Флуоресцентная характеристика изменений структуры ДНК клеток кроветворной системы облученных крыс

• Автор: Кованько, Елена Георгиевна
• Шифр специальности: 03.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 166 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
л
ВВЕДЕНИЕ

Глаза I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Питологические последствия острого тотального

облучения в кроветворной системе животных.

1.2. Изменения нуклеиновых кислот лейкоцитов крови и миеликариоиитов костного мозга после

острого облучения организма.i

1.2.1. Изменения содержания НК лейкоцитов кровиi

1.2.2. Пострадиационные изменения структуры ЛНК.

1.2.3. Пострадиационные изменения ЛНК клеток костного мозга

1.3. Питологические изменения в костном мозге и периферической крови при хроническом облучении.
1.4. Изменения нуклеиновых кислот лейкоцитов периферической кроЕи и миелокаоиоиитов костного мозга при хроническом радиационном воздействии.
глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Объект исследования.
2.2. Материалы и реактивы
2.2.1. Получение материала.
2.3. Облучение в опытах vi.
2.4. Облучение в опытах i viv
2.5. Фракционирование клеток крови.
2.6. Определение концентрации ДНК в лизатах клеток крови.
2.6.1. Определение содержания ДНК нуклеоидов лейкоцитов крови
и ДНК нуклеоидов клеток костного мозга.
2.7. Двухпараметровый флуоресцентный анализ структуры
ДНК нуклеоидов
2.8. Сравнительный анализ структурных параметров ЛНК нуклеоидов лейкоцитов крови и клеток костного мозга
после облучения.
2.9. Цитологические методы
2 Статистическая обработка результатов
Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Ранние гематологические и биохимические эффекты
острого однократного облучения
3. . 1. Изменение количества лейкоцитов крови в течение
1 суток после облучения.
3.1.2. Изменение популяционного состава лейкоцитов периферической крови в сутки после острого гаммаоблучения
3.1.3. Изменение количества миелокариоиитов в течение 1 суток после облучения животных
3.1.4. Изменение популяционного состава миелокариоиитов костного мозга крыс в первые сутки после облучения
3.1.5. Изменение количества ДНК клеток крови и костного мозга
а леивые сутки после острого гаммаоблчения.
3.1.6. Изменения структурных параметров ДНК нуклеоидов клеток крови и костного мозга в течение первых суток после острого облучения.
3.1.7. Изменение структурных показателей ДНК лейкоцитов периферической крови и клеток костного мозга после гаммаоблучения в опытах i vi.
3.2. Цитологические и биохимические изменения крови и
костного мозга б течение мес после острого облучения.
3.2.1. Выживаемость крыс после острого облучения.
3.2.2. Изменения количества лейкоцитов в течение мес после острого облучения.
3.2.3. Изменение количества миелокариоиитов в течение мес
после острого облучения
3.2.4. Изменение популяционного состава лейкоцитов периферической крови.
3.2.5. Изменение состава миелокариоиитов костного мозга коыс
в течение мес после остоого облучения.
3.2.6. Изменение уоовня ДНК ь лейкоцитах периферической коови коыс
в течение мес после остоого облучения.
3.2.7. Изменение уровня ДНК в клетках костного мозга облученных
крыс в течение мес после острого облучения
3.2.9. Изменения этилий бромил связываошей способности ЭСС ДНК лейкоцитов периферической КРОВИ и клеток костного мозга после острого облучения
3.2.3. Изменение величины КОФ ДНК лейкоцитов крови и ДНК костного мозга крыс в течение мес после острого облучения
3.3. Последствия хронического облучения.
3.3.1. Выживаемость крыс после хронического облучения.
3.3.2. Изменения количества и клеточного состава лейкоцитов и миелокариоиитов в течение мес после окончания хронического облучения
3.3.3. Изменение содержания ДНК нуклеоидов лейкоцитов периферической крови и ДНК клеток костного мозга после окончания хронического облучения КРЫС.
3.3.4. Изменения флуоресцентных показателей структуры ДНК лейкоцитов периферической крови и клеток костного мозга в течение мес после окончания хронического облучения
Глава IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ЛИТЕРАТУРА
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ БЭ бромистый этадий
ИФ интенсивность флуоресценции
КОФ коэффициент относительной флуоресценции Ккоф отношение КОФ ДНК нуклеоидов лейкоцитов КРОВИ к КОВ ДНК миелокариоиитов костного мозга крыс Кт отношение ЭСС ДНК нуклеоидов лейкоцитов крови К сСС ЛНК нуклеоидов миелокариоиитов костного мозга крыс НК нуклеиновые кислоты
