Мутагенное действие излучений с разной ЛПЭ на клетки млекопитающих и хромосомная нестабильность HPRT-мутантных субклонов

• Автор: Кошлань, Игорь Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Дубна
• Количество страниц: 92 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ .

Глава 2. БИОЛОГИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Условия культивирования клеток .

2.2. Источники излучений и их физические характеристики .

2.3. Культивирование клеток для оценки выживаемости и частоты

мутаций .

2.4. Селекция НРЛТмутантов для проведения цитогенетического анализа

2.5. Приготовление препаратов для цитогенетического анализа .

2.6. Статистическая обработка данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Летальное и мутагенное действие излучений с разной ЛПЭ на клетки млекопитающих
3.2. Цитогенетические характеристики спонтанных и радиационноиндуцированных НРЛТмутантных субклонов .
3.2.1. Продолжительность роста НРИТмутантных субклонов .
3.2.2. Хромосомные аберрации в клетках НРЛТмутантных субклонов
3.2.2.1. Спонтанные НРИТмутантные субклоны .
3.2.2.2. Радиационноиндуцированные НРЛТмутантные субклоны .
3.2.3. Спектры хромосом НРЛТмутантных субклонов
3.2.4. Тетраплоидные НРЛТмутантные субклоны
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
ВЫВОДЫ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЛИТЕРАТУРА


Мутагены физической и химической природы индуцируют широкий спектр различных наследуемых повреждений, которые, по общепризнанному мнению, лежат в основе злокачественного перерождения клеток и возникновения в последующих поколениях наследственных заболеваний. Причем в обоих случаях биологические последствия существенно отдалены по времени от момента непосредственного действия вызывающих их повреждающих агентов. Имеются данные Бочков Н. П. и Чеботарев А. И., , свидетельствующие о том, что от до хромосомных болезней человека являются следствием вновь возникающих мутаций в половых клетках здоровых родителей, при этом большинство их являются рецессивными . ., и не проявляются в нервом поколении. По мере их накопления, вследствие процессов авторепродукции и распространения в генофонде человеческой популяции, будет повышаться и доля наследственных заболеваний. Задача изучения мутагенного действия ионизирующего излучения, особенно на клетки млекопитающих и человека, весьма сложна и требует создания новых методов и использования различных подходов для ее решения. К настоящему времени разработан ряд методов ПЦР, блотанализ и тестсистем для оценки мутаций резистентности клеток млекопитающих и человека к ряду химических соединений. Выявлен ряд мутантов по локусам НРКТ, АРКГ, ТК и других, возникающих как спонтанно, гак и при воздействии ионизирующих излучений. При этом данные по радиационноиндуцированному мутагенезу получены, в основном, при воздействии редко ионизирующих электромагнитных видов излучений уи рентгеновские лучи. В настоящее время во многих научных лабораториях проводятся исследования разных типов мутаций отдельных генов, возникающих в клетках млекопитающих при воздействии ионизирующих излучений. Что касается мутагенного действия плотно ионизирующих излучений и особенно тяжелых ионов, то оно остается слабо изученным. Имеются весьма немногочисленные и несистематичные сведения по данному вопросу. В связи с изложенным, учитывая актуальность, научную и практическую значимость изучения генетического действия ионизирующих излучений разного качества, а также неполноту сведений в этой области, мы провели сравнительные исследования закономерностей мутагенного действия на клетки млекопитающих разных видов излучений в широком диапазоне значений линейной передачи энергии ЛПЭ. Нами также исследованы особенности цитогенетических характеристик НРКТмутантных субклонов, выращенных из одиночных клеток, сохраняющих возникшие в них НРКТмутации в последующих поколениях. Целью настоящего исследования явилось изучение закономерностей мутагенного действия на клетки млекопитающих редко и плотно ионизирующих излучений в широком диапазоне значений их ЛПЭ улучи, протоны высоких энергий, ускоренные ионы гелия, углерода и азота с разными энергиями. Оценить но цитогенетическим показателям специфику мутагенного действия на клетки млекопитающих редко и плотно ионизирующих излучений с разной величиной ЛПЭ. Получены НРЛТмутантные субклоны клеток китайского хомячка, индуцированные протонами с энергией 1 ГэВ ЛПЭ 0. ГэВ, и спонтанными мутантами. Результаты проведенного исследования имеют как фундаментальное, гак и прикладное значение. Прежде всего, они пополняют сведения о мутагенном действии ионизирующих излучений разного качества на клетки высших эукариотов, в том числе плотно ионизирующих излучений с разной величиной ЛПЭ. Они могут иметь значение для установления количественных и качественных закономерностей формирования мутаций в клетках млекопитающих и человека. Результаты работы могут быть использованы для оценки отдаленных последствий воздействия ионизирующих излучений с разными физическими характеристиками на клетки млекопитающих и человека. Такие сведения важны для уточнения критериев при гигиеническом нормировании воздействия излучений с разными физическими характеристиками при работе человека в радиационных условиях на Земле и в Космосе, для научного обоснования предельно допустимых уровней облучения человека такими видами радиации. Результаты исследования могут быть использованы также для радиобиологического обоснования применения разных видов излучений, в том числе плотно ионизирующих, в терапии новообразований у человека в онкологической практике.