Влияние раздельного и сочетанного воздействия ионизирующей радиации и ионов свинца на уровень ДНК-белковых сшивок в клетках различных органов животных

• Автор: Григорьев, Михаил Валерьевич
• Шифр специальности: 03.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 116 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

1 .ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

2.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Общая характеристика ДНКбелковых сшивок

2.2. ДНКбелковые сшивки при действии химических агентов

2.3. Биологическое значение ДНКбелковых сшивок.

2.4. Свинец. Токсическая и генотоксическая характеристика.

2.5. Комбинированное действие радиации и тяжелых металлов.

3. Собственные исследования

3.1. Материалы и методы исследования.

3.1.1. Материалы исследования

3.1.2. Методы исследования
3.1.2.1. Количественное определение ДНКбелковых сшивок.
3.1.2.2. Определение однонитевых разрывов ДНК 1ЮРЗметодом
3.1.2.3. Определение содержания свободных сульфгидрильных групп крови амперометрическим титрованием.
3.1.2.4. Гематологические методы
3.1.2.5. Определение клеточности тимуса и селезенки.
3.2. Результаты собственных исследований
3.2.1. Сравнительный анализ ДНКбелковых сшивок и однонитевых разрывов ДНК после острого облучения крыс в разных дозах
3.2.2. Влияние фракционированного облучения крыс с разной интенсивностью на уровень ДНКбелковых сшивок в клетках печени, тимуса, селезенки и лейкоцитах крови.
3.2.3. Влияние длительного воздействия ионов свинца в разных концентрациях на уровень ДНКбелковых сшивок в лейкоцитах крови и клетках лимфоидных органов крыс. Эффект острого облучения на фоне свинцовой интоксикации
3.2.4. Влияние раздельного и сочетанного воздействия хронического внешнего облучения мышей в малых дозах и хронического воздействия ацетата свинца
3.3. Обсуждение результатов исследований
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Результаты сочетанного воздействия ионизирующего излучения и свинца позволяют предположить реализацию запуска дополнительных защитных механизмов в клетках животных, приводящих к снижению регистрируемого уровня ДНКбелковых сшивок, по сравнению с результатами отдельного воздействия радиации или свинца. Определение уровня ДНКбелковых сшивок в лейкоцитах крови животных методом детергентного осаждения может быть рекомендовано для определения степени тяжести поражения генетического аппарата животных и вероятностного прогноза отдаленных последствий при радиационном воздействии и действии ионов свинца. Результаты работы используются в учебном процессе на кафедре радиобиологии, рентгенологии и ГО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина при чтении лекций и проведении лабораторнопрактических занятий. Они используются при выполнении научноисследовательской работы в лаборатории радиобиологии, при выполнении дипломных и курсовых работ. Методические подходы и выводы диссертационной работы используются для проведения радиоэкологического мониторинга в работе лаборатории биоиндикации экологических техногенных аномалий МосНПО Радон. По результатам диссертациионной работы выпущен информационный листок Использование сшивок ДНКбелок в качестве критерия радиационного поражения генетического аппарата клеток крови при многократном облучении с низкой интенсивностью Информационный листок 8. М. МособлЦНТИ, . Материалы диссертации доложены и обсуждены на Третьем съезде но радиационным исследованиям Радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность Москва, октября г. Втором съезде биофизиков России Москва, авгу ста г. По данным диссертации опубликовано печатных работ. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 6 страницах текста и состоит из введения, обзора литературы, глав материалы и методы исследования, результаты собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводов, списка использованной литературы и приложения. В работе имеются таблиц, 1 фотография, рисунков. Список литературы включает 5 источников, в том числе отечественных и иностранных. Результаты сравнительных исследований ДНКбелковых сшивок и однонитевых разрывов ДНК в клетках различных органов крыс после острого облучения животных в разных дозах. Особенности образования ДНКбелковых сшивок в зависимости от тканевой специфики клеток при фракционированном облучении с разной интенсивностью и хроническом поступлении ионов свинца в разных концентрациях. Результаты и выводы, полученные при изучении динамики изменения уровня ДНКбелковых сшивок в клетках лимфоидных органов животных при раздельном и сочетанном воздействии хронического облучения в малых дозах и хронического воздействия ионов свинца. Фундаментальными исследованиями структуры и функций нуклеиновых кислот показано, что функционирование молекулы ДНК в качестве регуляторной клеточной системы происходит в комплексе с белками ядра, образуя сложно организованную структуру клеточного хроматина. Белки ответственны как за многоуровневую укладку молекулы ДНК нуклеосомный уровень, соленоидный, петельный и т. ДНК к ядерному матриксу Георгиев Г. П., . Изменения характера тонких ДНКбелковых взаимодействий в клетке могут приводить к серьезным функциональным последствиям. Рядом исследований было показано, что при действии на клетку ряда факторов физической и химической природы нормальные лабильные комплексы ДНК и белка клеточного хроматина могут быть преобразованы в устойчивые соединения. Такое индуцированное преобразование нормальных лабильных связей ДНКбелок в прочные ковалентные получило название ДНКбелковые сшивки или ДБС i i, , и его рассматривают как один из типов повреждения ДНК . . . ii . . . Первые упоминания о наблюдении такого рода повреждений ДНК встречаются у x Р. i К. С. , которые сообщают о резком снижении количества экстрагируемой ДНК при УФоблучении как бактериальных клеток, так и клеток млекопитающих. Тогда же было высказано предположение о том, что снижение выхода ДНК при экстракции связано с образованием ковалентных сшивок между белком и ДНК x . Н.