет избегать рутинных и малопроизводительных методик. Возможность использования гликофоринового теста с целью биодозиметрии исследована американскими и японскими учеными у лиц, переживших атомную бомбардировку Ьап1о1з Я. i У. Ь. а а1, , Аклуата М. Ими показано, что число мутантных клеток, выявленных данным методом, положительно коррелирует с дозой, полученной при остром облучении. Генотоксическое действие пролонгированного облучения представляется практически неизученным, несмотря на его актуальность. Целью работы является оценка информативности гликофоринового теста для биодозиметрии и биоиндикации у людей при пролонгированном облучении в сравнении с острым облучением. Глава 1. Обзор литературы Ы. Изучение мутаций, возникающих под действием облучения различных живых объектов дрозофила, кузнечик, традесканция, лук, бобы и т. Это и было впервые предложено в году . Из клеток организма человека наиболее подходящими для целей биологической дозиметрии являются клетки периферической крови лимфоциты, прежде всего, т. Севанькаев и др. Кроме того, для лимфоцитов характерна высокая радиочувствительность и достаточно строгая количественная зависимость между частотой аберраций и дозами облучения.