НК ДНК надмолекулярный комплекс ДНК
СШ средняя продолжительность жизни
ОЛЕ острая лучевая болезнь
ОД одноцепочечные разрывы
ПДН яолидезоксирибонуклеотид
СД смертельная доза облучения
ХС этидий бромид связывающая способность 0АР1 диамедшю2фенилиндол
Е коэффициент молярного поглощения
АВОЭ6 длина волны возбуждения лЭМ длина волны эмиссии
6 ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Анализ этих параметров свидетельствует о ведущей роли популяционных клеточных изменений, происходящих в ранние сроки после острого облучения в системе костный мозг периферическая КРОВЬ. Изменения структуры ДНК. V облученных в дозах 2 и 4 Гр животных, имеют место И Е . Ферической крови. В отдаленный период после острого облучения они практически ОТСУТСТВУЮТ. Снижение мощности дезы хронического облучения существенно изменяет величину и временную динамику структурных изменений ДНКсодержаших клеток в системе костный мозг кровь. Москва. Лушино . Хй научной конференции Восстановительлис и компенсаторные процессы при лучевых поражениях СанктПетербург, , конференции i i ii
, , , конгрессе i i ii i i i. По теме диссертации опубликовано работ в том числе статей 4. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 6 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав, из которых первая посвяшена обзору литературы, вторая описанию методов, третья изложению материалов собственных исследований, четвертая обсуждению результатов. Диссертация завершена выводами. Работа содержит таблиш и рисунка. Библиографический указатель включает 5 работ, в тем числе 0 на русском языке. Процессы, происходящие б системах организма, особенно чувствительных к радиации. В первую очередь эти исследования были посвящены динамике изменений клеточных популяций и качественного состояния клеток как после острого лучевого воздействия, так и после облучения с низкой мощностью дозы V животных и человека Шушнишша А. Л., Груздев Г. П . Белоусова О. И. идр. Ярмоленко С. Л Моничев А. Я. . Килмен С. А Бонд В. КОГГЛ 3 . Последствия острого тотального облучения в кроветворной системе животных. Пострадиационные цитологические нарушения в системе гемопеэза после острого тотального облучения человека и животных протекаот по одним и тем же законам, но имеют место лозовые и видовые различия вс временных параметрах пои развитии этих эффектов Владимиров В. Г Джаракьлн Т. К Груздев Г. П Жербин Е. А.Е. Обычно Бцделяют три Еременные фазы реакции костного мозга ка лучевое поражение в период уменьшения числа клеток Груздев Г. П. Б первой Фазе после острого лучевого воздействия в первые часа количество миелокариоиитов практически не меняется у крыс, облученных в дозах 0. Р. так как презя Фаза представляет собой латентный период поражения клеток радиацией и ее длительность не зависит от дозы облучения в диапазоне доз 0 . Во второй Фазе в течение следующих 4 часов происходит резкое уменьшение числа клеток после облучения в дозах 0. Третья фаза характеризуется экспоненциальным снижением числа клеток с периодом двухкратного уменьшения числа клеток в течение час. Независимо от лозы облучения темпы опустошения в эv фазу одинаковы Груздев Г. П Белоусова О. И. и др. Псодолдаельность третьей фазы зависит от величины дозы облучения. Вторая фаза является самым динамичным периодом постлучевого опустошения костного мозга. Следует обратить внимание на то, что в это воемя подавлен процесс деления клеток митотический блок, наблюдается ускоренный Быброс зрелых клеток в периферическое кровяное русло возникающий при этом нейтрофилез в периферической крови зависит от величины дозы облучения организма, уменьшение количества клеток и изменение клеточного состава костномозговой ткани. Распад и разрушение костномозговых клеток совпадает с периодом раннего некробиоза. На микроскопическом уровне происходит изменение ядерного материала клеток пикноз. Особенно существенно страдают от этих процессов молодые элементы всех ростков костного мозга, но раньше всех гибель и уменьшение числа клеток затрагивает эритроидный ряд вплоть до нормоцитов. Молодые эритрэидные и миелоидные клетки исчезают раньше других из костномозговой ткани при облучении даже в сублетадьных дозах 0 и 0 Р Пушшшина А. Л Груздев Г. П . Белоусова О. И. и др Конглон К. К Флидяер Т. Б периферической коови во второй Фазе наряду с массовой гибелью лимфоцитов выявляют первичный нейтрофилез Белоусова О. И. и др. Груздев Г. П. . Бонд В. Килмен С. А. Гоаевская Б. М. и др.